sds—聚丙烯酰胺垂直平板電泳(編輯修改稿)
2025-06-15 13:12 本頁(yè)面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 制 ? （ 6）、 ； mol/L Tris— HC1 Buffer的配制： ? （ 7）、四甲基乙二胺 (TEMED)，直接取原液。 ? （ 8）、 2%瓊脂糖溶液的配制： （用于封電泳槽滲漏） ? （ 9）、 %溴酚蘭溶液的配制： （ 10）、樣品溶液的配制： mg/ （ 11）、標(biāo)準(zhǔn)品溶液的配制 : （ 12）、染色液的配制： （ 13）、樣品溶解 Buffer溶液的配制 1M Tris— HC1 ml 甘油 ml 10% SDS ml 2— 巰基乙醇（ EtSH） ml % 溴酚蘭 ml 蒸餾水（ DDW ） ml ∑ ml 需要同學(xué)自己配制的試劑溶液 （ 14）、脫色液的配制：， 400500毫升 /組 冰醋酸：甲醇：水 = ： ： (V/V) 五 方法與步驟 五 方法與步驟 (一 )、凝膠的聚合 垂直平板電泳槽的裝配 分離膠及濃縮膠的配制 分離膠的制備 堆集膠的制備 (二 )、加標(biāo)準(zhǔn)品和樣品溶液 加樣量 加樣方法 (三 )、電泳 (四 )、處理凝膠區(qū)帶 染色 脫色 (五 )、鑒定 5 凝膠的聚合 51 垂直平板電泳槽的裝配 （ 1）、在潔凈的電泳槽和玻璃平板兩邊緣中間各添加一塊小墊條，緊緊 貼合四只夾子（一邊二只），以致密封。 （ 2）、用滴管吸取經(jīng)沸水加熱溶解的 2%瓊脂糖溶液，趁熱灌注于玻璃平 板的底槽，待瓊脂糖凝固后，底層即封閉（需避免氣泡）。 （ 3）、再在玻璃平板槽內(nèi)用注射器（或滴管）加蒸餾水至滿刻度，并觀 察是否有滲漏現(xiàn)象如有滲漏，則需要重新安裝玻璃平板槽 ，應(yīng)確 保無(wú)滲漏，然后棄去槽內(nèi)蒸餾水 ,并用吸水紙輕輕吸去槽內(nèi)未棄盡 的蒸餾水。 51 分離膠及濃縮膠的配制：見(jiàn)下表。 表 1：分離膠及濃縮膠的配制 名 稱 體 積 [ml] 名 稱 體 積 [ml] 12%分離膠 [ ] 5%濃縮膠 [ ] DDW DDW 30% Arc + Bis 30% Arc + Bis Tris （ ） Tris（ ） 10% SD
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