【文章內(nèi)容簡介】 RNA是關(guān)鍵的一步。 食品 微 生 物 學(xué) 第四章 第二節(jié) 病毒的復(fù)制 mRNA的合成取決于病毒核酸的類型，如 DNA或 RNA單鏈和雙鏈等類型。 動物病毒有六條合成 mRNA的途徑。 DNA病毒和 RNA病毒的復(fù)制和 食品 微 生 物 學(xué) 第四章 第二節(jié) 病毒的復(fù)制 裝配過程： DNA病毒：這類病毒本身含有形成病毒 DNA所需要的轉(zhuǎn)錄酶，隨著脫殼的進(jìn)行，轉(zhuǎn)錄酶活化，在寄主細(xì)胞中產(chǎn)生早期 mRNA，然后通過寄主的核糖體翻譯而形成復(fù)制病毒 DNA 食品 微 生 物 學(xué) 第四章 第二節(jié) 病毒的復(fù)制 的酶。病毒其他部分的形成和病毒粒子的裝配也發(fā)生在細(xì)胞質(zhì)內(nèi)，也有的病毒在細(xì)胞核內(nèi)復(fù)制，并利用寄主細(xì)胞的 DNA聚合酶來復(fù)制病毒的核酸。病毒的結(jié)構(gòu)蛋白合成于細(xì)胞質(zhì)，然后運(yùn)回細(xì)胞核來構(gòu)建病毒 食品 微 生 物 學(xué) 第四章 第二節(jié) 病毒的復(fù)制 的核殼。 RNA病毒：在一般的生物細(xì)胞中，信息流的模式為： DNARNA蛋白質(zhì)。而 RNA病毒的遺傳信息編碼于RNA中。 RNA病毒的復(fù)制方式有三種 ㈣釋放 食品 微 生 物 學(xué) 第四章 第二節(jié) 病毒的復(fù)制 具有包膜的病毒從寄主中釋放是一個復(fù)雜的過程，所以其釋放過程通常比較緩慢，甚至要連續(xù)幾小時。最常見的釋放方式是出芽方式。當(dāng)其核殼成熟和裝配后，會排列在細(xì)胞膜的內(nèi)部表面，而核殼與膜的 食品 微 生 物 學(xué) 第四章 第二節(jié) 病毒的復(fù)制 接觸會使膜向外突出，最后在外膜表面形成 “ 芽 ” 式突起，最后這個芽收縮，封閉形成囊，完全包圍了核殼，然后 “ 芽 ” 由特殊的釋放酶切斷而形成具包膜的病毒。 動物病毒的另一種釋放方式 食品 微 生 物 學(xué) 第四章 第二節(jié) 病毒的復(fù)制 是通過細(xì)胞膜溶解或局部裂解而釋放。通常發(fā)生于寄主細(xì)胞死亡之后。特點(diǎn)是突然大量釋放游離的病毒體。 食品 微 生 物 學(xué) 第四章 第三節(jié) 病毒的培養(yǎng) 培養(yǎng)病毒技術(shù)的主要目的是對病毒分離和鑒定；制備病毒作為疫苗用；進(jìn)一步研究病毒的結(jié)構(gòu)、繁殖、遺傳和對寄主細(xì)胞的影響。 一 .利用活體動物接種 食品 微 生 物 學(xué) 第四章 第三節(jié) 病毒的培養(yǎng) 利用特殊飼養(yǎng)的小白鼠、大白鼠、田鼠、豚鼠和兔子用于病毒的動物培養(yǎng)，無脊椎動物 (如昆蟲 )和猴子等也用于實(shí)驗(yàn)動物。由于病毒對動物具有一定的特異性，特定動物才能傳播一定種類的 食品 微 生 物 學(xué) 第四章 第三節(jié) 病毒的培養(yǎng) 病毒。依實(shí)驗(yàn)要求，使用不同年齡的動物，通常將樣品或病毒注射進(jìn)入到腦、血液、肌肉、體腔、皮膚或腳掌內(nèi)。 二 .用雞 (禽 )胚接種 食品 微 生 物 學(xué) 第四章 第三節(jié) 病毒的培養(yǎng) 胚胎是細(xì)胞早期快速分化的發(fā)展階段，鳥或禽的胚胎是自我封閉發(fā)育而成，不受環(huán)境的影響。具有豐富的營養(yǎng)，可支持病毒的生長。雞、鴨和火雞胚胎是最常用的接種實(shí)體。由于對卵的注射必須 食品 微 生 物 學(xué) 第四章 第三節(jié) 病毒的培養(yǎng) 刺破卵殼。因此，對無菌的要求極嚴(yán)格。注射方式有絨毛膜接種、尿囊腔接種、卵黃囊接種和羊膜腔接種。 病毒在胚胎中發(fā)育可引起肉眼可見變化或變化不明顯，其 食品 微 生 物 學(xué) 第四章 第三節(jié) 病毒的培養(yǎng) 生長表現(xiàn)包括胚胎死亡、胚胎發(fā)展缺陷、膜局部的缺損。如果病變不明顯，必須用其他方法檢測。用胚液和組織直接于電子顯微鏡下檢查。有些病毒具有凝集紅細(xì)胞或者和抗體發(fā)生反應(yīng)的能力，也可測知 食品 微 生 物 學(xué) 第四章 第三節(jié) 病毒的培養(yǎng) 病毒的存在。 