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sds-聚丙烯酰胺凝膠電泳(1)-展示頁(yè)

2025-05-16 18:13本頁(yè)面
  

【正文】 質(zhì)應(yīng)選用不同的凝膠濃度 . (四)分子量測(cè)定 相對(duì)遷移率( Rf) Rf即用每個(gè)帶的遷移距離除以溴酚藍(lán)前沿的遷移距離得到的。 尿素系統(tǒng): 適用分子量低于 15KD的蛋白樣品。 (二)緩沖系統(tǒng)的選擇 一般情況下,在被分析的蛋白質(zhì)穩(wěn)定的 pH范圍,凡 不與 SDS發(fā)生相互作用 的緩沖液都可以使用,但緩沖液的選擇對(duì)蛋白質(zhì)的分離和電泳的速度是非常關(guān)鍵的。 當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)的分子量在 15KD— 200KD之間時(shí), 電泳遷移率與分子量的對(duì)數(shù)呈線(xiàn)性關(guān)系 影響 SDS電泳的關(guān)鍵因素 ( 1) 溶液中 SDS單體濃度 大多數(shù)蛋白質(zhì)與 SDS結(jié)合的重量比為 1: ( 2) 樣品緩沖液的離子強(qiáng)度 低離子強(qiáng)度 的溶液中, SDS單體才具有較高的平衡濃度。 ( 3) 長(zhǎng)軸的長(zhǎng)度 則與亞基分子量的大小成正比。 ( 3)蛋白質(zhì) SDS膠束所帶的負(fù)電荷大大超 過(guò)了蛋白質(zhì)分子原有的電荷量, 消除 了不同分子之間原有的 電荷差異 。 SDS 陰離子去污劑 變性劑 助溶性試劑 斷裂分子內(nèi)和分子間的氫鍵 分子去折疊 破壞蛋白質(zhì)分子的二級(jí)和三級(jí)結(jié)構(gòu) 強(qiáng)還原劑 巰基乙醇( β mercaptoethanal) 二硫蘇糖醇( dithiothreitol, DTT) 使半胱氨酸殘基之
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