犬瘟熱及其診斷與防制(編輯修改稿)
2025-06-18 21:33 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 統(tǒng)。由于受動物免疫狀態(tài)、野毒株毒力強弱差異等因素影響 ,感染 CDV后動物臨床癥狀不盡相同 ,在臨床上可將犬瘟熱分為呼吸型、消化型、神精型和混合型四種癥候型 ,這四種癥候型既可以獨立出現(xiàn) ,又可兩種或三種混合在一起。此外犬瘟熱的發(fā)生常與犬傳染性肝炎、犬細小病毒及其他細菌感染并發(fā)或繼發(fā) ,使病情變得更為復雜。 三、診斷技術(shù) ? 病毒分離 ? 膠體金免疫層析技術(shù) ? RTPCR和核酸探針技術(shù) ? 包涵體檢查 ? 血清學技術(shù) 膠體金免疫層析技術(shù) 膠體金免疫層析法 膠體金免疫層析技術(shù)是20世紀 90年代初在免疫滲濾技術(shù)的基礎上建立的一種簡易快速的檢測技術(shù) , 由 Beggs等最先用于人絨毛膜促性腺激素 (HCG ) 的測定，用于人的妊娠檢查。近年來該技術(shù)發(fā)展迅速 , 在生物醫(yī)學領域特別是醫(yī)學檢驗中得到了廣泛應用。 目前，膠體金技術(shù)廣泛用于小動物傳染病如：CDV、 CPV、 CAV（ 傳染性肝炎 ）、 CCV、 FPV（ 貓泛白細胞減少癥 ）、 FeSV（ 貓白血病 ）、 FIV（ 貓免疫缺陷病 ）等疾病的快速篩選診斷。 氯金酸 (HAuCl4)在還原劑作用下 , 可聚合成一定大小的金顆粒 , 它帶負電而且疏水 , 由于靜電作用金顆粒和水成為穩(wěn)定的膠體狀態(tài)稱膠體金。 膠體金標記技術(shù) , 實質(zhì)上是蛋白質(zhì)等高分子物質(zhì)被 吸附 到膠體金顆粒表面的包被過程。 吸附機理 是膠體金顆粒表面帶負電荷 , 與蛋白質(zhì)的正電荷基團因靜電吸引而形成牢固結(jié)合。用還原法可以方便地從氯金酸制備各種不同粒徑 , 也就是不同顏色的膠體金顆粒。這種球形的粒子對蛋白質(zhì)有很強的吸附能力 , 可以與葡萄球菌 A 蛋白、免疫球蛋白、毒素、糖蛋白、酶、抗生素、激素、牛血清白蛋白等非共價結(jié)合 , 因而在基礎研究和臨床實驗中成為非常有用的工具。顯微鏡下金標蛋白結(jié)合物呈黑褐色顆粒 , 當這些標記物在相應的配體處大量聚集時 , 肉眼可見紅色或粉紅色斑點 , 因而目前金標被應用于定性或半定量的快速免疫檢測方法中。 ? 例： CDV抗原膠體金快速診斷試紙 膠體金免疫層析技術(shù)所應用的主要技術(shù)類型是 雙抗體夾心法。 如主要是將 CDV抗體以條帶狀包被在 NC膜的檢測線 T上 ,膠體金標記的 CDV抗體吸附在結(jié)合墊上 , 當待測樣品加到試紙條一端的加樣孔上后 , 通過毛細作用向前移動 , 溶解結(jié)合墊上的膠體金標記的 CDV抗體 ,如果樣品中含有 CDV,則形成金標 CDV抗體 CDV抗原復合物， 再移動至包被的 CDV抗體的檢測線（ T）處 , 包被在檢測線上的 CDV抗體和金標 CDV抗體與樣品中的CDV結(jié)合 , 形成金標 CDV抗體 CDV抗原 CDV抗體復合物 , 膠體金富集在檢測線處形成一條可見的紫紅色線。 如果待檢血清中沒有相應抗體 , 膠體金標記物將不會與包被在檢測線上的抗體結(jié)合 , 膠體金不會富集 , 檢測線上不會出現(xiàn)紫紅色色線。當樣品與溶化了的膠體金標記物繼續(xù)往上移動至對照線（質(zhì)控線 C）時 , 就與包被在對照
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