分子生物學(xué)原理rna的生物合成(編輯修改稿)
2025-02-14 00:45 本頁(yè)面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 UUUU CCUUUUU 莖環(huán) (stemloop)/發(fā)夾 (hairpin)結(jié)構(gòu) 2022/2/10 分子生物學(xué)原理 莖環(huán)結(jié)構(gòu)使轉(zhuǎn)錄終止的機(jī)理 ? 使 RNA聚合酶變構(gòu)，轉(zhuǎn)錄停頓； ? 使轉(zhuǎn)錄復(fù)合物趨于解離， RNA產(chǎn)物釋放。 5180。pppG 5? 3? 3?5? RNApol 2022/2/10 分子生物學(xué)原理 不依賴 Rho因子的轉(zhuǎn)錄終止模式 R N A 聚合酶DNA 轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物RNA鏈出現(xiàn)莖 環(huán)結(jié)構(gòu)，促進(jìn) 轉(zhuǎn)錄的終止。 RNA聚合酶 的構(gòu)象，使酶不再向下移動(dòng)。 RNA各自形成自己的 局部雙鏈，使雜化鏈更加不穩(wěn) 定，以致轉(zhuǎn)錄復(fù)合物趨于解 體。 接著的一串寡聚 U， 則更是促 進(jìn) RNA新鏈從模板上脫落的 促進(jìn)因素。 2022/2/10 分子生物學(xué)原理 二、真核生物的轉(zhuǎn)錄起始 （一）轉(zhuǎn)錄起始 真核生物的轉(zhuǎn)錄起始上游區(qū)段比原核生物多樣化 ， 轉(zhuǎn)錄起始時(shí) ， RNApol不直接結(jié)合模板 ， 其起始過(guò)程比原核生物復(fù)雜 。 2022/2/10 分子生物學(xué)原理 轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn) TATA盒 CAAT盒 GC盒 增強(qiáng)子 順式作用元件 (cisacting element) 1. 轉(zhuǎn)錄起始前的上游區(qū)段 AATAAA 切離加尾 轉(zhuǎn)錄終止點(diǎn) 修飾點(diǎn) 外顯子 翻譯起始點(diǎn) 內(nèi)含子 OCT1 OCT1： ATTTGCAT八聚體 2022/2/10 分子生物學(xué)原理 2. 轉(zhuǎn)錄因子 能直接、間接辨認(rèn)和結(jié)合轉(zhuǎn)錄上游區(qū)段DNA的蛋白質(zhì)，現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)數(shù)百種，統(tǒng)稱為 反式作用因子 (transacting factors)。 反式作用因子中，直接或間接結(jié)合 RNA聚合酶的，則稱為 轉(zhuǎn)錄因子 (transcriptional factors, TF)。 2022/2/10 分子生物學(xué)原理 參與 RNApolⅡ 轉(zhuǎn)錄的 TFⅡ 蛋白激酶活性，使 C TD 磷酸化TF Ⅱ HA TP as e57 （ ? ） 34 （ ? ）TF Ⅱ E解螺旋酶30 ， 74TF Ⅱ F促進(jìn) R N A po l Ⅱ 結(jié)合及作為其他因子結(jié)合的橋梁33TF Ⅱ B穩(wěn)定 TF Ⅱ D D N A 復(fù)合物12 ， 19 ， 35TF Ⅱ A輔助 TBP D N A 結(jié)合TA F* *結(jié)合 TA TA 盒TB P* 3 8TF Ⅱ D功 能亞基組成，分子量 ( kD )轉(zhuǎn)錄因子磷Ⅱ（ ） （ ）Ⅱ，ⅡⅡⅡⅡ 復(fù)合物， ，Ⅱ盒Ⅱ功 能2022/2/10 分子生物學(xué)原理 3. 轉(zhuǎn)錄起始前復(fù)合物 (preinitiation plex, PIC) 真核生物 RNApol不與 DNA分子直接結(jié)合，而需依靠眾多的轉(zhuǎn)錄因子。 2022/2/10 分子生物學(xué)原理 POLⅡ TFⅡ F Ⅱ A Ⅱ B 由 RNAPol Ⅱ 催化轉(zhuǎn)錄的 PIC POLⅡ TFⅡ F Ⅱ H Ⅱ E TBP TAF TFⅡ DⅡ AⅡ BDNA復(fù)合物 TATA Ⅱ A Ⅱ B TBP TAF TATA Ⅱ H Ⅱ E CTD P PIC組裝完成， TFⅡ H使 CTD磷酸化 2022/2/10 分子生物學(xué)原理 4. 模板理論 (piecing theory) 一個(gè)真核生物基因的轉(zhuǎn)錄需要 3至 5個(gè)轉(zhuǎn)錄因子。轉(zhuǎn)錄因子之間互相結(jié)合，生成有活性，有專一性的復(fù)合物，再與 RNA聚合酶搭配而有針對(duì)性地結(jié)合、轉(zhuǎn)錄相應(yīng)的基因。 2022/2/10 分子生物學(xué)原理 （二）轉(zhuǎn)錄延長(zhǎng) 真核生物轉(zhuǎn)錄延長(zhǎng)過(guò)程與原核生物大致相似，但因有核膜相隔，沒有轉(zhuǎn)錄與翻譯同步的現(xiàn)象。 RNApol前移處處都遇上核小體。 轉(zhuǎn)錄延長(zhǎng)過(guò)程中可以觀察到核小體移位和解聚現(xiàn)象。 2022/2/10 分子生物學(xué)原理 RNAPol RNAPol RNAPol 核小體 轉(zhuǎn)錄延長(zhǎng)中的核小體移位 轉(zhuǎn)錄方向 2022/2/10 分子生物學(xué)原理 核酸酶 RNApol AATAAA GTGTGTG 轉(zhuǎn)錄終止的修飾點(diǎn) 5? 5? 3? 3? 3?加尾 AAAAAAA 3? mRNA （三）轉(zhuǎn)錄終止 —— 和轉(zhuǎn)錄后修飾密切相關(guān)。 2022/2/10 分子生物學(xué)原理 真核生物轉(zhuǎn)錄終止的特點(diǎn) ? 真核生物 mRNA帶有聚腺苷酸尾巴的結(jié)構(gòu)，這是轉(zhuǎn)錄之后加上的。 ? 在模板鏈讀碼框架的 3’端之后，常有一組共同序列 AATAAA， 再下游還有相當(dāng)多的 GT序列，這些序列稱為轉(zhuǎn)錄終止的修飾點(diǎn)。 2022/2/10 分子生物學(xué)原理 轉(zhuǎn)錄與復(fù)制的相似之處 ? 都以 DNA為模板 ? 需要核苷酸作原料，從 5’ 到 3’延長(zhǎng)；生成磷酸二酯鍵以連接核苷酸 ? 都遵從堿基配對(duì)規(guī)律 ? 都需要依賴 DNA的聚合酶 ? 產(chǎn)物都是很長(zhǎng)的多核苷酸 2022/2/10 分子生物學(xué)原理 轉(zhuǎn)錄和復(fù)制的區(qū)別 復(fù)制 轉(zhuǎn)錄模板 兩股鏈均復(fù)制 模板鏈轉(zhuǎn)錄原料 dNTP
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