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sds—聚丙烯酰胺垂直平板電泳(文件)

 

【正文】 ml 蒸餾水( DDW ) ml ∑ ml 需要同學(xué)自己配制的試劑溶液 ( 14)、脫色液的配制:, 400500毫升 /組 冰醋酸:甲醇:水 = : : (V/V) 五 方法與步驟 五 方法與步驟 (一 )、凝膠的聚合 垂直平板電泳槽的裝配 分離膠及濃縮膠的配制 分離膠的制備 堆集膠的制備 (二 )、加標(biāo)準(zhǔn)品和樣品溶液 加樣量 加樣方法 (三 )、電泳 (四 )、處理凝膠區(qū)帶 染色 脫色 (五 )、鑒定 5 凝膠的聚合 51 垂直平板電泳槽的裝配 ( 1)、在潔凈的電泳槽和玻璃平板兩邊緣中間各添加一塊小墊條,緊緊 貼合四只夾子(一邊二只),以致密封。垂直平板電泳的優(yōu)點(diǎn)在于在一塊凝膠平板上可以同時(shí)進(jìn)行不同樣品的電泳。用該方法測(cè)得的是蛋白質(zhì)亞基的分子量。SDS— 聚丙烯酰胺垂直平板電泳 一 實(shí)驗(yàn)原理 ? 十二烷基硫酸鈉( SDS)是一種陰離子去污劑。 ? 在用該方法進(jìn)行分子量的測(cè)定中,是利用某些已知分子量的指示蛋白質(zhì)與經(jīng) SDS處理后解離成單鏈的蛋白質(zhì)樣品進(jìn)行電泳比較,根據(jù)蛋白質(zhì)的電泳遷移率,在一定的分子量范圍內(nèi)與分子量的對(duì)數(shù)所呈的線形關(guān)系,就可以測(cè)出單鏈樣品蛋白質(zhì)的分子量。本實(shí)驗(yàn)采用垂直平板以不連續(xù)系統(tǒng)的 SDS— 聚丙烯酰胺凝膠方式進(jìn)行電泳。 三 實(shí)驗(yàn)儀器與器材 3 實(shí)驗(yàn)儀器 : ? ( 1)、垂直平板電泳槽裝置(套); ? ( 2)、電動(dòng)磁力攪拌器 ? ( 3)、電動(dòng)脫色儀 ? ( 4)、電泳儀 ? ( 5)、電 爐 ? ( 6)、天 平 ? ( 7)、混合器 3 主要實(shí)驗(yàn)器材 ? ( 1)、 可調(diào)取液器 ? ( 2)、 微量注射器 ? ( 3)、 醫(yī)用注射器 ? ( 4)、 8針頭 ? ( 5)、 燒 杯 ? ( 6)、 洗耳球 ? ( 7)、 量 筒 ? ( 8)、 培養(yǎng)皿 ? ( 9)、 吸水紙 ? ( 10)、記號(hào)筆 四 實(shí)驗(yàn)試劑與配制 4實(shí)驗(yàn)試劑 ? ( 1)、 丙 烯 酰 胺
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