實(shí)驗(yàn)九聚丙烯酰胺凝膠等電聚焦電泳測(cè)定蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)(編輯修改稿)
2024-10-07 11:28 本頁(yè)面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 10%TEMED 蛋白質(zhì)混合樣品 蒸餾水 混勻后置真空干燥器中抽氣 10 min 10%過(guò)硫酸銨 （ 3）將配好的凝膠溶液用細(xì)長(zhǎng)頭滴管加到預(yù)先準(zhǔn)備好的玻管中， 至離上端 1 cm處 ，再用注射器緩緩加水 35 mm高。 （ 4）待凝膠聚合 2. 電泳 小心地拔出玻管，并用蒸餾水洗去蔗糖溶液，把管固定到電泳槽上槽的洞中 （安裝時(shí)要保證凝膠管垂直且橡膠塞孔密封不漏） 在上槽中加入 5%磷酸緩沖液，在下槽中裝入 2%氫氧化鈉溶液。 避免管下有氣泡 。上槽接電泳儀的正極，下槽接負(fù)極，打開(kāi)電源，先調(diào)電壓至 100 V，待電壓穩(wěn)定后再升到 300 V，電泳 2 h以上至電流降為 0，將電壓調(diào)至 0，關(guān)閉電源。 3． 剝膠 電泳結(jié)束后 ， 取下凝膠管 ， 用蒸餾水充分洗凈兩端電極液 ， 在凝膠條的正極端插一銅絲為標(biāo)記 。 用灌滿水的注
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