【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 藥物穩(wěn)定性研究 。 ② 藥理 毒理 學(xué)研究工作 包括藥效學(xué)、毒理學(xué) 的資料準(zhǔn)備和試驗(yàn)研究 ③臨床試驗(yàn) ◆ 藥代動(dòng)力學(xué)研究 ◆ 隨機(jī)對(duì)照臨床試驗(yàn) ④ 生產(chǎn)上市 包括現(xiàn)場(chǎng)生產(chǎn)考核、取得《藥品注冊(cè)批件》及規(guī)?；a(chǎn) 項(xiàng)目的技術(shù)方案 ① 藥學(xué)研究工作 Ⅰ 處方與制備工藝 Ⅰ a 處方 硫酸氨基葡萄糖氯化鈉復(fù)鹽 314g 硫酸軟骨素（以純品計(jì)） 200g 羧甲淀粉鈉 15g 微 粉 硅 膠 5g 7 制 成 1000 粒量 Ⅰ b 制備工藝 將硫酸氨基葡萄糖氯化鈉復(fù)鹽原料、硫酸軟骨素、羧甲淀粉鈉和微粉硅膠過(guò) 80 目篩粉碎。取處方量的上述原、輔料，充分混勻，經(jīng)過(guò)中間測(cè)定，灌裝 0 號(hào)膠囊。 膠囊內(nèi)容物為類白色粉末，每粒含硫酸氨基葡萄糖復(fù)鹽 314mg，相當(dāng)硫酸氨基葡萄糖 250mg；硫酸軟骨素 200mg。 Ⅱ 質(zhì)量研究工作： 根據(jù)本品質(zhì)量研 究測(cè)定結(jié)果， 參照 171。中國(guó) 藥典 187。2021 年版及 171。新藥（西藥）藥學(xué)研究指導(dǎo)原則 187。中的有關(guān)規(guī)定與方法 ， 制訂本品的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn) (草 案 )。 Ⅱ a 性狀 取本品三批樣品觀察，均為類白色粉末，故將本品的性狀訂為類白色粉末。 Ⅱ b 鑒別 ◆ 硫酸氨基葡萄糖的 HPLC 鑒別：因含量測(cè)定采用 HPLC 法，同時(shí)，美國(guó)藥典項(xiàng)下復(fù)方硫酸氨基葡萄糖片中的硫酸氨基葡萄糖鑒別也采用高效液相色譜法，因此我們也采用高效液相色譜法作為硫酸氨基葡萄糖的鑒別。 ◆ 硫酸軟骨素的電泳鑒別 ： 參考美國(guó)藥典，采用電泳法作為硫酸軟骨素的鑒別，此法重現(xiàn)性好，故用作硫酸軟 骨素的鑒別。 Ⅱ c 檢查 ◆ 溶出度檢查 參照美國(guó)藥典 XXVII 版規(guī)定，硫酸氨基葡萄糖與硫酸軟骨素的溶出限度均訂為不低于 75%，并根據(jù)臨床用藥的要求。本項(xiàng)指標(biāo)訂入質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。 ◆ 微生物限度檢查 依《中國(guó)藥典》 2021 年版二部附錄 Ⅺ J 項(xiàng)下對(duì)三批樣品進(jìn)行檢查，結(jié)果：三批樣品（ 2021010 2021010 20210103）均符合規(guī)定，本項(xiàng)指標(biāo)訂入質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。 Ⅱ d 裝量差異 由于本項(xiàng)為膠囊項(xiàng)下的常規(guī)檢查項(xiàng)，故在本標(biāo)準(zhǔn)中不列出。 Ⅱ e 含量測(cè)定 我們參照美國(guó)藥典 XXVII 版中復(fù)方硫酸氨基葡萄糖和硫酸軟骨素的含量測(cè)定方法， 8 分別對(duì)硫酸氨基葡萄糖衍生化后的高效液相色譜法和硫酸軟骨素的光度滴定法做了相關(guān)的方法學(xué)試驗(yàn)，結(jié)果表明：本 法專屬性、重現(xiàn)性好。