生物技術(shù)在水產(chǎn)養(yǎng)殖中的應(yīng)用(編輯修改稿)
2024-10-10 09:30 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 用與研究魚類人工誘導雌核發(fā)育相類似的四步誘導法對中國對蝦進行人工誘導雌核發(fā)育，育出三批雌核發(fā)育的個體，但要大規(guī)模生產(chǎn)仍存在一定的困難。李勝忠等（ 1997）采取熱休克的方法誘導虹鱒二倍體雌核發(fā)育，三次實驗均獲成功。美國為了限制移植的草魚和白鰱的種群繁殖，用紫外 線處理過的鯉魚精子誘導白鰱卵的雌核發(fā)育，再經(jīng)溫差休克處理，獲得了雌核發(fā)育魚，但同樣存在受精率和孵化率低的問題。 2． 3 細胞核移植 細胞核移植技術(shù)是將一細胞核移植到另一去核的未受精卵或細胞內(nèi)的生物技術(shù)。我國著名生物學家童第周等率先在金魚和魚中進行同種魚的細胞核移植，隨后在這兩種魚間進行了不同亞科之間的細胞核移植，獲得了多種移植的核質(zhì)雜魚。 Yan（ 1985）等成功地進行了真骨魚類中兩種不同亞科種類之間的核移植，即將草魚的細胞核移植到團頭魴的細胞質(zhì)，獲得了核質(zhì)雜交魚。其外表特征與草魚相似，說明遺 傳信息的表達主要是受移入的魚細胞核的影響，而且核質(zhì)雜交魚的生長率比草魚略快但比短吻鳊要快得多，其生產(chǎn)的精子可與草魚卵回交并獲得了后代。林禮堂等（ 1996）把鯽魚、鯪魚和尼羅羅非魚的體細胞核移植到鯉魚的成熟去核卵中獲得了不同發(fā)育階段的胚胎和幼魚。目前，我國在魚類細胞核移植技術(shù)的理論研究和實際應(yīng)用方面都居世界領(lǐng)先地位。 2． 4 細胞培養(yǎng)技術(shù) 細胞培養(yǎng)技術(shù)是把生物的細胞分離、培養(yǎng)、誘導再生或快速繁殖的技術(shù)。目前這項技術(shù)已廣泛應(yīng)用于魚類細胞、珍珠貝外套膜上皮細胞以及海藻細胞等的培養(yǎng)。水產(chǎn)動物細胞培養(yǎng) 起始于魚類，同時以魚類細胞培養(yǎng)研究開展得較為系統(tǒng)，已建立的魚類細胞系也較多。這些細胞系具有多方面的用途，可代替活體動物用于病毒研究，可用于染色體制作等遺傳學研究，用于制作細胞疫苗，作為細胞核移植育種研究中供體細胞核來源，以及毒性和水質(zhì)監(jiān)測等的指示生物（細胞比魚體對有毒物質(zhì)更敏感）等。張念慈等（ 1981）建立了草魚吻端組織二倍體 ZC7901 細胞系，陳敏容等 1985 年建立了鯽魚異倍體細胞系 CAB－ 80，左文功等 1986 年建立了草魚腎組織 CIK 細胞系，童裳亮等 1989 年建立了虹鱒巨噬細胞系。與魚類相比，貝類、蝦 類等水產(chǎn)動物的細胞培養(yǎng)研究國內(nèi)外報道較少，如 Hanson 等 1976 年建立了淡水蝸牛胚胎細胞系，徐亞立等最近建立了斑節(jié)對蝦 PMO 細胞系。 3 疾病診斷技術(shù) 3． l 單克隆抗體技術(shù) 單克隆抗體技術(shù)是 K 和 M 于 1975 年發(fā)展起來的利用雜交瘤細胞制備大量針對某一抗原決定簇的特異性抗體的技術(shù)。單克隆抗體與常規(guī)血清抗體相比，特異性強，能識別單一抗原決定簇，且容易制備，能保持細胞系重復獲得相同抗體，因而在水產(chǎn)養(yǎng)殖病原體檢測中得到廣泛應(yīng)用。如應(yīng)用于診斷海灣扇貝的鰓立克次體、診斷與魚類及牡蠣相結(jié)合的淋巴 細胞病毒、檢測菲律賓蛤仔棕環(huán)病因弧菌 P1。另外，近年來已有人利用此技術(shù)制備了抗鰻弧菌的單克隆抗體的抗嗜水單胞菌外毒素的單克隆抗體。 3． 2 酶聯(lián)免疫吸附檢測 酶聯(lián)免疫吸附檢測（ EL1SA）是將抗原一機體的免疫反應(yīng)和酶的催化反應(yīng)相結(jié)合的技術(shù)。其基本原理是將抗原或抗體吸附于固相載體上，然后與酶標記的抗原或抗體結(jié)合，在適當?shù)牡孜飬⑴c下，使基質(zhì)水解而呈色，通過呈現(xiàn)的顏色變化來顯示抗原抗體特異反應(yīng)的存在。 ELISA 具有靈敏度高、特異性強、反應(yīng)快速等特點，而且結(jié)果可以定量，也可對抗原、抗體以及抗原抗體復 合物進行定位分析。 ELISA 法已用于 IPNV、VHSV、 CCV、 PERV、 SVCV、 GCHV 及 IHNV 的檢測中。隨著技術(shù)方法的不斷更新和改進，特別是單克隆抗體等的應(yīng)用，使檢測靈敏度和異性大幅度提高（ Ristow et al， 1991）。 Davis（ 1994）等結(jié)合細胞培養(yǎng)技術(shù)檢測 IPNV，大大增強了檢測的特異性、敏感性和客觀性。 3． 3
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