三 .細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù) 將動物細(xì)胞分離、體外培養(yǎng)的方式稱作細(xì)胞培養(yǎng)。培養(yǎng)動物細(xì)胞的營養(yǎng)液需含有特殊營養(yǎng)物質(zhì)和精確的配比，以利于細(xì)胞的生長。 食品 微 生 物 學(xué) 第四章 第三節(jié) 病毒的培養(yǎng) 最大特點(diǎn)是這些細(xì)胞系對病毒來說具有較狹窄的寄主范圍。對感染人的病毒有胚腎細(xì)胞、纖維細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、心臟細(xì)胞等細(xì)胞系進(jìn)行培養(yǎng)。 對培養(yǎng)基中病毒生長的檢測的 食品 微 生 物 學(xué) 第四章 第三節(jié) 病毒的培養(yǎng) 一種方式是觀察細(xì)胞單層中感染細(xì)胞變性和溶解。被破壞的病毒感染區(qū)呈現(xiàn)清晰的限定性斑，叫病毒蝕斑，又稱空斑 (plaque)。同樣技術(shù)也可用于噬菌體檢測和計(jì)數(shù)。 食品 微 生 物 學(xué) 第四章 第四節(jié) 細(xì)菌病毒和發(fā)酵工業(yè) 一 .發(fā)酵工業(yè)中噬菌體的一些性質(zhì) 在發(fā)酵工業(yè)中常應(yīng)用細(xì)菌、真菌等菌種作為發(fā)酵菌種。這些菌種常受到細(xì)菌噬菌體、真菌病毒的損害，是發(fā)酵工業(yè)的一大公害。酵母菌如釀酒酵母、紅酵 食品 微 生 物 學(xué) 第四章 第四節(jié) 細(xì)菌病毒和發(fā)酵工業(yè) 母中都有類似噬菌體的病毒，其他真菌也有類似病毒的存在。 這里需要補(bǔ)充說明的有關(guān)溫和噬菌體的一些情況。噬菌體感染菌體細(xì)胞后，并不馬上引起細(xì)胞裂解，而是以原噬菌體 (prophage) 食品 微 生 物 學(xué) 第四章 第四節(jié) 細(xì)菌病毒和發(fā)酵工業(yè) 方式整合于寄主 DNA中，隨寄主繁殖而延續(xù)傳代的噬菌體稱為溫和性噬菌體 (Temperate phage)或溶原性噬菌體 (Lysogenic phage)。帶有溶原性噬菌體的細(xì)菌稱為 “ 溶原性細(xì)菌 ” 。 食品 微 生 物 學(xué) 第四章 第四節(jié) 細(xì)菌病毒和發(fā)酵工業(yè) 在溶原性細(xì)菌內(nèi)，無形態(tài)可見的病毒粒子，原噬菌體是附著于細(xì)菌遺傳物質(zhì)上的噬菌體組成成分。少數(shù)情況下，溫和噬菌體也會引起寄主細(xì)胞裂解。溶原性是細(xì)菌的遺傳特性，即每個溶原性子細(xì)胞一般 食品 微 生 物 學(xué) 第四章 第四節(jié) 細(xì)菌病毒和發(fā)酵工業(yè) 也是溶原性的。微生物細(xì)胞的溶原性廣泛存在于細(xì)菌中。如芽孢桿菌、大腸桿菌、假單胞菌、棒狀桿菌、沙門氏菌、葡萄球菌、弧菌、鏈球菌、變形桿菌、乳桿菌等。這種原噬菌體不同于營養(yǎng)期的噬菌 食品 微 生 物 學(xué) 第四章 第四節(jié) 細(xì)菌病毒和發(fā)酵工業(yè) 體，它無感染性，對寄主一般無不良影響，但它也賦予溶原性細(xì)菌以下特征： ①有產(chǎn)生噬菌體的潛在能力。 溶原性細(xì)菌培養(yǎng)時，大多數(shù)原噬菌體 食品 微 生 物 學(xué) 第四章 第四節(jié) 細(xì)菌病毒和發(fā)酵工業(yè) 不進(jìn)行營養(yǎng)繁殖，僅少數(shù)會自發(fā)脫離染色體，導(dǎo)致細(xì)菌裂解，但裂解的頻率較低，不易被發(fā)現(xiàn)；而在某些物理化學(xué)因素 (紫外線、 X射線 )刺激下，原噬菌體會脫離染色體，開始復(fù)制，導(dǎo)致溶原性細(xì)菌裂解， 食品 微 生 物 學(xué) 第四章 第四節(jié) 細(xì)菌病毒和發(fā)酵工業(yè) 產(chǎn)生大量噬菌體。 ②具有抗同源噬菌體感染的 “ 免疫性 ” 。 即溶原性細(xì)菌對本身產(chǎn)生的噬菌體或外來的同源噬菌體不敏感。這些噬菌體雖然可以進(jìn)人溶原性細(xì)菌， 食品 微 生 物 學(xué)