浙江大學(xué)生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)甲sds—聚丙烯酰胺凝膠電泳法測(cè)定蛋白質(zhì)分子量(編輯修改稿)
2025-02-12 05:47 本頁(yè)面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 劑 （ TEMED）和引發(fā)劑 （ AP或 VitB2） 作用下聚合而成的三維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的凝膠 。 ? 單體和雙體單獨(dú)存在或混合在一起都是相對(duì)穩(wěn)定的 ，若有自由基存在則可引發(fā)二者的聚合 。 SDS— 聚丙烯酰胺凝膠電泳法 測(cè)定蛋白質(zhì)的分子量 ? 自由基引發(fā)的方式有化學(xué)法和光化學(xué)法兩種 ， 前者的引發(fā)劑是過(guò)硫酸胺 （ AP） ， 后者的引發(fā)劑是核黃素 （ VitB2） 。 兩種方法的催化劑都是四甲基乙二胺 （ TEMED） 。 ? 在一定濃度范圍內(nèi) ， 改變聚合體系中 Acr和 Bis的比例 ， 可得到不同網(wǎng)眼大小的凝膠 ， 由于凝膠的三維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu) ， 對(duì)在凝膠中泳動(dòng)的不同分子量的質(zhì)點(diǎn)有著選擇和阻礙 ， 因此使凝膠本身又具有分子篩效應(yīng) 。 SDS— 聚丙烯酰胺凝膠電泳法 測(cè)定蛋白質(zhì)的分子量 ? 聚丙烯酰胺凝膠電泳可分為連續(xù)和不連續(xù)系統(tǒng)兩種，不連續(xù)電泳系統(tǒng)是采用兩種不同的緩沖液配制兩種不同濃度的凝膠，它可使樣品在兩層膠的界面處濃縮，從而大達(dá)提高了電泳的分辨率，使之特別適用于稀樣品的分離。 ? 聚丙烯酰胺凝膠電泳法的特點(diǎn)：簡(jiǎn)便、快速、重復(fù)性好，只需幾微克的樣品即可進(jìn)行測(cè)定。當(dāng)分子量范圍在 15000~202200D時(shí)，所測(cè)得的結(jié)果與用其它方法測(cè)得的結(jié)果相比，誤差一般不超過(guò) 10%。 SDS— 聚丙烯酰胺凝膠電泳法 測(cè)定蛋白質(zhì)的分子量 ?、材料與試劑 試驗(yàn)材料 ? 新鮮植物葉片（大蒜、菠菜、韭菜） 試驗(yàn)試劑 SDS— 聚丙烯酰胺凝膠電泳法 測(cè)定蛋白質(zhì)的分子量 ? 標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì) 名稱 分子量 （ 104D） β半乳糖苷酶
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