角蛋白結(jié)構(gòu)功能與角蛋白遺傳病(編輯修改稿)
2025-02-04 07:33 本頁(yè)面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 因組 DNA提取后電泳，可見其大小約為 23kb（ Marker為 λDNA Hind Ⅲ ) 。 39 2. PCR反應(yīng)結(jié)果 ? PCR反應(yīng)產(chǎn)物電泳，擴(kuò)增出大小為 978 bp的 DNA片段（ Marker 為 DGL2022) 。 40 patient normal 41 3 DNA測(cè)序結(jié)果 患者 患者 正常人 正常人 42 討 論 43 體外實(shí)驗(yàn)表明， 1A區(qū)起始部的突變對(duì)角蛋白裝配影響較大，而 1A區(qū)后半部的突變對(duì)角蛋白裝配影響較小。臨床上發(fā)現(xiàn)的角蛋白突變位于 1A區(qū)后半部的較少。 44 角蛋白 17模式圖及我們發(fā)現(xiàn)的突變位置 45 ? 我們發(fā)現(xiàn)的突變?yōu)榻堑鞍?K17的 N109D突變 , 為一新的錯(cuò)義突變。因此，在進(jìn)行中國(guó)人 PC Ⅱ 型基因診斷或產(chǎn)前診斷時(shí)，除了參考國(guó)際上已報(bào)道的突變位點(diǎn)外，應(yīng)注意這一新的突變位點(diǎn)的可能性。 46 ? 我們報(bào)道的這一 PC Ⅱ 家系，厚甲均為遲發(fā)（ 10至 20歲發(fā)生），基因突變位于 K17 1A區(qū)的后半部，為一新的突變 N109D。 47 ? 結(jié)合 Connors等和我們的研究結(jié)果， K16 2B區(qū)中間部和 K17 1A 區(qū)后半部的基因突變可以呈現(xiàn)為遲發(fā)型厚甲。 ? 我們的研究結(jié)果表明角蛋白的突變位置與疾病的發(fā)生年齡有關(guān)。發(fā)生在角蛋白非關(guān)鍵部位的突變引起疾病遲發(fā)。 48 ? 通過 2個(gè)家系初步的研究表明，中國(guó) PC2型患者基因突變與其他種族相比，有相同之處，又有不同之處。本研究為進(jìn)行中國(guó)人 PC2型基因診斷及產(chǎn)前診斷奠定了基礎(chǔ)。 49 單純型大皰性表皮松解癥的 基因突變及臨床研究 Investigation on Gene Mutations and Clinical Phenotypes of Epidermolysis Bullosa Simplex 結(jié)果 1. 臨床資料 ? 家系一 ? 先證者，女， 30歲。自述自幼年起至今，四肢末端，特別是手足部位受摩擦后出現(xiàn)黃豆至核桃大小水皰、大皰；在春夏季節(jié)發(fā)作較頻繁。 ? 家庭情況：先證者的女兒及母親生前有相同癥狀；父親、哥哥正常，未曾出現(xiàn)過類似皮損。 結(jié)果 ? 雙足摩擦部位可見水皰、大皰 結(jié)果 ? 雙足跖可見大皰及灶狀角化過度 結(jié)果 家系譜圖 結(jié)果 散發(fā)病例一 ? 患者，男， 11歲。在出生后 3天，雙足出現(xiàn)蠶豆至鴿卵大小的大皰，自行愈合，未留瘢痕；約在生后 4月時(shí)，手足、四肢陸續(xù)出現(xiàn)水皰、大皰，軀干部位亦出現(xiàn)水皰，但主要集中在四肢遠(yuǎn)端部位。 ? 就診時(shí)在四肢遠(yuǎn)端可見散在的水皰、大皰以及水皰干涸后的結(jié)痂； ? 家庭情況：父母正常，妹妹正常。 結(jié)果 ? 雙手掌、腕部可見水皰、大皰 結(jié)果 2. HE染色結(jié)果 ? 水皰及裂隙看似位于表皮下 結(jié)果 3. PAS染色觀察 ? 陽(yáng)性反應(yīng)的基底膜位于裂隙的底部 ，提示水皰位于表皮內(nèi)。 結(jié)果 ? 皮損附近基底層細(xì)胞可見有空泡，提示水皰裂隙位于表皮內(nèi)。 結(jié)果 4. 透射電鏡觀察 ? D. 真皮， E. 表皮， BM. 基底膜，☆ 水皰裂隙。 結(jié)果 ? 雙足跖可見灶狀角化過度 結(jié)果 散發(fā)病例二 ? 患者，男， 39歲，自述自幼年至約 18歲期間，手足、小腿等部位頻繁出現(xiàn)水皰，自行愈合后不留瘢痕；在春夏季節(jié)發(fā)病較頻繁；成年后，發(fā)作次數(shù)明顯減少。 ? 雙足跖、趾腹承重部位灶性至彌漫性角化過度。 ? 指（趾）甲輕度至中度營(yíng)養(yǎng)不良 。 ? 家庭情況：其一子一女正常，父母生前無類似癥狀 。 結(jié)果 ? 雙足跖、趾腹部可見灶狀至彌漫性角化過度 。 結(jié)果 ? 指（趾）甲營(yíng)養(yǎng)不良 結(jié)果 散發(fā)病例一和散發(fā)病例二系譜關(guān)系見下圖 結(jié)果 K5基因外顯子 45直接測(cè)序圖 ? 患者 DNA序列顯示第 328密碼子的第二個(gè)堿基（ ↓ ）發(fā)生 A→G雜合性突變（雙峰），氨基酸由甘氨酸替代天冬氨酸（ GAC）。 健康者對(duì)照序列 結(jié)果 K14基因外顯子 1直接測(cè)序圖 對(duì)照健康人DNA序列 散發(fā)病例一的 K14基因第 661位出現(xiàn)雙峰，引起第 115個(gè)密碼子由谷氨酸（ GAG）變?yōu)橘嚢彼幔?AAG） 散發(fā)病例二發(fā)生同樣突變 結(jié)果 K14基因外顯子 1單核苷酸多態(tài)性（一） ? 50位健康人 DNA pool直接測(cè)序結(jié)果顯示第 449位堿基為 G（ 圖中 ★ 標(biāo)記 ） ， 密碼子 （ 第 44個(gè) ） 為絲氨酸（ AGC） ； GenBank序列相應(yīng)堿基為 A， 密碼子為天冬酰胺 （ AAC） 。 TGCCGCGCCCCCAACACCTACG 結(jié)果 K14基因外顯子 1單核苷酸多態(tài)性（二） ? 50位健康人 DNA pool直接測(cè)序結(jié)果顯示第 687位堿基為 C（圖中★標(biāo)記），密碼子（第 123個(gè)）編碼天冬酰胺（ AAC）； GenBank序列相應(yīng)堿基為 T，同樣為天冬酰胺（ AAT） CCTCAATGACCGCCTGGCCT 結(jié)果 K5基因內(nèi)含子 6核苷酸多態(tài)性 ? 50位健康人 DNA pool直接測(cè)序結(jié)果顯示第3766
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