綜合性設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)-3(編輯修改稿)
2024-10-07 08:06 本頁(yè)面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 、 αβ、 γ球蛋白各管的光密度。 6. 計(jì)算： 光密度總和 T ＝ A+α1+α2+β+γ 白蛋白％＝ A/T 100% α1球蛋白％＝ α1/T 100% α2球蛋白％＝ α2/T 100% β球蛋白％＝ β/T 100% γ球蛋白％＝ γ/T 100% 臨床意義 ? 正常值： 白蛋白： 57～ 72% α1球蛋白： 2～ 5% α2球蛋白： 4～ 9% β球蛋白： ～ 12% γ球蛋白： 12～ 20% ? 急性肝炎：發(fā)病早期蛋白質(zhì)電泳無(wú)變化，發(fā)病兩周后白蛋白、 α2及 β球蛋白減少， γ球蛋白增高。 ? 慢性肝炎： γ球蛋白升高，白蛋白下降較急性肝炎顯著。 ? 肝硬化：白蛋白、 α α2球蛋白均明顯下降， γ球蛋白極度升高，甚至 A/G比值倒置。 ? 腎病綜合征時(shí)，白蛋白降低， α2 、 β球蛋白升高。 聚丙烯酰胺凝膠等電聚焦電泳 實(shí)驗(yàn)?zāi)康? ? 學(xué)習(xí)等電聚焦電泳分離血清蛋白的原理 ? 學(xué)習(xí)聚丙烯酰胺作為電泳介質(zhì)的優(yōu)點(diǎn)及用途 ? 了解等電聚焦電泳和普通聚丙烯酰胺電泳的異同 以聚丙烯酰胺作為支持物，兩性載體電解質(zhì)在支持物內(nèi)形成穩(wěn)定的 pH梯度，當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)在電場(chǎng)力的作用下，便會(huì)在支持物中運(yùn)動(dòng)到相當(dāng)與自身 pI的位置中聚合成一狹窄的區(qū)帶而停留下來(lái)。 實(shí)驗(yàn)原理 聚丙烯酰胺凝膠 ? 聚丙烯酰胺凝膠電泳是以聚丙烯酰胺凝膠作為支持介質(zhì)的電泳方法。聚丙烯酰胺凝膠是由單體的丙烯酰（ Acrylamide,Acr）和甲叉雙丙烯酰胺（ N,Nmethylenebisacrylamide,Bis）在催化劑作用下聚合而成。 ? 聚丙烯酰胺凝膠的特點(diǎn)：機(jī)械彈度好、彈性大、透明、化學(xué)穩(wěn)定性高及無(wú)電滲等。 ? 聚丙烯酰胺凝膠兼有電泳和分子篩的雙重作用，分辨率高。 等電聚焦電泳 ? 蛋白質(zhì)是帶有電荷的兩性生物大分子 ， 其正負(fù)電荷的數(shù)量隨所處環(huán)境酸堿度的變化而變化 。 在電場(chǎng)存在下的一定 pH溶液中 ， 帶正電的蛋白分子將向負(fù)極移動(dòng)而帶負(fù)電的蛋白分子將向正極移動(dòng) ， 在某一 pH時(shí) ， 蛋白分子在電場(chǎng)中不再移動(dòng) ， 此時(shí)的 pH值即為該蛋白質(zhì)的等電點(diǎn) 。 ? 等電聚焦 (IEF） 電泳就是在凝膠中加入兩性電解質(zhì)從而構(gòu)成從正極到負(fù)極 pH逐漸增加的pH梯度 ， 處在其中的蛋白分子在電場(chǎng)的作用下運(yùn)動(dòng) ， 最后各自停留在其等電點(diǎn)的位置上 ，測(cè)出蛋白分子聚焦位
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