sds—聚丙烯酰胺垂直平板電泳-預(yù)覽頁(yè)
【正文】 ,400 道爾頓 4試劑配制 ? （ 1）、電極緩沖液的配制： ? （ 2）、丙烯酰胺 (Arc) 和甲叉雙丙烯酰胺 (Bis)溶液的配制： ? （ 3）、 10%十二烷基硫酸鈉 (SDS )溶液的配制： ? （ 4）、 10%過硫酸銨 (AP)溶液的配制： ? （ 5）、 ； mol/L三羥甲基氨基甲烷 — HC1 Buffer的配制 ? （ 6）、 ； mol/L Tris— HC1 Buffer的配制： ? （ 7）、四甲基乙二胺 (TEMED)，直接取原液。 51 分離膠及濃縮膠的配制：見下表。 51濃縮 (堆集 )膠的制備 （ 1）、取一小燒杯 ,按表 1比例配制濃縮膠 （ 2）、將混合好的堆集膠貯液用帶有長(zhǎng)針頭的注射器吸取加注到分 離膠膠面上，直至高度約為 2cm。用小濾紙條吸去齒孔內(nèi)殘液，但不能 觸及和移動(dòng)齒。 上電極 接電泳儀 負(fù)極 ， 下電極 接電泳儀 正 極 ， 開啟電泳儀，使 穩(wěn)壓 ： 120伏特 。 作業(yè)建議 表 1：標(biāo)準(zhǔn)品各蛋白質(zhì)分子量及相應(yīng)對(duì)數(shù)分子量和遷移率表 名 稱 分子量（ MW） （道爾頓） 對(duì)數(shù)分子量 （ Log MW） 遷移率 （ CM） 兔 磷 酸 化 酶 B 97,400 牛 血 清 白 蛋 白 66,200 兔 肌 動(dòng) 蛋 白 43,000 牛 碳 酸 酐 酶 31,000 胰 蛋 白酶 抑制劑 20,100 雞 蛋 清 溶 菌 酶 14,400 表 1：標(biāo)準(zhǔn)品各蛋白質(zhì)分子量及相應(yīng)對(duì)數(shù)分子量和遷移率表 Fermentas公司 名 稱 分子量（ MW） （道爾頓） 對(duì)數(shù)分子量 （ Log MW） 遷移率 （ CM） B半乳糖苷酶 117,000 牛 血 清 白 蛋 白 85,000 卵 清 蛋 白 48,000 碳 酸 酐 酶 34,000 乳球 蛋 白 26,000 雞 蛋 清 溶 菌 酶 14,900 圖 2：蛋白質(zhì)分子量標(biāo)準(zhǔn)曲線 SDS 聚丙烯酰胺凝膠電泳低分子量蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線圖y = + R2 = 450 2 4 6 8蛋白質(zhì)遷移率(MW )Log MW特別提醒 一定要給出文字性的結(jié)果
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