醫(yī)學(xué)]15遺傳性疾病的分子診斷(編輯修改稿)
2025-02-04 01:18 本頁(yè)面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 基因 ） 2 非 Gene缺失型（點(diǎn)突變）：無(wú)義突變、移碼突變、終止密碼突變、剪接突變等 結(jié)果 1 生成無(wú)功能或穩(wěn)定性降低的 mRNA 無(wú)義突變 移碼突變 終止密碼突變 起始密碼突變 2 RNA加工突變 3 產(chǎn)生不穩(wěn)定 Hb 分子診斷學(xué) 南方醫(yī)科大學(xué) ? α地中海貧血的分子機(jī)制 分子診斷學(xué) 南方醫(yī)科大學(xué) 分子診斷方法 ? (1) PCR法 PCR 法已經(jīng)成為鑒別缺失型 α 地中海貧血的首選方法。 ? (2) ARMS法 該法能快速鑒別診斷 HbC S和HbQ S ? (3) ASA法 與 ARMS 法相類似 ? (4) SSCP法 非缺失型 α2 地中海貧血突變 ? (5) 等位基因特異性擴(kuò)增技術(shù) (ASPCR）法 分子診斷學(xué) 南方醫(yī)科大學(xué) β地中海貧血 β 珠蛋白 Gene 突變或缺失 → β 珠蛋白鏈合成速 率下 降 → 溶血性貧血 β 0 地貧 ： β 鏈完全不能合成 β + 地貧 ： β 鏈可部分合成 分子診斷學(xué) 南方醫(yī)科大學(xué) β地中海貧血臨床分類 臨 床 類 型 基 因 型 基 因 產(chǎn) 物 臨 床 表 現(xiàn) 重型 ?地貧 ?+/?+、 ?0/?0 ??0/??0、 ?+/?0 ?鏈幾乎不能合成 ?鏈合成相對(duì)增加 Hb F和 Hb A2增高 地中海貧血面容 溶血性貧血（需輸血） 輕型 ?地貧 ?+/?A、 ?0/?A ??0/?A 能合成適量的 ?鏈 貧血不明顯或輕度貧血 中間型 ?地貧 ?+/??+ ?鏈部分合成 介于重型和輕型之間（不需輸血） 遺傳性胎兒血紅蛋白持續(xù)增多癥 缺失或突變 ?鏈和 ?鏈合成受抑制 ?鏈合成明顯增加 成人 Hb F持續(xù)增加，無(wú)癥狀 分子診斷學(xué) 南方醫(yī)科大學(xué) 患兒顱骨及面頰部骨骼增大，頭顱變大，額部隆起，顴高，鼻梁塌陷，兩眼距離增寬，眼瞼浮腫，形成地中海貧血的特殊面容。 分子診斷學(xué) 南方醫(yī)科大學(xué) X線顱骨照片可見顱骨內(nèi)外板變薄，板障增寬，在骨皮質(zhì)間出現(xiàn)垂直短發(fā)樣骨刺 分子診斷學(xué) 南方醫(yī)科大學(xué) ?地中海貧血的分子基礎(chǔ) ? ?地中海貧血已發(fā)現(xiàn) 100多種突變類型，包括點(diǎn)突變和 基因缺失。 ? 絕大多數(shù) ?地中海貧血是由于 ?基因發(fā)生點(diǎn)突變所致，突 變涉及基因內(nèi)及側(cè)翼序列。 （ 1）編碼區(qū)突變 （ 2）非編碼區(qū)突變 （ 3）啟動(dòng)子區(qū)突變 （ 4） RNA裂解信號(hào)突變 （ 5）加帽位點(diǎn)單個(gè)堿基突變 分子診斷學(xué) 南方醫(yī)科大學(xué) ☆ 編碼區(qū)突變 —— mRNA穩(wěn)定性降低或形成無(wú)功能 mRNA （ 1）無(wú)義突變 密碼子 17： A→C 密碼子 43： G→T β0 地貧 （ 2）移碼突變 密碼子 71/72： +A 密碼子 41/42：－ TCTT β0 地貧 （ 3）起始密碼突變 ATG→AGG β0 地貧 分子診斷學(xué) 南方醫(yī)科大學(xué) ⑴ 內(nèi)含子 I GT→ AT喪失一個(gè)剪切信號(hào)。 ⑵ 新的切點(diǎn)產(chǎn)生 同義突變 → 激活 → I和 Exon隱蔽裂解位點(diǎn) 如： GGT→ AGT 產(chǎn)生新的剪切點(diǎn) ☆ 非編碼區(qū)突變 —— 影響 mRNA剪切、加工過程 分子診斷學(xué) 南方醫(yī)科大學(xué) GT→ AT GGT→AGT ，激活隱蔽剪切位點(diǎn) 分子診斷學(xué) 南方醫(yī)科大學(xué) ☆ 啟動(dòng)子區(qū)突變 —— 降低 mRNA的轉(zhuǎn)錄效率 28位 A→G 突變破壞了 TATA Box。 分子診斷學(xué) 南方醫(yī)科大學(xué) ☆ RNA裂解信號(hào)突變 —— 不能準(zhǔn)確裂解和加 polyA β珠蛋白基因 3’側(cè)翼序列中AATAAA→AA CAAA ☆ 加帽位點(diǎn)單個(gè)堿基突變 —— 不能準(zhǔn)確裂解和加 polyA 加帽位點(diǎn)發(fā)生 A→ C顛換，影響轉(zhuǎn)錄效率。通常是 mRNA的第一個(gè)核苷酸。 分子診斷學(xué) 南方醫(yī)科大學(xué) 分子診斷方法 ? PCR反向點(diǎn)雜交 (PCRRDB)法 ? PCR— RFLP法 ? 基因芯片法等 N
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