sds-聚丙烯酰胺凝膠理論(編輯修改稿)
2025-06-18 10:50 本頁(yè)面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 化而形成蛋白質(zhì)聚合體。 2） 溶液中 SDS 的濃度： 溶液中 SDS 的總量，至少要比蛋白質(zhì)的量高 3 倍，一般需高達(dá) 10 倍以上。 當(dāng)溶液中 SDS單體濃度大于 1mmol/L時(shí)大多數(shù)蛋白質(zhì)與 SDS結(jié)合的重量比為 1:，如果單休濃度降到 mmol/L以下時(shí)，兩者的結(jié)合比僅為 1: ，為保證蛋白質(zhì)與 SDS的充分結(jié)合，它們的重量比應(yīng)該為 1:4或 1:3。 3） 溶液的離子強(qiáng)度： 溶液的離子強(qiáng)度應(yīng)較低，最高不能超過(guò) ， 因?yàn)? SDS 在水溶液中是以單體和分子團(tuán)的混合體而存在， SDS 結(jié)合到蛋內(nèi)質(zhì)分子上的量，僅決定于平衡時(shí) SDS 單體的濃度而不是總濃度，在低離子強(qiáng)度的溶液中， SDS 單體具有較高的平衡濃度。 三 . 注意事項(xiàng) 用 SDSPAGE測(cè)蛋白質(zhì) Mr時(shí)應(yīng)注意以下問(wèn)題： 1 ). 如果蛋白質(zhì) SDS 復(fù)合物不能達(dá)到 SDS ／ lg 蛋白質(zhì)的比率并具有相同的構(gòu)象，就不能得到準(zhǔn)確的結(jié)果。 2 ). 不同凝膠濃度適用于不同的 Mr范圍， Weber 的實(shí)驗(yàn)指出，在 5% 的凝膠中， M r 為 25 000200 000 的蛋白質(zhì) ，其 Mr的對(duì)數(shù)與遷移率 呈直線關(guān)系；在 10 ％的凝膠中， M r 為 10 00070 000 蛋白質(zhì) ，其 Mr的對(duì)數(shù)與遷移率 呈直線關(guān)系；在 15 ％的凝膠中， Mr為 10 00050 000 蛋白質(zhì)，其 M r 的對(duì)數(shù)與遷移率呈直線關(guān)系； ％ ( 以上各種濃度的凝膠，其交聯(lián)度都是 %) 的凝膠可用于
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