專題2微生物培養(yǎng)與應(yīng)用(編輯修改稿)
2025-02-04 12:03 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作 ,將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面 . 在數(shù)次劃線后 ,可以分離到由一個細(xì)胞繁殖而來的肉眼可見的子細(xì)胞群體 ,這就是菌落 . 微生物的接種技術(shù) 劃線后，線條末端細(xì)菌的數(shù)目比線條起始處要少，每次 從上一次劃線的末端開始 ，能使細(xì)菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少，最終能得到由單個細(xì)菌繁殖而來的菌落。 單菌落 接種環(huán)？在劃線操作結(jié)束時，仍然需要灼燒接種環(huán)嗎？為什么？ 答： 操作的第一步灼燒接種環(huán)是為了避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物； 每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線結(jié)束后，接種環(huán)上殘留的菌種，使下一次劃線時，接種環(huán)上的菌種直接來源于上次劃線的末端，從而通過劃線次數(shù)的增加，使每次劃線時菌種的數(shù)目逐漸減少，以便得到菌落。 劃線結(jié)束后灼燒接種環(huán)，能及時殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者。 討論 ，為什么要等其冷卻后再進行劃線？ 答：以免接種環(huán)溫度太高，殺死菌種。 ，為什么總是從上一次劃線的末端開始劃線？ 答：劃線后，線條末端細(xì)菌的數(shù)目比線條起始處要少，每次從上一次劃線的末端開始，能使細(xì)菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少，最終能得到由單個細(xì)菌繁殖而來的菌落。 討論 ⑵ 稀釋涂布平板法 （ 稀釋度和稀釋濃度） 稀釋涂布平板法則是將菌液進行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋程度的菌液分別涂布到固體培養(yǎng)基的表面，進行培養(yǎng)，以形成標(biāo)準(zhǔn)菌落。 接種后的培養(yǎng)基和一個未接種的培養(yǎng)基 (空白對照）都放入 37恒溫箱中，培養(yǎng) 12h和 24h后，分別觀察并記錄結(jié)果 （三）微生物數(shù)量測定 測定土壤中的細(xì)菌數(shù)，一般選用 10 10 106倍的稀釋液進行平板培養(yǎng) 。 實驗時， 每一濃度至少涂布 3個平板， 以增強實驗的說服力和準(zhǔn)確性 。 當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的菌落來源于樣品稀釋液中的一個活菌， 通過 統(tǒng)計平板上的菌落數(shù) ，就能推測出樣品大約含有多少個活菌。 （ 2）計數(shù)規(guī)則 ①計算方法：每克樣品中的菌落數(shù) =（ C247。 V） M C代表某一稀釋度下平板上生長的平均菌落數(shù) V代表涂布平板時所用稀釋液的體積（ mL） M代表稀釋倍數(shù) ②設(shè)置對照：排除實驗組中非測試因素對實驗結(jié)果的影響，提高實驗結(jié)果的可信度。 選擇菌落數(shù)在 30～ 300的平板進行計數(shù) 若某兩個或多個稀釋濃度下獲得的菌落數(shù)均符合條件時，要看兩者菌落數(shù)的比值，若小于 2，則取兩者的平均值；若大于 2，則取較小值 ???????，正確的是 D 硝化細(xì)菌氧化氨獲得化學(xué)能 NaNO3提供氮源 CO2不能提供能量 蛋白質(zhì)既是碳源也是氮源。 3. 09（安徽）下列是關(guān)于“檢測土壤中細(xì)菌總數(shù)”實驗操作的敘述，其中錯誤的是 ，經(jīng)高溫、高壓滅菌后倒平板 10 105 、 106倍的土壤稀釋液和無菌水各，分別涂布于各組平板上 C．將實驗組和對照組平板倒置， 370C恒溫培養(yǎng)2448小時 D．確定對照組無菌后，選擇菌落數(shù)在 300以上的實驗組平板進行計數(shù) D 應(yīng)該選擇菌落數(shù)在 30— 300的平板進行計數(shù) （重慶）下列有關(guān)大腸桿菌的敘述，正確的是 ，其擬核是一個環(huán)狀 DNA分子 ，大腸桿菌首先利用乳糖作
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