生物技術(shù)在水產(chǎn)養(yǎng)殖中的應(yīng)用(編輯修改稿)
2024-10-10 09:30 本頁(yè)面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 用與研究魚類人工誘導(dǎo)雌核發(fā)育相類似的四步誘導(dǎo)法對(duì)中國(guó)對(duì)蝦進(jìn)行人工誘導(dǎo)雌核發(fā)育，育出三批雌核發(fā)育的個(gè)體，但要大規(guī)模生產(chǎn)仍存在一定的困難。李勝忠等（ 1997）采取熱休克的方法誘導(dǎo)虹鱒二倍體雌核發(fā)育，三次實(shí)驗(yàn)均獲成功。美國(guó)為了限制移植的草魚和白鰱的種群繁殖，用紫外 線處理過(guò)的鯉魚精子誘導(dǎo)白鰱卵的雌核發(fā)育，再經(jīng)溫差休克處理，獲得了雌核發(fā)育魚，但同樣存在受精率和孵化率低的問(wèn)題。 2． 3 細(xì)胞核移植 細(xì)胞核移植技術(shù)是將一細(xì)胞核移植到另一去核的未受精卵或細(xì)胞內(nèi)的生物技術(shù)。我國(guó)著名生物學(xué)家童第周等率先在金魚和魚中進(jìn)行同種魚的細(xì)胞核移植，隨后在這兩種魚間進(jìn)行了不同亞科之間的細(xì)胞核移植，獲得了多種移植的核質(zhì)雜魚。 Yan（ 1985）等成功地進(jìn)行了真骨魚類中兩種不同亞科種類之間的核移植，即將草魚的細(xì)胞核移植到團(tuán)頭魴的細(xì)胞質(zhì)，獲得了核質(zhì)雜交魚。其外表特征與草魚相似，說(shuō)明遺 傳信息的表達(dá)主要是受移入的魚細(xì)胞核的影響，而且核質(zhì)雜交魚的生長(zhǎng)率比草魚略快但比短吻鳊要快得多，其生產(chǎn)的精子可與草魚卵回交并獲得了后代。林禮堂等（ 1996）把鯽魚、鯪魚和尼羅羅非魚的體細(xì)胞核移植到鯉魚的成熟去核卵中獲得了不同發(fā)育階段的胚胎和幼魚。目前，我國(guó)在魚類細(xì)胞核移植技術(shù)的理論研究和實(shí)際應(yīng)用方面都居世界領(lǐng)先地位。 2． 4 細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù) 細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是把生物的細(xì)胞分離、培養(yǎng)、誘導(dǎo)再生或快速繁殖的技術(shù)。目前這項(xiàng)技術(shù)已廣泛應(yīng)用于魚類細(xì)胞、珍珠貝外套膜上皮細(xì)胞以及海藻細(xì)胞等的培養(yǎng)。水產(chǎn)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng) 起始于魚類，同時(shí)以魚類細(xì)胞培養(yǎng)研究開(kāi)展得較為系統(tǒng)，已建立的魚類細(xì)胞系也較多。這些細(xì)胞系具有多方面的用途，可代替活體動(dòng)物用于病毒研究，可用于染色體制作等遺傳學(xué)研究，用于制作細(xì)胞疫苗，作為細(xì)胞核移植育種研究中供體細(xì)胞核來(lái)源，以及毒性和水質(zhì)監(jiān)測(cè)等的指示生物（細(xì)胞比魚體對(duì)有毒物質(zhì)更敏感）等。張念慈等（ 1981）建立了草魚吻端組織二倍體 ZC7901 細(xì)胞系，陳敏容等 1985 年建立了鯽魚異倍體細(xì)胞系 CAB－ 80，左文功等 1986 年建立了草魚腎組織 CIK 細(xì)胞系，童裳亮等 1989 年建立了虹鱒巨噬細(xì)胞系。與魚類相比，貝類、蝦 類等水產(chǎn)動(dòng)物的細(xì)胞培養(yǎng)研究國(guó)內(nèi)外報(bào)道較少，如 Hanson 等 1976 年建立了淡水蝸牛胚胎細(xì)胞系，徐亞立等最近建立了斑節(jié)對(duì)蝦 PMO 細(xì)胞系。 3 疾病診斷技術(shù) 3． l 單克隆抗體技術(shù) 單克隆抗體技術(shù)是 K 和 M 于 1975 年發(fā)展起來(lái)的利用雜交瘤細(xì)胞制備大量針對(duì)某一抗原決定簇的特異性抗體的技術(shù)。單克隆抗體與常規(guī)血清抗體相比，特異性強(qiáng)，能識(shí)別單一抗原決定簇，且容易制備，能保持細(xì)胞系重復(fù)獲得相同抗體，因而在水產(chǎn)養(yǎng)殖病原體檢測(cè)中得到廣泛應(yīng)用。如應(yīng)用于診斷海灣扇貝的鰓立克次體、診斷與魚類及牡蠣相結(jié)合的淋巴 細(xì)胞病毒、檢測(cè)菲律賓蛤仔棕環(huán)病因弧菌 P1。另外，近年來(lái)已有人利用此技術(shù)制備了抗鰻弧菌的單克隆抗體的抗嗜水單胞菌外毒素的單克隆抗體。 3． 2 酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè) 酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)（ EL1SA）是將抗原一機(jī)體的免疫反應(yīng)和酶的催化反應(yīng)相結(jié)合的技術(shù)。其基本原理是將抗原或抗體吸附于固相載體上，然后與酶標(biāo)記的抗原或抗體結(jié)合，在適當(dāng)?shù)牡孜飬⑴c下，使基質(zhì)水解而呈色，通過(guò)呈現(xiàn)的顏色變化來(lái)顯示抗原抗體特異反應(yīng)的存在。 ELISA 具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、反應(yīng)快速等特點(diǎn)，而且結(jié)果可以定量，也可對(duì)抗原、抗體以及抗原抗體復(fù) 合物進(jìn)行定位分析。 ELISA 法已用于 IPNV、VHSV、 CCV、 PERV、 SVCV、 GCHV 及 IHNV 的檢測(cè)中。隨著技術(shù)方法的不斷更新和改進(jìn)，特別是單克隆抗體等的應(yīng)用，使檢測(cè)靈敏度和異性大幅度提高（ Ristow et al， 1991）。 Davis（ 1994）等結(jié)合細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)檢測(cè) IPNV，大大增強(qiáng)了檢測(cè)的特異性、敏感性和客觀性。 3． 3
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