生物技術(shù)在園藝植物(編輯修改稿)
2025-07-04 03:09 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 king用酶法制備高等植物原生質(zhì)體首次獲得成功；1971年，Takebe首次從離體煙草原生質(zhì)體培養(yǎng)中獲得再生完整植株；1972年，Carlson首次獲得粉藍煙草和郎氏煙草的細胞雜種，這是第一個植物細胞雜種；1974年，Kao將聚乙二醇誘導(dǎo)融合法應(yīng)用于植物細胞融合并建立了相應(yīng)的融合技術(shù)；1978年，Melchers獲得第1個屬間細胞雜種（番茄＋馬鈴薯）；1981年，Zimmerman發(fā)明了電融合儀，并首次提出電融合概念；1987年，Schweiger建立了單對原生質(zhì)體電融合技術(shù)程序。體細胞雜交與有性雜交的異同比較內(nèi)容體細胞雜交有性雜交時間無季節(jié)限制花期限制，特別是母本的花期親緣關(guān)系一定程度上可以克服有性/嫁接不親和性受親和性影響結(jié)果細胞核、細胞質(zhì)均可以重組、倍性增加 雙受精，一般無細胞質(zhì)重組，倍性不改變原生質(zhì)體融合的有關(guān)名詞對稱雜種（雙親給雜種貢獻的遺傳物質(zhì)均為100%）非對稱雜種（雙親給雜種貢獻的遺傳物質(zhì)不等（相對值）胞質(zhì)雜種（cytoplasmic hybrid, Cybrid）：細胞質(zhì)重組，細胞核未重組對稱融合（symmetric fusion） 也稱標準融合（Standard fusion）非對稱融合(asymmetric fusion)：融合前對一方進行處理，使其染色體丟失一部分供受體融合：Donorrecipient fusion體配融合（gametosomatic fusion）（性細胞與體細胞融合）亞原生質(zhì)體原生質(zhì)體融合：Subprotoplastprotoplast fusion 小原生質(zhì)體：Miniprotoplast 微原生質(zhì)體：Microprotoplast 胞質(zhì)體：Cytoplast胞質(zhì)體原生質(zhì)體融合: Cytoplastprotoplast fusion原生質(zhì)體融合的方式化學方法：聚乙二醇法 Polyethylene glycol （PEG），與高pH高Ca結(jié)合使用物理方法：電融合法 Electrofusion, Electrically induced fusion理論上，任何細胞都有可能通過體細胞雜交而成為新的生物資源，這對種質(zhì)資源的開發(fā)和利用具有深遠的意義。 融合過程不存在有性雜交過程中的種性隔離機制的限制，為遠緣物種間的遺傳物質(zhì)交換提供了有效途徑。體細胞雜交產(chǎn)生的雜種細胞含有來自雙親的核外遺傳系統(tǒng)，在雜種的分裂和增殖過程中雙親的葉綠體、線粒體DNA亦可發(fā)生重組，從而產(chǎn)生新的核外遺傳系統(tǒng)。體細胞雜交的程序及方法原生質(zhì)體融合雜種細胞篩選方法：PEG，電融合，NaNO3營養(yǎng)互補選擇法，遺傳互補選擇法，機械選擇法， 形態(tài)學方法 細胞學方法同工酶方法分子標記法體細胞雜種植株的鑒定雜種融合體篩選雜種融合體移栽至不同的培養(yǎng)基體細胞雜交篩選原生質(zhì)體培養(yǎng)和體細胞雜交的應(yīng)用獲得新品種；創(chuàng)造新種質(zhì)；轉(zhuǎn)移有利性狀和克服遠源雜交的障礙；作為基因工程的良好受體及進行突變體篩選的優(yōu)良原始材料。第五節(jié) 植物細胞突變體的離體篩選一、突變體的產(chǎn)生在離體培養(yǎng)條件下，誘發(fā)突變的突變型和自發(fā)突變沒有本質(zhì)上的差別。一般都在三個水平上發(fā)生：①基因組突變，如染色體數(shù)目的改變或細胞質(zhì)基因組的增減；②染色體突變，指染色體較大范圍的結(jié)構(gòu)變化，涉及多個基因；③基因突變，指范圍在一個基因以內(nèi)分子結(jié)構(gòu)的改變。按DNA的改變方式有堿基置換突變、移碼突變、缺失突變和插入突變。體細胞無性系變異：Somaclonal variation二、突變細胞的篩選方法直接選擇法：正選擇/負選擇間接選擇法正選擇：其方法是用一種含有特定物質(zhì)的選擇培養(yǎng)基，在此培養(yǎng)基上只有突變細胞能夠生長，非突變細胞不能生長，從而直接篩選出突變體。如抗除草劑、抗鹽堿突變體的篩選，均可直接在培養(yǎng)基中加入一定濃度的除草劑或增加滲透壓的物質(zhì)。目前采用這一途徑，已從多種植物中篩選出可利用的體細胞變異體。賈敬芬等以小麥幼胚愈傷組織為材料，％ NaCl的N6培養(yǎng)基上直接篩選出小麥耐鹽系。分析顯示。鄭企成等也曾將小麥“京花1號”花藥經(jīng)γ射線處理后，％ NaCl培養(yǎng)基直接篩選獲得耐鹽再生株系。李愛賢等以甘薯“栗子香”為材料誘導(dǎo)胚性細胞系，從900個通過γ射線輻射的細胞團中，％NaCl的培養(yǎng)基中進行篩選，獲得22個抗鹽愈傷組織，并獲得20個抗鹽再生植株。 負選擇：負選擇法是一種借助于與突變表現(xiàn)型有關(guān)的性狀作為選擇指標的篩選方法。Dorffling等以Pro類似物羥脯氨酸（HYP）為選擇劑，獲得了耐HYP的體細胞變異系，其抗寒性比供體親本增強，且能穩(wěn)定遺傳。林定波等將錦橙株心細胞愈傷組織的懸浮細胞經(jīng)γ射線照射，然后在高濃度脯氨酸培
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