【正文】 份水樣為陰性結(jié)果 ， 無(wú)大腸桿菌存在； 10mL的水樣中有 5份為陽(yáng)性結(jié)果 ， 存在大腸桿菌 。 ? 2 范圍 ? 適用于進(jìn)入廠區(qū)的所有人員。 ? B 每日兩次對(duì)風(fēng)浴室及消毒池設(shè)施進(jìn)行清洗，消毒，若發(fā)現(xiàn)地塑毯、濾網(wǎng)等用品老化時(shí)，及時(shí)更換。 ? 作業(yè)指導(dǎo)書(shū)，流程。 ? 。 ? 進(jìn)入車(chē)間人員： ? 更衣：所有進(jìn)入車(chē)間人員在進(jìn)入前，必須在更衣室內(nèi)換上干凈的工作裝（包括工作帽、衣褲、工作鞋）；外來(lái)人員請(qǐng)?jiān)谲?chē)間管制處領(lǐng)取干凈的工作裝，在更衣室內(nèi)更換。 1℃培養(yǎng) 48177。 ? （ 3）復(fù)發(fā)酵試驗(yàn)經(jīng)涂片、染色、鏡檢，如為革蘭氏陰性無(wú)芽孢桿菌，則挑取該菌落的另一部分，重新接種于普通濃度的乳糖蛋白胨發(fā)酵管中，每管可接種來(lái)自同一初發(fā)酵管的同類(lèi)型菌落 1— 3個(gè)， 37℃ 培養(yǎng) 24小時(shí)，結(jié)果若產(chǎn)酸又產(chǎn)氣，即證實(shí)有大腸菌群存在。 具體操作 （考試操作） 1. 樣本的稀釋 2. 乳糖蛋白胨培養(yǎng)基的制備、分裝和滅菌 培養(yǎng)基的分裝： 2個(gè) 250mL燒瓶中各裝入 50mL乳糖蛋白胨培養(yǎng)基，把 10支小試管分別裝入 10支大試管，然后分別加入 5mL乳糖蛋白胨培養(yǎng)基。 若其比值大于 2則報(bào)告其中較小的數(shù)字（ 見(jiàn)表例 3）。 水樣接種于發(fā)酵管內(nèi)， 37℃ 下培養(yǎng)， 24小時(shí)內(nèi)小套管中有氣體形成，并且培養(yǎng)基混濁，顏色改變，說(shuō)明水中存在大腸菌群，為陽(yáng)性結(jié)果，但也有個(gè)別其他類(lèi)型的細(xì)菌在此條件下也可能產(chǎn)氣；此外產(chǎn)酸不產(chǎn)氣的也不能完全說(shuō)明是陰性結(jié)果。 ? 6. 脫色：用濾紙吸去殘水，將玻片傾斜，用滴管滴加 95％乙醇脫色，直至流出的乙醇無(wú)紫色時(shí) 立即水洗，以終止脫色。將聚光器降到最低位置。 四、操作步驟 ? 1．觀察前的準(zhǔn)備 （ 1）顯微鏡的安置： 搬動(dòng)顯微鏡時(shí)應(yīng)用右手握住鏡臂，左手托住底座，使鏡身保持直立，并緊靠身體，切忌單手拎提。 ? 3．用二甲苯擦鏡頭時(shí)用量要少，不宜久抹，以防溶解膠粘透鏡的樹(shù)脂。 ? 9. 混合涂片染色 ? 10. 清理：實(shí)驗(yàn)完畢，清潔顯微鏡。 伊紅美藍(lán)瓊脂平板含有伊紅與美藍(lán)染料，在此亦作為指示劑，大腸菌群發(fā)酵乳糖造成酸性環(huán)境時(shí)，該兩種染料即結(jié)合成復(fù)合物，使大腸菌群產(chǎn)生與遠(yuǎn)藤氏培養(yǎng)基上相似的、帶核心的、有金屬光澤的深紫色（龍膽紫的紫色）菌落。 