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正文內(nèi)容

sds-聚丙烯酰胺凝膠電泳(1)(編輯修改稿)

2025-06-03 18:13 本頁面
 

【文章內(nèi)容簡介】 度要比后者快一倍。 尿素系統(tǒng): 適用分子量低于 15KD的蛋白樣品。 Tris甘氨酸 系統(tǒng): 使用最多的緩沖液 Tris硼酸鹽緩沖液: 測定糖蛋白的分子量 (三)凝膠濃度的選擇 由于 SDS電泳分離并不取決于蛋白質(zhì)的電荷密度,只取決于分子解聚后SDS蛋白質(zhì)膠束的大小,因此凝膠濃度的選擇會直接影響分辨率。 不同分子量范圍的蛋白質(zhì)應(yīng)選用不同的凝膠濃度 . (四)分子量測定 相對遷移率( Rf) Rf即用每個帶的遷移距離除以溴酚藍前沿的遷移距離得到的。 測量位置應(yīng)在蛋白帶的中央。 蛋白帶遷移距離 Rf= ———————— 溴酚藍遷移距離 蛋白帶遷移距離 固定前的凝膠長度 Rf= ————————— X ————————— 干燥后的凝膠長度 溴酚藍遷移距離 作圖 以已知蛋白質(zhì)分子量的常用對數(shù)值為縱坐標(biāo), Rf為橫坐標(biāo)繪圖 通過測定未知蛋白質(zhì)的 Rf值,便可在標(biāo) 準(zhǔn)曲線上讀出他的分子量 二、去污劑的選擇 無離子去污劑: Lubro W; Brij35, Tween Triton 陽離子去污劑: cetyltrimethyl ammonium
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