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Phytochemistry, 2022, 63:753763 第二章 試驗(yàn)材料與方法 1 實(shí)驗(yàn)材料 參試毛豆品種：交大 028交大 0513青酥二號、滬寧 96南農(nóng) 3873北豆 2黑遼 15 和 K0682。交大 028交大 05133 由上海市交通大學(xué)惠贈；青酥二號和滬寧 9610 由上海市農(nóng)業(yè)科學(xué)院惠贈；南農(nóng) 31 由南京農(nóng)業(yè)大學(xué)惠贈； 873黑遼 15 和北豆 21 由東北農(nóng)業(yè)大學(xué)惠贈； K0682 由中國科學(xué)院遺傳與發(fā)育研究所惠贈。 2 試驗(yàn)時間和地點(diǎn) 2022 年 1 月到 2022 年 3 月，試驗(yàn)在上海市中國科學(xué)院上海生命科學(xué)研究院植物生理生態(tài)研究所完成。 3 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)與方法 無菌材料的準(zhǔn)備 挑選 9 個不同品種干凈、健壯飽滿、種皮光滑無破損的菜用大豆成熟種子，在超凈工作臺上用 70％酒精浸泡 1 min，然后用 ％ HgCl2 浸泡 6 ~ 15 min，用無菌水洗 4 ~ 6 次后，再用 0 ~ 8%的 NaClO 浸泡 5 min，用無菌蒸餾水清洗 5 次，最后用無菌水浸泡 15 ~ 18 h，當(dāng)室溫在 20 ℃以上時將其置于 4 ℃冰箱。 基本培養(yǎng)基與培養(yǎng)條件 試驗(yàn)選用的基本培養(yǎng)基主要有 MSB5 和 1/2MSB5（ MS 大量元素減半）， 以上培養(yǎng)基的均添加 200 mgL1 的肌醇和 gL1 瓊脂， pH 值均為 ~ 。除了生根培養(yǎng)基添加 20 gL1 蔗糖 外，其它培養(yǎng)基均添加 30 gL1 蔗糖。以及 YEP 培養(yǎng)基 （ Tryptone， 10g L1； Yeast extract， 10 g L1； NaCl， 5 g L1 ） ，調(diào)節(jié)pH 值為 ，固體 YEP 培養(yǎng)基 添加 gL1 瓊脂即可 。配好的培養(yǎng)基培養(yǎng)基在手提式滅菌鍋 121 ℃， 105 Kpa 條件下滅菌 20 min 后使用。 培養(yǎng)條件溫度為 24 ~ 26 ℃、光強(qiáng) 3 000 lx、每天光照