【文章內(nèi)容簡介】 川木通在中國藥用歷史上已有千年之久，在《證類本草》、《本草綱目》、《天寶本草》等書中均有記載。川木通主要含有三萜皂苷類、黃酮類、木脂素、多糖等活性成分。魏志奇 [1]表示，目前已經(jīng)報(bào)道的川木通中所含的黃酮類為二氫黃酮。 川木通藥理作用 （ 1）利尿作用 川木通作為利尿藥使用已有幾千年歷史，是極為傳統(tǒng)的藥用植物。張雪松 [2]的兔慢性利尿試驗(yàn)表明川木通有顯著利尿效果。他們的試驗(yàn)方法是連續(xù) 5 天給兔的腹腔給以木通醇浸膏，從而得到該結(jié)果。 （ 2）抗炎鎮(zhèn)痛作用 川木通中含有豐富的皂苷類化合物以及有機(jī)酸成分，具有抗炎鎮(zhèn)痛的作用。由劉巖庭 [3]等的研究可知川木通有抗炎效果。運(yùn)用小鼠腹腔毛細(xì)血管通透法和小鼠耳腫脹法可得到，川木通中常春藤皂苷元對(duì)抗炎最有效，齊墩果酸也可以 顯著抑制二甲苯的致炎反應(yīng)。 （ 3）抗菌作用 川木通同時(shí)還具有抗菌作用，其作用機(jī)理是它具有一定的殺菌作用。唐遠(yuǎn) [4]烏蘭其其格 [5]的研究均表明表明川木通可殺滅金黃色葡萄球菌、 大腸桿菌等細(xì)菌。 黃酮 黃酮類化合物泛指由中央三碳將 2 個(gè)苯環(huán)聯(lián)結(jié)起來的一系列化合物（ C6C3C6） 。因 這類化合物多呈黃色或淡黃色而稱黃酮。自然界中廣泛存在著黃酮類化合物，植物組織中的糖能與很多黃酮類化合物結(jié)合，其大多數(shù)存在的形式是黃酮苷，少部分是游離態(tài)。它們有助于植物抵御異物的侵入，也有助于植物生長、發(fā)育、開花、結(jié)果。黃酮 是天然酚類化合物之首 [6] 。目前已超過 4 000 種 2 的黃酮類類化合物被分離出來 ,國內(nèi)外廣泛關(guān)注其生理活性的多樣性，研究進(jìn)展迅速。 黃酮類化合物的分子結(jié)構(gòu) 黃酮類化合物的基本骨架（如圖 ）。根據(jù)三碳鏈氧化程度的不同、 B 環(huán)連接位置的不同以及三碳鏈的環(huán)化程度等特點(diǎn) ,可被分為黃酮類、黃酮醇類、二氫黃酮類、二氫黃酮醇類、異黃酮類、二氫異黃酮類等不同類型。 圖 黃酮類化合物的基本化學(xué)結(jié)構(gòu) Chemical constitution of flavonoids 黃酮類化合物的理化性質(zhì) 黃酮類化合物大多數(shù)為結(jié)晶固體，少數(shù)為無定型粉末，多數(shù)呈黃色或淡黃色，可以測(cè)定熔點(diǎn)。結(jié)構(gòu)和存在狀態(tài)的不同在很大程度上影響著其溶解度，有以下一般規(guī)律：游離苷元易溶于稀堿和有機(jī)溶劑（如：乙醇、乙醚、乙酸乙酯等），幾乎不溶于水；水、甲醇、乙醇等強(qiáng)極性的溶劑易于溶解黃酮苷類化合物，而苯、氯仿、石醚等有機(jī)溶劑難于溶解。此外，黃酮類化合物還能與部分試劑在一定條件下發(fā)生獨(dú)特的顯色反應(yīng)，在早期，化學(xué)顯色反應(yīng)常在研究工作中被用來判斷黃酮類化合物是否存在以及以何種類型存在。 黃酮類化合物的藥理作用 黃酮類 化合物能治療多種人類疾病，具有抗炎、抗癌等諸多藥理作用。 （ 1）黃酮類化合物的抗炎免疫作用 黃酮類化合物能影響細(xì)胞有絲分裂，影響細(xì)胞細(xì)胞間的相互作用，因此具有抗炎免疫作用。王曉梅等 [7]研究表明，黃酮類化合物可抑制 NO、 MDA 和 PGE2 3 等 的合成。同時(shí)通過他們的研究結(jié)果表明，黃酮對(duì)二甲苯誘導(dǎo)的小鼠耳腫脹以及大鼠腹腔巨噬細(xì)胞 IL1 的生成有抑制作用。 （ 2）黃酮類化合物對(duì)腦血管系統(tǒng)的影響 黃酮能修復(fù)血管內(nèi)皮細(xì)胞的損傷，能溶解血栓，也能促進(jìn)腦組織纖溶系統(tǒng)改善功能，黃酮類化合物有協(xié)同保護(hù)腦組織 的作用。曹珊 [8]等研究表明：黃酮對(duì)腦缺血炎癥及內(nèi)皮血管的損傷有很好的療效。 （ 3）黃酮類化合物的抗癌作用 黃酮類化合物的抗癌作用主要與其雌激素樣作用、抑制酶的活性、誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡等作用有關(guān)。研究表明，黃酮類化合物對(duì)乳腺癌、前列腺癌等均有預(yù)防和治療作用 [9]。 