熒光定量pcr在臨床醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用(編輯修改稿)
2025-02-02 08:24 本頁(yè)面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 義 HBV DNA檢測(cè)的臨床意義 調(diào)查表明并不是所有“大三陽(yáng)”的病人都處于 HBV復(fù)制期，具有傳染性；也不是所有“小三陽(yáng)”的病人 HBV都無(wú)復(fù)制。因此，要準(zhǔn)確知道 HBV是否處于復(fù)制狀態(tài)，最準(zhǔn)確的方法還是通過(guò)檢測(cè) HBV DNA來(lái)決定。 HBV DNA檢測(cè)方法 ? 斑點(diǎn)雜交（基本淘汰） ? 定性 PCR（基本淘汰） ? 熒光定量 PCR（主流） ? 基因芯片（將來(lái)？） 為什么建議病人要進(jìn)行 HBV DNA檢測(cè)？ 熒光定量 PCR方法檢測(cè) HBV感染的各期 血清標(biāo)本 Copies/ml HBeAg陽(yáng)性慢性乙型肝炎病人 x 108 經(jīng) α 干擾素治療后 HBeAg轉(zhuǎn)陰 x 103 非活動(dòng)性 HBsAg攜帶者血清 x 103 原先血中 HBV DNA陽(yáng)性，已痊愈超過(guò) 12個(gè)月的血清 103 HBsAg和 HBeAg均陽(yáng)性而 HBV DNA陰性？ ? 干擾素或拉米夫定等治療后病毒復(fù)制受抑制。 ? PCR所用引物相應(yīng)的 DNA序列發(fā)生突變，此引物與突變 DNA不能配對(duì)結(jié)合。 ? 病毒 DNA整合于宿主肝細(xì)胞染色體而血中游離 HBV DNA很少或缺乏。 乙肝的治療 ? 目前尚無(wú)一種能迅速、直接殺死清除乙肝病毒的藥物，最好的抗病毒藥物療效也僅能達(dá)到 50％左右。 ? 目前國(guó)際醫(yī)學(xué)界公認(rèn)的治療慢性乙肝有確切療效的抗病毒藥物主要有兩大類： ?干擾素：重組人 α 1b干擾素、 α 2a、 α 2b干擾素等。 核苷類似物：拉米夫定、阿德福韋。 乙肝的治療 主要包括 抗病毒 、免疫調(diào)節(jié)、抗炎保肝、抗纖維化等 對(duì)于 HBV DNA≥105的患者應(yīng)進(jìn)行抗病毒治療 拉米夫定 ? 可迅速降低 HBV DNA的濃度，改善肝臟組織的病變，還可能阻斷肝纖維化的進(jìn)程，終止肝硬化的發(fā)展。 ? 尤其是拉米夫定不受病毒感染的模式、野生型或基因組前 C區(qū)突變的影響。 ? 此外拉米夫定還能抑制肝移植受體和 AIDS病人體內(nèi)的 HBV復(fù)制。 拉米夫定治療人群 ? 有明顯 HBV DNA復(fù)制者 ? 前 C區(qū)變異的慢性乙型肝炎 ? 代償期的慢性乙型肝炎 ? 接受肝臟移植的患者 ? 干擾素治療失敗 拉米夫定治療效果 ? 絕大多數(shù)患者 HBV DNA水平顯著下降。 ? 用藥 4周開始下降， 12至 16周約半數(shù)以上的病例血清 HBV DNA降到可檢測(cè)水平以下。 ? 治療 1年后 HBeAg陰轉(zhuǎn)率約為 20%。 ? 病毒學(xué)應(yīng)答： HBV DNA低于檢測(cè)下限 ? 血清學(xué)應(yīng)答 ? 生化學(xué)應(yīng)答 ? 組織學(xué)應(yīng)答 應(yīng)用抗病毒藥物后如何判斷療效？ 應(yīng)用抗病毒藥物后如何判斷療效？ ?治療結(jié)束時(shí) 完全應(yīng)答 ?隨訪 1年 持續(xù)應(yīng)答 ?無(wú)應(yīng)答 YMDD變異 ? YMDD：酪氨酸－蛋氨酸－天門冬氨酸－天 門冬氨酸 ? 蛋氨酸（ M）突變?yōu)楫惲涟保?I）或纈氨酸（ V）形成 YIDD變異株或 YVDD變異株 。 抗病毒治療中存在的問(wèn)題 HBVY
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