章蛋白質的共價結構-教學用(編輯修改稿)
2025-06-19 23:00 本頁面
【文章內容簡介】 四、蛋白質測序的策略 五、蛋白質測序的一些常用方法 六、根據(jù)基因的核苷酸序列推定多肽的氨基 七、蛋白質一級結構的舉例 八、蛋白質序列數(shù)據(jù)庫 九、肽與蛋白質的化學合成：固相肽的合成 教學內容 四、蛋白質測序的策略 ① 測定多肽鏈的數(shù)目 : 單體蛋白或同具體蛋白含一種多肽鏈 。 雜多聚蛋白含多種多肽鏈； ② 拆分多肽鏈 : 非共價結合 , 用變性劑如尿素 , 鹽酸胍或高濃度鹽 。 多肽鏈之間有二硫鍵 (胰島素 ), 用氧化劑或還原劑； ③ 多肽鏈內二硫鍵的斷裂 : 在步驟 4 之前斷裂 ,否則影響后面的測序； ④ 分析每一條多肽鏈的氨基酸組成 : 酸水解、堿水解或酶解； ⑤ 鑒定多肽鏈的 N末端和 C末端氨基酸殘基 : 鑒定兩個末端，作重建肽鏈氨基酸順序的參考點； ⑥ 用兩種以上方法裂解多肽鏈成較小的肽段； ⑦ 測定各肽段的氨基酸序列； ⑧ 拼接各肽段成完整的多肽鏈； ⑨ 確定二硫鍵的位置。 四、蛋白質測序的策略 一、蛋白質的分子大小 二、蛋白質結構的組織層次 三、肽 四、蛋白質測序的策略 五、蛋白質測序的一些常用方法 六、根據(jù)基因的核苷酸序列推定多肽的氨基 七、蛋白質一級結構的舉例 八、蛋白質序列數(shù)據(jù)庫 九、肽與蛋白質的化學合成：固相肽的合成 教學內容 (一 ) 末端分析 (二 ) 二硫鍵的斷裂 (三 ) 氨基酸組成的分析 (四 ) 多肽鏈的部分裂解 (五 ) 肽段氨基酸序列的測定 (六 ) 肽段在原多肽鏈中的次序的確定 (七 ) 二硫鍵位置的確定 五、蛋白質測序的一些常用方法 (一 )末端分析 1. N末端分析 DNP多肽經酸水解后 , 只有 N末端殘基變成黃色的 DNP氨基酸； DNP氨基酸經有機溶劑提取，用層析法鑒定 2. 羧基末端分析： 采用羧肽酶法 丹磺酰氯（ 5二甲基氨基 1萘磺酰氯） 2,4二甲基氨基 偶氮苯 4′磺酰氯 N末端分析的試劑還有： （二）二硫橋的斷裂 ① 一般用酸水解： 6 mol/L HCl， 110176。 10~24 h， Trp 破壞， Ser、 Thr、 Tyr也被破壞 , 程度與保溫時間有線性關系 。 ② 輔之以堿水解 : 5 mol/L NaOH, 110176。 , 20 h 。 ③ 氨基酸自動分析儀； ④ 表示方法：一般用每摩爾蛋白質中所含的氨基酸
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