食品檢驗工中級培訓(xùn)資料(編輯修改稿)
2024-10-04 21:23 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 （ 注明水樣的稀釋倍數(shù)） 菌落計數(shù)的報告： 稀釋度的選擇： 1. 應(yīng)選擇平均菌落數(shù)在 30300之間的稀釋度，乘以稀釋倍數(shù)報告之（ 見表例 1）。 2. 若有兩個稀釋度其生長之菌落數(shù)均在 30300，則應(yīng)視二者之比如何來決定，若其比值小于 2，應(yīng)報告平均數(shù)。 若其比值大于 2則報告其中較小的數(shù)字（ 見表例 3）。 3. 若所有平均菌落數(shù)均大于 300，則應(yīng)按稀釋度最高的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報告之（ 見表例 4）。 4. 若所有稀釋度的平均菌落數(shù)均小于 30，則應(yīng)按稀釋度最低的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報告之（ 見表例 5）。 5. 若所有稀釋度的平均菌落數(shù)均不在 30300之間，其中一 部分大于 300或小于 30時，則以最接近 30或 300的平均菌 落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報告之 （ 見表例 6）。 6. 若所有稀釋度的菌落數(shù)均不可計數(shù)，則以 最高稀釋倍數(shù)無法計數(shù) 報告之。 菌落計數(shù)的報告 : 菌落數(shù) 報告結(jié)果 30~300 之間 平均菌落數(shù) X 稀釋倍數(shù) 求比值 2 取較小稀釋倍數(shù) 在 30~300之間 2 取平均數(shù) 300 最高稀釋度平均菌落數(shù) X 最高稀釋倍數(shù) 30 最低稀釋度平均菌落數(shù) X 最低稀釋倍數(shù) 300 30 無法計數(shù) 報告無法計數(shù) 取最接近的 X 稀釋倍數(shù) (若有兩個稀釋度 ) 四、操作步驟 ? （二）大腸菌群的測定 乳糖發(fā)酵試驗 分離培養(yǎng) 證實試驗 樣品稀釋后， 選擇三個稀釋度，每個稀釋度接種三管乳糖膽鹽發(fā)酵管。 36177。 1℃ 培養(yǎng) 48177。 2h，觀察是否產(chǎn)氣。 將產(chǎn)氣發(fā)酵管培養(yǎng)物轉(zhuǎn)種于伊紅美藍(lán)瓊脂平板上，36177。 1℃ 培養(yǎng) 1824h，觀察菌落形態(tài)。 挑取平板上的可疑菌落，進(jìn)行革蘭氏染色觀察。同時接種乳糖發(fā)酵管 36177。 1℃ 培養(yǎng)24177。 2h，觀察產(chǎn)氣情況。 根據(jù)證實為大腸桿菌陽性的管數(shù)，查 MPN表，報告每100ml（ g）大腸菌群的MPN值。 具體操作 （考試操作） 1. 樣本的稀釋 2. 乳糖蛋白胨培養(yǎng)基的制備、分裝和滅菌 培養(yǎng)基的分裝： 2個 250mL燒瓶中各裝入 50mL乳糖蛋白胨培養(yǎng)基，把 10支小試管分別裝入 10支大試管，然后分別加入 5mL乳糖蛋白胨培養(yǎng)基。 3. 加樣培養(yǎng)： 在 2個含有 50ml三倍濃縮的乳糖蛋白胨發(fā)酵燒瓶中，各加入 100ml水樣。在 10支含有5ml三倍濃縮乳糖蛋白胨發(fā)酵管中，各加入 10ml水樣?；靹蚝螅?37℃ 培養(yǎng) 24小時， 24小時未產(chǎn)氣的繼續(xù)培養(yǎng)至 48小時。 ：把 9支小試管管口朝下分別裝入 9支大試管，然后分別加入 5mL乳糖蛋白胨培養(yǎng)基。 培養(yǎng)： 選擇三個稀釋度，每個稀釋度接種三管乳糖膽鹽發(fā)酵管，每管加樣 1ml。 混勻后， 37℃ 培養(yǎng) 24小時，24小時未產(chǎn)氣的繼續(xù)培養(yǎng)至 48小時。 較清潔樣品的三步法圖示 100mL 50mL三倍濃縮乳糖蛋白胨培養(yǎng)液 100mL 5mL 5mL 5mL 5mL 5mL 5mL 5mL 5mL 5mL 5mL 水樣 10mL 10mL 10mL 10mL 10mL 10mL 10mL 10mL 10mL 10mL 三步法圖示 取產(chǎn)酸產(chǎn)氣的發(fā)酵管中培養(yǎng)液在伊紅美蘭平板上進(jìn)行劃線 取有核心和帶金屬光澤的深紫色菌落進(jìn)行革蘭氏染色 乳糖蛋白胨培養(yǎng)液 鏡檢（ 革蘭氏陰性菌 ） 37℃ 培養(yǎng) 48h 證實產(chǎn)氣（陽性）結(jié)果與否 37℃ 培養(yǎng) 24h 37℃ 培養(yǎng) 24h 典型菌落 產(chǎn)氣 報告為大腸菌群陽性 不產(chǎn)氣 報告為大腸菌群陰性 乳糖起選擇作用；溴甲酚紫起產(chǎn)酸指示，還有抑制其他細(xì)菌作用 ?1．水樣的采取 ?自來水：先將自來水龍頭用火焰燒灼 3min滅菌，再開放水龍頭使水流 5 min后，以滅菌三角燒瓶接取水樣，以待分析。 ?池水、河水或湖水：應(yīng)取距水面 10 15 cm的深層水樣，先將滅菌的帶塞玻璃瓶，瓶口向下浸人水中，然后翻轉(zhuǎn)過來，除去玻璃塞，水即流人瓶中，盛滿后，將瓶塞蓋好，再從水中取出，最好立即檢查，否則需放人冰箱中保存。 ? 2．自來水檢查 （ 1）初（步）發(fā)酵試驗在 2個含有 50ml三倍濃縮的乳糖蛋白胨發(fā)酵燒瓶中，各加入 100ml水樣。在 10支含有 5ml三倍濃縮乳糖蛋白胨發(fā)酵管中，各加入 10ml水樣（如圖 ⅩⅣ 1）。混勻后， 37℃培養(yǎng) 24小時， 24小時未產(chǎn)氣的繼續(xù)培養(yǎng)至 48小時。 （ 2）平板分離經(jīng) 24小時培養(yǎng)后，將產(chǎn)酸產(chǎn)氣及 48小時產(chǎn)酸
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