因此，我們采用高效液相色譜法和光度滴定法作為硫酸氨基葡萄糖和硫酸軟骨素的含量測(cè)定方法。 三批樣品（ 2021010 2021010 20210103） 硫酸氨基葡萄糖和硫酸軟骨素的含量均符合標(biāo)示量的 ～ %的規(guī)定。 Ⅲ 初步穩(wěn)定性研究： 影響因素試驗(yàn)結(jié)果表明：在光照（ 4500Lx177。 500Lx）、高溫 60℃條件下，性狀、含量、溶出度均無(wú)顯著變化。高濕 %及 75%的條件下放置 5天，溶出度無(wú)顯著性變化，但內(nèi)容物吸濕均無(wú)法稱重。提示本品需密封保存。本品按上市包裝加速試驗(yàn) 6個(gè)月和室溫留樣考察 6個(gè)月與 0天相比，性狀、含量和溶出度等各項(xiàng)指標(biāo)均無(wú)顯著性變化，室溫留樣仍在考察中。 ②藥理 毒理 學(xué)研究工作 氨基葡萄 糖是來(lái)源于甲殼素的一種天然糖類，為軟骨基質(zhì)中的主要成分，通過(guò)改變其側(cè)鏈結(jié)構(gòu)，在關(guān)節(jié)軟骨中更易與水結(jié)合，保持關(guān)節(jié)腔潤(rùn)滑和緩沖壓力的作用，對(duì)受損的軟骨細(xì)胞具有一定的保護(hù)作用，硫酸氨基葡聚糖還可控制癥狀發(fā)展，有利于軟骨的修復(fù)。 Ⅰ 藥效學(xué)研究 硫酸氨基葡萄糖是軟骨基質(zhì)及滑液的正常成分，在軟骨及關(guān)節(jié)組織中具有多種藥理作用，而關(guān)節(jié)軟骨退行性變特征是軟骨基質(zhì)中的蛋白聚糖生物合成受損，在骨關(guān)節(jié)炎時(shí)，此種合成受損和不足。此時(shí)，供給硫酸氨基葡萄糖可刺激關(guān)節(jié)軟骨的蛋白聚糖合成，使之合成正?；?。最近研究表明，口服硫酸氨基葡萄糖 能被吸收，并且能分布到關(guān)節(jié)組織中，具有抗炎和促進(jìn)合成代謝作用；本品還能抑制某些破壞軟骨的酶，如膠原酶和磷酸酶 A2，減少損傷細(xì)胞的內(nèi)毒性因子的釋放，因此能減輕骨關(guān)節(jié)炎癥狀，阻斷關(guān)節(jié)退行性變，延遲疾病進(jìn)展。 目前，體外試驗(yàn)結(jié)果提示它有益于軟骨的代謝。支持該結(jié)論的試驗(yàn)如下： ⑴ 當(dāng)氨基葡萄糖加入培養(yǎng)的 骨性關(guān)節(jié)炎 患者軟骨細(xì)胞中時(shí)，隨劑量不同，蛋白聚糖的合成有不同程度增加。 ⑵ 氨基葡萄糖對(duì)人軟骨細(xì)胞基因的表達(dá)有影響，如聚合素的 mRNA 在穩(wěn)定期水平增加 2 倍。 ⑶ 氨基葡萄糖能增加人胎兒軟骨細(xì)胞特異性 Ⅱ 型膠原的合成。 ⑷ 氨基 9 葡萄糖能 抑制 IL1 介導(dǎo)的軟骨細(xì)胞中聚合素酶的活性。在近期的臨床試驗(yàn)中亦證實(shí)硫酸氨基葡萄糖的軟骨保護(hù)作用。 氨基葡萄糖除有益于軟骨的代謝外，還有抗炎作用。氨基葡萄糖的抗炎機(jī)制與NSAID 不同，氨基葡萄糖可刺激軟骨細(xì)胞產(chǎn)生具有正常多聚體結(jié)構(gòu)的蛋白多糖，穩(wěn)定細(xì)胞膜，從而起抗炎作用。氨基葡萄糖還可減少由巨噬細(xì)胞產(chǎn)生的超氧化物自由基，抑制損傷軟骨的酶如膠原酶和磷脂酶 A2。因此可將氨基葡萄糖與 NSAID（如雙氯芬酸、消炎痛、吡羅昔康）聯(lián)合應(yīng)用，并可減少 2～ 倍 NSAID 的劑量，明顯降低 NSAID副作用的發(fā)生率 。 