菌落計(jì)數(shù)的報(bào)告 : 菌落數(shù) 報(bào)告結(jié)果 30~300 之間 平均菌落數(shù) X 稀釋倍數(shù) 求比值 2 取較小稀釋倍數(shù) 在 30~300之間 2 取平均數(shù) 300 最高稀釋度平均菌落數(shù) X 最高稀釋倍數(shù) 30 最低稀釋度平均菌落數(shù) X 最低稀釋倍數(shù) 300 30 無(wú)法計(jì)數(shù) 報(bào)告無(wú)法計(jì)數(shù) 取最接近的 X 稀釋倍數(shù) (若有兩個(gè)稀釋度 ) 四、操作步驟 ? （二）大腸菌群的測(cè)定 乳糖發(fā)酵試驗(yàn) 分離培養(yǎng) 證實(shí)試驗(yàn) 樣品稀釋后， 選擇三個(gè)稀釋度，每個(gè)稀釋度接種三管乳糖膽鹽發(fā)酵管。 培養(yǎng)： 選擇三個(gè)稀釋度，每個(gè)稀釋度接種三管乳糖膽鹽發(fā)酵管，每管加樣 1ml。 則： MPN=? ? 3．池水、河水或湖水等的檢查 （ 1）將水樣稀釋成 101與 102。 ? 3 定義 ? (無(wú) ) ? 4 標(biāo)準(zhǔn)作法 ? 進(jìn)入廠區(qū)人員： ? 廠區(qū)內(nèi)禁止抽煙，公司員工只能在規(guī)定的時(shí)間、規(guī)定的地點(diǎn)抽煙。消毒池視水質(zhì)清潔狀況不定時(shí)更換和加藥。 ? 腦力激蕩，具有創(chuàng)造性 ? 經(jīng)濟(jì)性、時(shí)效性。 ? 各生產(chǎn)車(chē)間門(mén)禁管理 : ? 、離崗。 ? 叉車(chē)必須在規(guī)定的叉車(chē)通道內(nèi)行駛。 將產(chǎn)氣發(fā)酵管培養(yǎng)物轉(zhuǎn)種于煌綠乳糖膽鹽（ BGLB）肉湯中， 36177。 （ c）淡紫紅色、中心顏色較深。 根據(jù)證實(shí)為大腸桿菌陽(yáng)性的管數(shù)，查 MPN表，報(bào)告每100ml（ g）大腸菌群的MPN值。 2. 若有兩個(gè)稀釋度其生長(zhǎng)之菌落數(shù)均在 30300，則應(yīng)視二者之比如何來(lái)決定，若其比值小于 2，應(yīng)報(bào)告平均數(shù)。溴甲酚紫還有抑制其他細(xì)菌如芽胞菌生長(zhǎng)的作用。 ? 5. 媒染：用典液沖去殘水，并用典液覆蓋 1 min，水洗。 ? (2) 清潔顯微鏡 ? (3) 清潔后應(yīng)將物鏡轉(zhuǎn)成“八”宇式，緩慢下降鏡筒，使物鏡擱在鏡臺(tái)上。物鏡的轉(zhuǎn)換使用鏡頭轉(zhuǎn)換器！??！ （ 2）視野明暗調(diào)節(jié)：通過(guò)電壓調(diào)節(jié)光源強(qiáng)弱；調(diào)節(jié)聚光器虹彩光圈或聚光器高度的調(diào)節(jié)。切勿用乙醇擦鏡頭和支架。有菌的玻片用洗衣粉水煮沸后，清洗干凈。初發(fā)酵管 24小時(shí)內(nèi)產(chǎn)酸產(chǎn)氣和 48小時(shí)產(chǎn)酸產(chǎn)氣的均需在以上平板上劃線分離菌落。 36177。 混勻后， 37℃ 培養(yǎng) 24小時(shí)，24小時(shí)未產(chǎn)氣的繼續(xù)培養(yǎng)至 48小時(shí)。 （ 2）分別吸取 1ml10 101的稀釋水樣和1ml原水樣，各入裝有 10ml普通濃度乳糖蛋白胨發(fā)酵管中。 ? 公司員工上班必須穿公