【文章內(nèi)容簡介】 在薄層板上獲取一個或多個斑點，根據(jù)在薄層上的位置、斑點的顏色來對對樣品進行定性分析，不僅對斑點能進行半定量分析，而且還能對斑點進行定量分析。 薄層色譜檢測方法及應(yīng)用 薄層色譜檢測法 [12]： （ 1） 薄層色譜 傅立葉變換紅外光譜聯(lián)用檢測法：該法利用化合 物的紅外光譜特性對結(jié)構(gòu)復(fù)雜物質(zhì)可提供豐富信息，還能應(yīng)用其進行定量測定。 （ 2）薄層色譜 拉曼光譜聯(lián)用檢測法：該法利用分子振動、分子偶極矩增大、紅外吸收強度也隨之增大，拉曼散射隨之增強的原理進行檢測。 （ 3）薄層色譜 核磁共振聯(lián)用法：用刮刀將展開后的薄層板上樣品刮下，然后用適當?shù)娜軇┫疵摌悠泛?，采用核磁共振進行檢測。與紅外光譜、質(zhì)譜相比較，有較低靈敏性，然而此法能提供有效結(jié)構(gòu)信息，這是無法其他方法相比之處。這樣的分析方法需要較大的樣量。 （ 4）薄層色譜 電化學方法聯(lián)用法：此法將分離出的樣品斑點刮 下后加入到電化學反應(yīng)的溶液中而得到電化學檢測與分析結(jié)果。 （ 5）薄層色譜 質(zhì)譜聯(lián)用法：與其他聯(lián)用技術(shù)不同 , 質(zhì)譜是有效定性的現(xiàn)代分析手段。因為其有較高的靈敏性、良好的選擇性、又可提供大量的組合和結(jié)構(gòu)信息、根據(jù)薄層色譜與質(zhì)譜的聯(lián)用，達成了互惠互利，更根據(jù)樣品復(fù)雜性來定性。 薄層色譜方法主要應(yīng)用 [13]有生物樣品、環(huán)境有害物質(zhì)分析，以及無機、有機化合物分析等。 課題的目的和意義 課題的目的 由文獻報道可知，四苯基卟啉 [14]及其金屬絡(luò)合物的合成反應(yīng)中，對目標化合物進行相應(yīng)的表征、鑒定時，需要的 分析儀器不僅成本較高，而且價格不菲，同時在卟啉類化合物合成過程中不利于跟蹤、監(jiān)測分析。薄層色譜在中草藥品種區(qū)分和組分分析、藥物合成的定性鑒別、研究質(zhì)量執(zhí)行標準與中草藥含量定性、純度測定、藥物代謝及其工藝監(jiān)控分析的合成等方面有著豐富的應(yīng)用。不沈陽工業(yè)大學工程學院本科生畢業(yè)論文 4 久的將來，薄層色譜法將是便于選擇的、經(jīng)濟、安全、快速的分析方法，并且會有更加廣泛的應(yīng)用范圍。 為了滿足 TPPCo[15]合成研究的需要，研究薄層色譜法測定 TPPCo的分析條件，確定了薄層色譜分離測定 TPPCo純度的條件和方法，可為 TPPCo合成研究提供方便實用的檢測手段。 課題的意義 參考國內(nèi)外文獻，薄層色譜法 [16]特別適用于微量成分的檢出與定量。根據(jù)儀器分析發(fā)展的方法，鋪板技術(shù)和點樣技術(shù)的自動化，薄層色譜與分光光度計，熒光、紫外、紅外等光譜儀的相互協(xié)作，在各種物質(zhì)的分離鑒定、含量測定中薄層色譜都起到了至關(guān)重要的作用。這對研制和開發(fā)高新材料、分析痕量金屬均具有重要的指導意義。 本課題對薄層色譜法測定 TPPCo 純度的分析條件進行研究，薄層色譜法為TPPCo 及其金屬配合物 [17]的物理結(jié)構(gòu)、化學特性、溶解性、光譜特征、分離、提純等多種方面的系統(tǒng)研究開發(fā)提供快 捷、高效的檢測手段，對卟啉及金屬卟啉化合物的連續(xù)的合成、鑒定、性質(zhì)研究方面有著出色表現(xiàn)，呈現(xiàn)了薄層色譜法和 TPPCo 在實際應(yīng)用中的巨大作用。 沈陽工業(yè)大學工程學院本科生畢業(yè)論文 5 第 2 章 實驗部分 實驗所需藥品、試劑 實驗所用主要試劑、藥品見表 21。 表 21 實驗藥品和試劑 名稱 分子式 分子量 規(guī)格 生產(chǎn)單位 環(huán)己烷 C6H12 分析純 沈陽市華東試劑廠 甲苯 C6H5CH3 分析純 沈陽市新化試劑廠 TPPCo C44H28N4Co 95% 實驗室自制 TPP C44H28N4 97% 實驗室自制 苯 C6H6 分析純 沈陽市華東試劑廠 乙酸乙酯 CH3COOC2H5 分析純 天津市永大化學試劑 有限公司 甲醇 CH3OH 分析純 沈陽市新化試劑廠 羧甲基纖維素鈉 (C8H11NaO7)n 食品添加 劑 沈陽市試劑一廠 薄層層析硅膠 化學純 青島海洋化工有限公 司 丙酮 CH3COCH3 化學純 天津市富宇精細化工 有限公司 二氯甲烷 CH12Cl2 分析純 沈陽市華東試劑廠 沈陽工業(yè)大學工程學院本科生畢業(yè)論文 6 主要儀器、設(shè)備 實驗用的主要儀器和設(shè)備見表 22。 