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實(shí)驗(yàn)九聚丙烯酰胺凝膠等電聚焦電泳測(cè)定蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)-全文預(yù)覽

  

【正文】 ( 2)配膠 表 10mL %凝膠的配制 試 劑 名 稱 體積 (mL) 凝膠貯液 兩性電解質(zhì)載體 10%TEMED 蛋白質(zhì)混合樣品 蒸餾水 混勻后置真空干燥器中抽氣 10 min 10%過硫酸銨 ( 3)將配好的凝膠溶液用細(xì)長(zhǎng)頭滴管加到預(yù)先準(zhǔn)備好的玻管中, 至離上端 1 cm處 ,再用注射器緩緩加水 35 mm高。 ? 兩性電解質(zhì)載體 (carrier ampholytes) (1)易溶于水 , 在 pI處應(yīng)有足夠的緩沖能力 , 形成穩(wěn)定的 pH梯度 , 不致被蛋白質(zhì)或其它兩性電解質(zhì)改變pH梯度 。在電場(chǎng)作用下,蛋白質(zhì)在此 pH梯度凝膠中泳動(dòng),當(dāng)遷移至 pH值等于 pI處時(shí),就不再泳動(dòng),而被濃縮成狹窄的區(qū)帶。 (4)化學(xué)性能穩(wěn)定 , 與被分離物不起化
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