課題1dna的粗提取及鑒定(編輯修改稿)
2025-07-04 22:08 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 使之溶解→各加4mL二苯胺，混合均勻→沸水浴5min→觀察顏色變化3．實驗操作制備雞血細胞液…………加檸檬酸鈉，靜置或離心↓破碎細胞，釋放DNA… 加蒸餾水，同一方向快速通方向攪拌↓→過濾，除去細胞壁、細胞膜等。溶解核內(nèi)DNA………… 加入NaCl至2mol/L，同一方向緩慢攪拌↓DNA析出……………… ，過濾，在溶解到2mol/L溶液中↓→除去細胞質(zhì)中的大部分物質(zhì)。DNA初步純化………… 與等體積95％冷卻酒精混合，析出白色絲狀物↓→除去核蛋白、RNA、多糖等。DNA鑒定……………… 二苯胺，沸水浴，呈現(xiàn)藍色其它注意事項：在雞血中加入檸檬酸鈉防止凝固；雞血靜置或離心以提高細胞懸液濃度；使用塑料燒杯；使用尼龍布過濾；玻棒沿同一方向攪拌；玻棒攪拌要緩慢（細胞破裂快速攪拌）；玻棒不要碰到燒杯壁；二苯胺試劑要現(xiàn)用現(xiàn)配等。為了提高DNA純度，在科學實驗中通常使用的洗滌劑有十六烷基三甲基溴化銨（CTAB）、十二烷基硫酸鈉（SDS）。（三）課堂總結(jié)、點評DNA的粗提取與鑒定實驗原理DNA在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同DNA與其他細胞成分在酒精中溶解度不同DNA和蛋白質(zhì)對酶、高溫和洗滌劑耐受性不同DNA與二苯胺呈現(xiàn)藍色反應(yīng)DNA粗提取選擇適宜材料破碎細胞DNA的溶解和析出DNA的純化鑒定DNA與二苯胺混合，沸水浴，呈現(xiàn)藍色反應(yīng)（四）實例探究例1 在DNA分子的粗提取實驗中，兩次向燒杯中加入蒸餾水的作用是（ ）A. 稀釋血液、沖洗樣品B. 使血細胞破裂，降低NaCl濃度使DNA析出C. 使血細胞破裂，增大DNA溶解度D. 使血細胞破裂，提取含雜質(zhì)較少的DNA解析：在該實驗過程中，第一次加入蒸餾水的目的是使血細胞過度吸水而破裂，以便核物質(zhì)溶解。，因為此時的DNA溶解度最小，可使DNA析出。例2 在制備雞血細胞液的過程中，加入檸檬酸鈉的目的是（ ）A. 防止凝血 B. 加快DNA析出 C. 加快DNA溶解 D. 加速凝血解析：檸檬酸鈉的作用是利用檸檬酸根離子與血漿中Ca2+離子結(jié)合成檸檬酸鈉，降低Ca2+離子濃度，使有關(guān)凝血酶活性降低。因此檸檬酸鈉是抗凝血物質(zhì)，防止凝血，有利于雞血細胞液的制備。答案：A☆綜合應(yīng)用例3 DNA在NaCl溶液中溶解度有二重性，隨著NaCl溶液的變化而變化。（1）請在下列NaCl溶液中
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