硫酸軟骨 素作為結(jié)締組織的重要組成部分，具有多種藥理作用與生理功能。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，硫酸軟骨素在關(guān)節(jié)中具有潤(rùn)滑和支撐的功能；它還具有抗動(dòng)脈粥樣硬化及抗粥樣斑塊形成的作用，緩和的抗凝血活性。 Ⅱ 毒副作用 ⑴ 一般藥理研究 有報(bào)道氨基葡萄糖在體外可抑制β 細(xì)胞葡萄糖激酶的活性，并可減少葡萄糖引起的胰島素分泌。 ⑵ 急性毒性研究 口服很大劑量（ 5000～ 15000mg/kg）的氨基葡萄糖，耐受性很好，也未報(bào)道有毒性作用。大鼠、小鼠和兔服用氨基葡萄糖的 LD50大于 5000mg/kg（中位數(shù)＞ 8000mg/kg）。Glaza 給 5 雄 5 雌大鼠口服 5000mg/kg 氨基葡萄糖，所有動(dòng)物每天記錄 2 次體重改變、死亡率和致病率， 15 天后采用 CO2 窒息處死并用肉眼進(jìn)行尸檢，包括尸體外表檢查，胸腔、腹腔、骨盆及口腔中所有器官和組織的檢查，未發(fā)現(xiàn)與藥物相關(guān)的影響。 硫酸軟骨素經(jīng)急慢性毒理實(shí)驗(yàn)，結(jié)果顯示本品無(wú)明顯的急慢性毒性。 ⑶ 長(zhǎng)期毒性研究 8只雄性自發(fā)性高血壓大鼠 （ SHR） 和 8只雄性 SD大鼠經(jīng)口給予鹽酸氨基葡萄糖 9周的反應(yīng)，并與基礎(chǔ)飲食比較。以 % (w/w)的比例摻入食物或約 300 mg/kg（ 相當(dāng)于 10～20倍人常用劑量 ） 飼養(yǎng)動(dòng)物。采集 樣品包括血液、心、肝、腎，進(jìn)行分析和組織學(xué)檢查。分析測(cè)量項(xiàng)目包括血清丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶、天冬酸轉(zhuǎn)氨酶和血尿素氮。研究結(jié)果未發(fā)現(xiàn)給藥引起血液化學(xué)指標(biāo)和器官組織學(xué)的一致改變，表明在 9周的實(shí)驗(yàn)中氨基葡萄糖對(duì)兩個(gè)品系大鼠無(wú)整體毒性。 大鼠攝入硫酸氨基葡萄糖 2700 mg/kg，連續(xù) 52周；犬?dāng)z入 2149 mg/kg，連續(xù) 26周。兩個(gè)種屬動(dòng)物均未出現(xiàn)與給藥相關(guān)的不良反應(yīng)，所以無(wú)毒性反應(yīng)的最大劑量水平 10 （ NOAEL） 大鼠為 2700 mg/kg，犬為 2149 mg/kg。 大鼠、小鼠、家兔、犬經(jīng)口給予 12～ 365日、劑量約為 159～ 8000 mg/kg/日 （ 中位劑量為 867 mg/kg/日 ） 的氨基葡萄糖實(shí)驗(yàn)均未發(fā)現(xiàn)不良反應(yīng)。經(jīng)口給予氨基葡萄糖對(duì)大鼠、小鼠、家兔、犬和馬的耐受性良好。 硫酸軟骨素經(jīng)急慢性毒理實(shí)驗(yàn)，結(jié)果顯示本品無(wú)明顯的急慢性毒性。 ⑷ 致突變、生殖毒性、致癌研究 硫酸氨基葡萄糖和硫酸軟骨素?zé)o任何致突變活性，無(wú)致畸和致癌作用。 ③臨床試驗(yàn) Ⅰ 藥代動(dòng)力學(xué)研究 有關(guān)單方的硫酸氨基葡萄糖和單方的硫酸軟骨素的藥動(dòng)學(xué)試驗(yàn) 國(guó)