【文章內容簡介】 而 40176。C 酶活損失一半多， 50176。C 基本喪失 。處理 24h 時， 20176。C 漆酶耐受性最好， 同時發(fā)現(xiàn) 處理 1h 和處理 24h 的漆酶第 10 頁 共 14 頁 酶活相差 很小 。 因此可知該酶熱穩(wěn)定性較差，溫度低于 40176。C 還較穩(wěn)定，高于 50176。C 就基本失活。 金屬離子及抑制劑對漆酶活性的影響 表 31 激活劑和抑制劑 對漆酶活力影響 抑制劑種類 不同濃度抑制劑（ mmol/L）作用下的相對活力（ %） 1 10 EDTA DDT NaN3 圖 3— 5 金屬離子對酶活影響 如圖 3— 5 所示 ， 10mM/L 的 ba2+、 ca2+、 co+、 fe3+、 na+、 k+這六個金屬離子對漆酶酶活的抑制作用都很強，其中 fe3+對漆酶酶活的抑制作用最強， Cu2+、 zn2+、 mn2+、 mg2+對漆酶酶活的抑制作用一般。 1mM/L 時， fe3+的抑制作用最弱。 激活劑和抑制劑對酶活影響 如表 3— 1所示 ， 10mM/L DDT、 EDTA、 NaN3均對漆酶的酶活性有著抑制作用，其中 NaN3的抑制作用最強。 1mM/LEDTA對酶活有激活作用。 第 11 頁 共 14 頁 圖 3— 6 漆酶 圖 3— 7 米 — 曼氏方程雙倒數(shù)圖 由圖 3— 6得出，當 ABTS的濃度為 ，漆酶的吸 光度數(shù)值為最高。 此時酶活為 。 根據圖 3— 7 雙倒數(shù)圖公式，計算得 Km=。 第 12 頁 共 14 頁 第 4 章 討論 白腐真菌木蹄層孔菌漆酶酶活的溫度和 pH 耐受實驗表明，木蹄層孔菌產漆酶的最佳培養(yǎng)溫度為 20176。 C，溫度過高則會引起漆酶減產，超過 50176。 C 漆酶酶活喪失。漆酶在溫度為 50176。 C的時候酶活最高，但時間久了酶活會逐漸喪失。故測定漆酶酶活最佳溫度為 50176。 C。隨著溫度的升高，漆酶的酶活下降很快，所以持續(xù)的高溫會嚴重影響漆酶的酶活性。 對漆酶 pH的耐受和最適反應實驗表明，當反應體系的 pH 為 3的 時候，漆酶的酶活最高。當培養(yǎng)體系的 pH 為 的時候，漆酶的酶活最穩(wěn)定。隨著 pH 的波動，酶活的衰減并不嚴重，所以 pH對漆酶酶活的影響系數(shù)不大。 10 種不同的金屬離子對兩種漆酶的活性影響表明 ： 10mM/L 的 ba2+、 ca2+、 co+、 fe3+、 na+、 k+這六個金屬離子對漆酶酶活的抑制作用都很強， Cu2+、 zn2+、 mn2+、 mg2+對漆酶酶活的抑制作用一般，其中 fe3+對漆酶酶活的抑制作用最強， 這可能是因為它占據了底物與酶的結合位點 (酶的活性中心 )，改變了酶的構象 ， 從而使酶活性受到了明顯的抑制 .由于這 6 種離 子對漆酶的活性中心均有毒害作用 ，在應用漆酶時應避免在溶液中加入這 6 種離子 。 1mM/L 時， fe3+的抑制作用最弱。 ， 而 Mg2+， Cu2+對兩種漆酶均有激活作用 ， 這與 Mg2+是很多氧化還原酶的催化激活劑的特性比較一致 ， 而漆酶也是一種氧化還原酶 。Cu2+對漆酶有激活作用與 Cu2+是漆酶的一個活性中心 ， 也是漆酶分子的一個重要組成成分的特點一致。 第 13 頁 共 14 頁 致 謝 本文是在導師尚潔講師悉心指導下完成的。 尚潔老師平易近人，指導認真負責，經常在實驗室親自指導我的實驗，解答各種疑問 。 實驗雖然簡單，但其中數(shù)據的獲 取耗費了大量的時間，總共跨度達到三個月，在此期間尚潔老師一直給我們指導，幫我們答疑解惑，才使得我們的實驗能順利完成。畢業(yè)論文定稿前尚潔老師每次修改都認真負責，小到標點符號的錯誤，大到文章的整體布局和數(shù)據的處理，她都會提出需要改進的地方。 在此對尚潔老師的悉心指導表示衷心的感謝！ 第 14 頁 共 14 頁 參考文獻 [1] 程東升 .兩類木蹄層孔菌在酶蛋白水平上的遺傳分化 [J].苗物系統(tǒng) ,2021,19(1):81 一 8 [2] 中國科普博覽 .2021,2（ 12） [3] 方積年 .木蹄層孔菌多 糖的研究現(xiàn)狀 [J].藥學通報 ,1986,21(12):944 一 950. [4] 黃益麗 .層孔菌屬多糖的生物活性 [J].生命的化學 ,2021,21(5):372 一 373 [5] 陳潔 .木蹄層孔菌多糖的提取工藝及免疫活性研究 [D].廣州：南方醫(yī)科大學 ,2021 [6] 劉量 ,鄭維發(fā) ,周守標 .木蹄層孔菌乙醇提取物體內抗腫瘤活性及其對荷瘤鼠免疫功能的影響 [J].徐州醫(yī)學院學報 ,2021,27(8):497 一 499 [7] 劉量 ,鄭維發(fā) ,周守標 . 木蹄層孔菌乙醇提取物對腫瘤細胞的抑制作用 [J]. 癌變 .畸變 . 突變 ,2021,40(4):244 一 248 [8] 魏紅福 ,王志江 .響應面法優(yōu)化木蹄多糖提取工藝研究 [J].化學工程和裝備 ,2021,9:8 一 11 [9] 王紅 .論白腐真菌產木質素降解酶在環(huán)境治理中的應用［ J］．