表 22 實驗儀器和設(shè)備 名稱 型號 生產(chǎn)廠家 干燥箱 1013 上海實驗儀器總廠 薄層色譜掃描儀 KH3000 上?？破丈邢薰? 調(diào)溫電熱套 DRTTW 鄭州長城公司 微量進樣器 10μL 浙江實驗設(shè)備廠 玻璃毛細管 華西醫(yī)科大學儀器廠 全自動薄層鋪板機 TDII 上?？普苌萍加邢薰? 托盤天平 500g 北京儀器儀表廠 分析天平 BT323S （ ） 北京中儀 友信科技有限公司 玻璃板 20cm10cm 移液管 1ml/2ml 量筒 50ml/100ml 玻璃棒 20cm 燒杯 50ml/500ml 容量瓶 50ml/10ml 展開槽 雙層 200100 實驗原理 主要原理是依據(jù)被分離物的極性不同，在一定吸附活性的吸附劑和展開劑沈陽工業(yè)大學工程學院本科生畢業(yè)論文 7 極性之間進行競爭吸附而達到分離的目的。由于在溶劑中各個組分的溶解度、吸附劑對其有不同的吸附本領(lǐng)，最終將混合物分離形成一系列的斑點。標準化合物在薄層板上展開，再通過這些已知化合物的 Rf值，鑒定各個 斑點的組分，進一步采用薄層色譜掃描法定量。 實驗操作程序 薄層色譜分離 TPPCo 的操作程序 圖 21薄層色譜分離操作流程 圖 22薄層色譜掃描操作流程 沈陽工業(yè)大學工程學院本科生畢業(yè)論文 8 實驗裝置圖 （ 1）展開裝置圖 圖 23展開槽及展開過程 （ 2） 制板裝置圖 圖 24TDⅡ 全自動鋪板機 實驗步驟 沈陽工業(yè)大學工程學院本科生畢業(yè)論文 9 100ml沸騰的去離子水中，攪拌使之完全溶解。等冷卻到室溫裝入試劑瓶準備使用。 [18]溶液的配制 用分析天平取 40ml二氯甲烷溶液中，再轉(zhuǎn)移到 50ml容量瓶中定容，搖勻。配得的 濃度是 ， 放在避光處準備使用。 TPP母核 [19]溶液的配制：用分析天平取 40ml二氯甲烷溶液中，再 轉(zhuǎn)移到 50ml容量瓶中定容，搖勻。配得的 濃度是 ，放在避光處準備使用。 薄層板的制備 硅膠吸附劑是最常用的，使用 5g硅膠 G 和 15~18m質(zhì)量分數(shù)為 %的羧甲基纖維素鈉溶液， 轉(zhuǎn)移到一個統(tǒng)一的糊，備用。 使用時只需將 5g 硅膠 G 加 15~18ml 質(zhì)量分數(shù)為 %的羧甲基纖維素鈉溶液，調(diào)成均勻的糊狀，備用。 一般選用大小為 10cm20cm，表面光滑平整的玻璃板。 制備薄層的厚度要求約 ~。 薄層板制好后水平自然干燥后使用。 薄層板的活化 在適當溫度下把薄層板烘干 ~1 小時，使吸附劑具有一定含水量，出現(xiàn)一定吸附活性，具有適當吸附活度的操作過程。 開始時 用 玻璃毛細管點樣，定量時需要 微量進樣器來點樣。樣點的直徑大概在 3mm左右，底線到基線的距離為 10mm，樣點間距大概在 20mm左右，樣點到玻璃邊緣距離至少 10mm，再進行點樣。 展開劑選取兩種以上互溶的有機溶劑，在薄層板點樣之后，待溶劑揮發(fā)完全，再放入展開槽中展開，展開溶劑一定不能超過樣點。展開過程應(yīng)該在密閉的展開槽中進行，展開時間大概是在 15分鐘左右。每次展開后，不能反復(fù)使用，需要更 換。展開溶劑揮發(fā)完全后，進行檢視， 得到斑點清晰、無拖尾。 沈陽工業(yè)大學工程學院本科生畢業(yè)論文 10 定性 以金屬母核 TPP 為對照品，金屬卟啉鈷 TPPCo 為試樣同時在同一厚度的薄層板上進行點樣展開。觀察展開效果，計算比移值，考察金屬卟啉鈷 TPPCo 的分離效果。 定量分析 因為 TPPCo 本身帶有顏色，可以直接使用薄層色譜掃描儀對其進行定量分析 ,待薄層板上的有機物全部會揮發(fā)后，在 KH3000 型薄層色譜掃描儀上進行光譜掃描掃描、樣品掃描，測量斑點的掃描波長、吸光度，根據(jù)其與金屬鈷卟啉樣品溶液濃度的關(guān)系進行定量分析。 沈陽工業(yè)大學工程學院本科生畢業(yè)論文 11 第 3 章 實驗結(jié) 果與討論 展開劑的初選 展開劑的選擇條件： ① 對所需成分有良好的溶解性 ② 可使成分間分開 ③ 待測組分 Rf 值在 之間，定量測定在 之間 ④ 不與待測組分或吸附劑發(fā)生化學反應(yīng) ⑤ 沸點適中，粘度較小 ⑥ 展開后組分斑點圓且集中 ⑦ 混合溶劑最好用新鮮配制的。 加入少量拖尾抑制劑到展開劑中，如乙酸、乙二酸、甲酸等，類似這些溶劑可以抑制一些堿性物質(zhì)產(chǎn)生斑尾現(xiàn)象。為了得到分離效果較好的展開劑，需要不停的變換展開劑的組成和比例，直到找到分離