浙江大學生物化學實驗甲sds—聚丙烯酰胺凝膠電泳法測定蛋白質分子量-展示頁
2025-01-25 05:47本頁面
【正文】 測定蛋白質的分子量 ? 這種復合物由于結合了大量的 SDS， 使蛋白質喪失了原有的電荷狀態(tài) ， 形成了僅保持原有分子大小為特征的負離子團塊 ， 從而降低或消除了各種蛋白質分子之間天然的電荷差異 。 ? SDS是一種陰離子去污劑 ， 它在水溶液中以單體和分子團的混合形式存在 。SDS— 聚丙烯酰胺凝膠電泳法 測定蛋白質的分子量 ?、 原理 ? 電泳法分離 、 檢測蛋白質混合樣品 ， 主要是根據(jù)各蛋白質組分的分子大小和形狀以及所帶靜電荷的多少等因素所造成的電泳遷移率的差別 。 蛋白質分子在外加電場下的泳動行為可用下列函數(shù)式表示： EQ V = 6π rη v：分子泳動速度 Q ：分子所帶凈電荷 E：電場強度 r ：分子半徑 η ： 介質粘度 SDS— 聚丙烯酰胺凝膠電泳法 測定蛋白質的分子量 ? 如果在聚丙烯酰胺凝膠系統(tǒng)中 ， 加入一定量的十二烷基磺酸鈉 （ SDS） ， 則蛋白質分子的電泳遷移率主要取決于它的分子量的大小 ， 而其它因素對電泳遷移率的影響幾乎可以忽略不計 。 SDS— 聚丙烯酰胺凝膠電泳法 測定蛋白質的分子量 ? 這種陰離子去污劑能破壞蛋白質分子之間以及與其它物質分子之間的非共價鍵 ， 使蛋白質變性而改變原有的空間構象 ， 特別是在強還原劑 ， 如巰基乙醇存在下 ， 由于蛋白質分子內的二硫鍵被還原 ， 從而保證了蛋白質分子與 SDS能充分結合 ， 形成帶負電荷的蛋白質 SDS復合物 。 ? SDS與蛋白質結合后 ， 還會引起蛋白質分子發(fā)生構象的改變 ， 使蛋白質復合物在水溶液中的形狀近似于雪茄煙形的長橢圓棒 。 SDS— 聚
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