生物技術在水產養(yǎng)殖中的應用(文件)
【正文】 axler（ 1999）等以編碼 IHNV 病毒 G 蛋白（ PCMV4－ G）的裸 DNA免疫大麻哈魚， 8 周后，用 IHNV 病毒攻擊，保護 率可達 40％～ 100％。反義 RNA 是以 DNA有義鏈為模板合成的 RNA 及其衍生物，它可通過與相應的 mRNA 互補結合而阻斷其功能。結合并催化水解靶 RNA，因此它既有反義 RNA 的作用，又能以序列特異性地切割 RNA。環(huán)境生物修復技術是一個新的研究發(fā)展領域，國外采用生物修復技術改良水生環(huán)境，已取得新的進展。這種生物技術可以應用水產規(guī)?；B(yǎng)殖和工廠化養(yǎng)殖、石油污染、重金屬污染、城市排污以及海洋其它廢物（水）的處理等方面。在解決某一養(yǎng)殖對象的關鍵技術問題時，均涉及高新綜合性生物技術，所有這些生物技術的應用，無疑對漁業(yè)的發(fā)展產生著深遠而深刻的劃時代意義 。目前已進行的研究有：研究轉重金屬硫蛋白基因藻類對海水環(huán)境中重金屬的吸附能力；五油降解微生物在修復被五油污染的水 環(huán)境上的可行性及應用潛力；海洋磁細菌在去除和回收海水環(huán)境中重金屬上的應用潛力；用桿狀菌清除養(yǎng)魚場污水中的氮，用分子技術篩選作為海水養(yǎng)殖餌料的微藻，分離出耐冷的癸烷降解細菌，研究了海洋環(huán)境中多芳香化烴的微生物降解技術。生物修復是比生物降解含義更為廣泛，又以生物降解為重點的環(huán)境生物技術。不過目前還未見到有關成功應用反義技術來治 療水產養(yǎng)殖動植物病毒性疾病的報道，但作為一種特異性較強的檢測技術，反義技術是很有開發(fā)潛力的。目前，使用人工合成的反義 RNA 已在原核細胞和真核細胞中成功地抑制了多種病毒基因的表達。 反義技術 反義技術是近十多年來發(fā)展起來的反義核酸技術和核酶技術的總稱，可以用來特異性地阻斷病毒功能的發(fā)揮。魚用 DNA 疫苗主要針對的是病毒性魚病，目前研究應用的有出血性敗血病毒（ VHSV）、傳染性造血組織壞死病毒（ IHNV）、傳染性胰臟壞死病毒（ IPNV）、鰻魚病毒（ EVA、 EVEX）、草魚呼腸弧病毒（ FRV）、文蛤病毒等疫苗。此外， NK 細胞也能被生長激素（ Kajita et al． 1992）和左旋咪華 （ Kajita et al． 1990）所激活。在魚類中，可激活嗜中性粒細胞及巨噬細胞的吞噬作用；激活淋巴細胞產生或分泌淋巴因子以協(xié)調體液免疫和細胞免疫；刺激抗體的產生和補體的生成等。此外，應用 PCR 技術也可檢測貝類腸道病毒以及水或水生生物體內富集的病毒或細菌。 Lastra（ 1994）等應用 逆轉錄聚合酶鏈式反應（ RT－ PCR）對經培養(yǎng)細胞分高純化的病毒進行檢測，靈敏度達到lpg；另外，他們還對銀大馬哈魚、鱒魚組織中的 IPNV 進行檢測并進行擴增。 PCR 技術 聚合酶鏈式反應（ PCR）是體外酶促合成迅速擴增特異 DNA 片段的一種方法。 3． 3 核酸雜交技術 核酸雜交技術是利用特定標記的 DNA 或 RNA 探針和病原體生物中的與探針互補的靶核苷酸序列進行雜交，以此來確定宿主是否攜帶有病原體的一類分子生物學 技術，可分為 Southern 雜交、 Northern 雜交和核酸原位雜交。 ELISA 具有靈敏度高、特異性強、反應快速等特點，而且結果可以定量，也可對抗原、抗體以及抗原抗體復 合物進行定位分析。如應用于診斷海灣扇貝的鰓立克次體、診斷與魚類及牡蠣相結合的淋巴 細胞病毒、檢測菲律賓蛤仔棕環(huán)病因弧菌 P1。張念慈等（ 1981）建立了草魚吻端組織二倍體 ZC7901 細胞系，陳敏容等 1985 年建立了鯽魚異倍體細胞系 CAB－ 80，左文功等 1986 年建立了草魚腎組織 CIK 細胞系，童裳亮等 1989 年建立了虹鱒巨噬細胞系。 2． 4 細胞培養(yǎng)技術 細胞培養(yǎng)技術是把生物的細胞分離、培養(yǎng)、誘導再生或快速繁殖的技術。 Yan（ 1985）等成功地進行了真骨魚類中兩種不同亞科種類之間的核移植，即將草魚的細
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