過氧化物酶(pod)同工酶聚丙烯酰胺凝膠電泳-全文預覽
【正文】 離子的摩爾濃度，Zi為離子的價數。一般低離子強度比較合適，因為此時導電性低，產生的熱量較少。因此，電泳時應避免用高電滲物質作支持介質。遷移率與粒子的大?。╮）有關，非球形粒子（如DNA）在電泳過程中會受到更大的阻力，即粒子的移動速度還與粒子形狀有關。a(2)6πrη由（2）式可以看出，凡能影響溶液粘度η的因素如溫度，影響分子帶電量q及解離度a的因素如pH的改變，都會對遷移率產生影響。用電泳技術分離、分析蛋白質、酶、核酸等生物大分子，有較高的分辨率，目前已成為生物科學研究中必不可少的手段之一。過氧化物酶(POD)同工酶聚丙烯酰胺凝膠電泳一、目的了解聚丙烯酰胺凝膠電泳原理。二、實驗原理：聚丙烯酰胺凝膠電泳原理及影響電泳的主要因素帶電粒子在電場中向與其自身帶相反電荷的電極移動，這種現象稱為電泳。a(1)6πrηu=q同時，所選用的pH以能擴大各種被分離物質所帶電荷量的差異為好，以利于分離各種成分。例如在紙電泳中，由于濾紙（纖維素）上帶有負電荷，因感應相吸而使與濾紙相接觸的水溶液帶正電荷，從而使液體向負極移動，帶動著本來是向負極泳動的物質以更快的速度移動。最后，要考慮選用離子強度適宜的溶液?！＿@種凝膠是以丙烯酰胺單體（Acrylamide，簡寫為Acr）和交聯劑N，N39。但在具有自由基團體系時，它們聚合。四甲基乙二胺（Tetramethylenediamine，簡寫為TEMED）。光聚合以光敏感物核黃素（即VB2）作為催化劑，在痕量氧存在下，核黃素經光解形成無色基，無色基被氧再氧化成自由基，從而引起聚合作用。此外，長鏈上富含酰胺基團，使其成為穩(wěn)定的親水凝膠。改變凝膠濃度以便適應各種樣品的分離。 20～30 10～15 ＜104凝膠濃度較小，孔徑相對較大。（2）緩沖液離子組成及各層凝膠的pH不同。在這三種效應的共同作用下，待測物質被很好地分離開來。（3）濃縮效應：待分離樣品中的各組分在濃縮膠中會被壓縮成層，而使原來很稀的樣品得到高度濃縮。HCl是強電解質，不管在哪層膠中，HCl幾乎都全部電離，Cl－布滿整個膠板。這樣，快離子和慢離子之間就形成了一個不斷移動的界面。這種在電泳開始后產生的高電位梯度作用于酶蛋白和甘氨酸慢離子加速前進，追趕快離子。此時，快慢離子的界面跑到被分離的酶蛋白之前，不連續(xù)的高電位梯度不再存在。植物在發(fā)育過程中，所含同工酶的種類和比例都不相同，它們與植物的遺傳、生長發(fā)育、代謝調節(jié)及抗性等都有一定關系，因此作為基因表達的產物，測定同工酶譜是認識基因存在和表達的一種工具，在植物的種群、發(fā)育及雜交遺傳的研究中有重要的意義。利用聚丙烯酰胺凝膠電泳測定同工酶，方法簡便，靈敏度高，重現性強，測定結果便于觀察、記錄和保存。三、實驗材料、儀器與試劑材料土豆和豆芽儀
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