現(xiàn)代商務工業(yè) ,2021(7) : 297298． [10] 周雪 .白腐真菌漆酶的純化及性質 [J].生物加工過程 ,2021,9(2):5357 [11] 饒慶隆 .金針菇產漆酶發(fā)酵條件研究 [D].南京：南京林業(yè)大學 ,2021 [12] 朱琳 ,木蹄層孔菌 漆酶 的產生、分離純化及酶學性質研究 [D].哈爾濱： 東北林業(yè)大學 ,2021 [13] 朱思明 ,于淑娟 ,楊連生 .真菌漆酶的生產、性質和應用 .中國食品添加劑 ,2021,1:126 一 131 [15] 黃乾明 ,楊婉身 ,陳華萍 ,等 .粗毛栓菌誘變菌株 SAH12 漆酶的分離純化及酶學性質研究 .菌物學報 ,2021,26(4):539 一 548 [14] 初華麗 ,梁宗琦 .漆酶的潛在應用價值 .山地農業(yè)生物學報 ,2021,23(6):529 一 533 [15] 曹治云 ,鄭騰 ,謝必峰 ,等 .漆酶在生物檢測中的應用進展 .傳感器技術 ,2021， 23(8):13 [16] 李慧梅 ,王淑潔 ,宋蕾 ,李向巖 .動力學法測定酶活性的計算原理及求證 [J].陜西醫(yī)學檢驗 ,1994,9(2):116117 [17]司靜，崔寶凱，戴玉成 . 栓孔菌屬漆酶高產菌株的初步篩選及其產酶條件的優(yōu)化 . 微生物學通報 , 2021, 38(3): 405?416 ag an employment tribunal clai Emloyment tribunals sort out disagreements between employers and employees. You may need to make a claim to an employment tribunal if: you don39。t agree with the 第 15 頁 共 14 頁 disciplinary action your employer has taken against you your employer dismisses you and you think that you have been dismissed unfairly. For more informu, take advice from one of the anisations listed under Further help. Employment tribunals are less formal than some other courts, but it is still a legal process and you will need to give evidence under an oath or affirmation. Most people find making a claim to an employment tribunal challenging. If you are thinking about making a claim to an employment tribunal, you should get help straight away from one of the anisations listed under Further help. ation about dismissal and unfair dismissal, see Dismissal. You can make a claim to an employment tribunal, even if you haven39。t appealed against the disciplinary action your employer has taken against you. However, if you win your case, the tribunal may reduce any pensation awarded to you as a result of your failure to appeal. Remember that in most cases you must make an application to an employment tribunal within three months of the date when the event you are plaining about happened. If your application is received after this time limit, the tribunal will not usually accept i. If you are worried about how the time limits apply to you If you are being represented by a solicitor at the tribunal, they may ask you to sign an agreement where you pay their fee out of your pensation if you win the case. This is know