igg抗體的提取及鑒定總結(jié)(編輯修改稿)
2024-12-22 19:55 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 （記錄上樣總體積，保留部分血清） 洗脫 流速 3040ml/cm2/h 收集 5ml/管 （ 20%三氯醋酸滴定、分光光度法檢測） DEAE纖維素再生 2M NaCl 洗脫其他血清蛋白 拆柱、 浸泡 PB液 洗脫液抗原性鑒定 雙向瓊脂擴(kuò)散實(shí)驗(yàn)原理： 可溶性 Ag和 Ab分別在瓊脂凝膠內(nèi)擴(kuò)散。相應(yīng)的 Ag和 Ab相遇后，在比例合適時(shí)可形成白色沉淀線。 洗脫液抗原性鑒定（雙擴(kuò)散法） 實(shí)驗(yàn)步驟 抗體 抗原 IgG回收率的測定 分光光度法 蛋白質(zhì)分子中含有共軛雙鍵的 酪氨酸 、 色氨酸 等芳香族氨基酸。它們具有吸收紫外光的性質(zhì)，其吸收高峰在 280nm波長處，且在此波長內(nèi)吸收峰的 光密度值 與其 濃度 成正比關(guān)系 ，故可作為蛋白質(zhì)定量測定的依據(jù)。 實(shí)驗(yàn)步驟 合并含 IgG的洗脫液，通過蔗糖包埋法進(jìn)行濃縮。 通過分光光度法對濃縮后的 IgG進(jìn)行回收率的測定。 回收率 = = 提取 IgG（ mg） 12（ mg/ml） 上樣血清體積
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