黃酮類化合物的其他應(yīng)用 黃酮類化合物的溶解特性很寬 , 黃酮類化合物既有水溶性的 , 又有脂溶性的?？蓳?jù)需要選擇合適黃酮類化合物作為食品著色劑 [10]?？稍谶m當(dāng)條件下黃酮類化合物中的二氫黃酮類化合物轉(zhuǎn)化而成顯甜味的二氫查爾酮糖苷，可作為天然的甜 味劑。同時(shí)， 工業(yè)上用的染料和抗氧化劑也曾使用過黃酮類化合物。 黃酮提取的原理與方法 隨著近十幾年黃酮類化合物藥用價(jià)值的不斷提升，它的提取顯得尤為重要。下面簡單介紹一下目前報(bào)道的黃酮類化合物的提取方法與原理。 溶劑萃取法 僅限于提取黃酮苷類物質(zhì)時(shí)，可用熱水進(jìn)行提取，如：自槐花米中提取蘆丁。極性比較大的多糖黃酮苷，可以直接用沸水提取，但是沸水提取易產(chǎn)生較多易溶于水的雜質(zhì)，需較復(fù)雜的后處理，且提取率也不理想，不常使用。極性較小的游離黃酮苷元?jiǎng)t可用甲醇：水（ 1:1）連續(xù)萃取 [11]。 堿提取 酸沉淀法 由于黃酮類化合物大多具有酚羥基，易溶于堿水中?？上扔脡A性的水或稀醇提取，提取液經(jīng)酸化后可析出黃酮類化合物沉淀 [11]。 4 酶解法 當(dāng)一些原料的細(xì)胞壁包圍著黃酮類物質(zhì)，使其不易被提取時(shí)，可以采用酶法提取 。如山楂中，黃酮被細(xì)胞壁所包圍 , 且細(xì)胞壁間有果膠粘結(jié) , 采用酶提比一般方法提取率高 [12]。破壞果膠、纖維素等連接細(xì)胞壁的物質(zhì)，使黃酮類物質(zhì)得到充分釋放是酶法提取原理。 超聲波提取法 用超聲波法提取黃酮類物質(zhì)，是目前比較新的方法 。它的原理是超聲波產(chǎn)生的振動(dòng)強(qiáng)烈、加速 度高、空化作用強(qiáng)、以及攪拌作用有助于破壞細(xì)胞膜，利于釋放與溶出黃酮類化合物。提取液在超聲波作用下不斷震蕩，有利于溶質(zhì)擴(kuò)散。超聲的熱效應(yīng)使水溫基本在 57℃ ，對(duì)原料有水溶作用 [12]，超聲提取不對(duì)提取物的結(jié)構(gòu)、活性產(chǎn)生影響 [13]。因此，超聲波提取法作為一種快速、高效、節(jié)能的新型提取工藝，使原料的利用率和有效成分的提取率得到了很大提高，提取時(shí)間大大縮短，并且避免了高溫對(duì)提取成分的影響。 立題依據(jù)和研究意義 目前 ,利用超聲輔助提取川木通總黃酮的研究報(bào)道很少，本文采用正交法優(yōu)化其條件，為以后川木通總黃酮 的工業(yè)化生產(chǎn)提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ) 。 2 材料與方法 實(shí)驗(yàn)材料 實(shí)驗(yàn)原料 川木通購自 湖北省金貴中藥飲片公司 ，粉碎過 60 目篩，存于陰涼干燥處備用。 實(shí)驗(yàn)試劑 試劑名 產(chǎn)地或供應(yīng)商 蘆丁 國藥集團(tuán) 氫氧化鈉 天津市風(fēng)船化學(xué)試劑科技有限公司 硝酸鋁 天津市福晨化學(xué)試劑有限公司 5 亞硝酸鈉 天津市福晨化學(xué)試劑有限公司 溶液配置 1 mol/L 氫氧化鈉 稱取 4 g 氫氧化鈉于燒杯中，沸騰后冷卻的蒸餾水溶解（除二氧化碳），移至 100 mL 容量瓶中，定容至刻度線，搖勻貼上標(biāo)簽，備用， 10%硝酸鋁溶液 稱取 10 g 硝酸鋁置于燒杯中，溶解，移至 100 mL 容量瓶中，定容至刻度線，搖勻，貼上標(biāo)簽，備用 5%亞硝酸鈉溶液 稱取 5 g 亞硝酸鈉，放置于洗凈烘干的燒杯中溶解，移至 100 mL 容量瓶中，定容至刻度線，搖勻，貼上標(biāo)簽，備用 30%乙醇溶液 量取 16 mL 的 95%乙醇，放置于 50 mL 容量瓶中定容至刻度線，搖勻，貼上標(biāo)簽，備用 其它濃度乙醇溶液 按 30%乙醇溶液步驟配置，現(xiàn)配現(xiàn)用 實(shí)驗(yàn)儀器 TU1810 DSPC 型紫外可見分光光度計(jì) 北京普析通用儀器有限責(zé)任公司 FA1004B 電子天平 上海精密科學(xué)儀器公 司 TDL802B 型離心 機(jī) 上海安亭科學(xué)儀器制造廠 JY96II 超聲波細(xì)胞粉碎機(jī) 寧波新芝生物科技股份有限公司 實(shí)驗(yàn)方法 蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作