有機(jī)化學(xué)氨基酸蛋白質(zhì)(編輯修改稿)
2024-09-25 18:48 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 B重 復(fù) 上 述 反 應(yīng)B 多 肽脫 去 保 護(hù) 基 團(tuán)多 肽H2 ， P d氨 基 保 護(hù) 試 劑 ， 如 ：氯 甲 酸 芐 酯 、 氯 甲 酸 叔 丁 酯 等羧 基 活 化 試 劑 ， 如 ：P C l S O C l2等AB采用保護(hù)羧基，活化氨基的方法也可合成多肽。 此法操作步驟繁瑣，需經(jīng)多次分離提純，最后產(chǎn)率不高。 1965年，中國科學(xué)家首次合成牛胰島素。 (乙 ) 固相合成和組合合成 固相合成的一般方法： 交 聯(lián) 苯 乙 烯樹 脂氯 甲 基 化R C H 2 C l C H 2 A A ( 1 )RB A A ( 1 )B A A ( 2 )B( 1 ) 脫 保 護(hù) 基( 2 )逐 一 引 入 所 需 A AR C H 2 肽 鏈H 2 , P d脫 離 樹 脂多 肽R C H 2 A A ( 1 ) A A ( 2 ) B不 溶 解 ， 只 需 每 次 洗 去 雜 質(zhì) 和 剩 余 A A ，可 省 去 許 多 分 離 提 純 步 驟不 溶 解 ， 簡 化 分 離 提 純組合合成法： 參見高 P514515。 (三 ) 蛋白質(zhì) (1) 蛋白質(zhì)的組成和分類 (2) 蛋白質(zhì)的性質(zhì) (甲 ) 溶液性質(zhì) (乙 ) 鹽析 (丙 ) 兩性和等電點(diǎn) (丁 ) 變性 (戊 ) 顯色反應(yīng) (3) 蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu) (三 ) 蛋白質(zhì) 蛋白質(zhì)和多肽都是由 α－ AA組成的，它們之間沒有嚴(yán)格的區(qū)別。 一般 M＞ 1萬，叫蛋白質(zhì)； M＜ 1萬，叫多肽。 (1) 蛋白質(zhì)的組成和分類 組成元素 ： C： 50－ 55%， H： － %， O： 19－ 24%， N： 15－ 19%， S： － %， Fe、 I、 P等微量。 分類 ： 蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)復(fù)雜，只能根據(jù)形狀、組成、生理作用、溶解度分類。 根據(jù)形狀纖維蛋白球蛋白如角蛋白、膠朊蛋白水解得 和非AA物質(zhì)根據(jù)組成單純蛋白結(jié)合蛋白水解只得 aAAaAA （輔基）如：白蛋白、球蛋白如：核蛋白、色蛋白、脂蛋白等根據(jù)溶解度可溶性蛋白（如球蛋白）不可溶性蛋白（如角蛋白）根據(jù)生理作用 激素、酶、血紅蛋白等(2) 蛋白質(zhì)的性質(zhì) (甲 ) 溶液性質(zhì) 蛋白質(zhì)分子量高 ， 其溶液具有親水膠體的性質(zhì) ， 不能透過半透膜 。 據(jù)此可分離 、 提純蛋白質(zhì) 。 (乙 ) 鹽析 向蛋白質(zhì)溶液中加入無機(jī)鹽 （ 如 (NH4)2SO MgSONaCl等 ） ， 蛋白質(zhì)可從溶液中析出 。 鹽析為可逆過程 。 （ 但若蛋白質(zhì)在濃的無機(jī)鹽溶液中久置會(huì)變性 ） 不同蛋白質(zhì)鹽析時(shí)所需鹽的最低濃度不同。據(jù)此可分離蛋白質(zhì)。 (丙 ) 兩性和等電點(diǎn) 與 AA相似 ， 蛋白質(zhì)也是兩性物質(zhì)： ① 蛋白質(zhì)與強(qiáng)酸或強(qiáng)堿都能成鹽； ② 在強(qiáng)酸性介質(zhì)中 ， 蛋白質(zhì)以正離子形式存在 ， 在電場(chǎng)中向陰極運(yùn)動(dòng)； 在強(qiáng)堿性介質(zhì)中 ， 蛋白質(zhì)以負(fù)離子形式存在 ， 在電場(chǎng)中向陽極運(yùn)動(dòng) 。 ③ 調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)溶液的 pH值 ， 總會(huì)在某一 pH值下使蛋白質(zhì)以偶極離子形式存在 ， 所以蛋白質(zhì)也有等電點(diǎn) 。 ④不同蛋白質(zhì)具有不同的等電點(diǎn)，據(jù)此可分離蛋白質(zhì)。如梯度 pH電泳法。 (丁 ) 變性 蛋白質(zhì)受熱 、 紫 外 線 及 某 些 化 學(xué) 試 劑 （ 如 HNO3 、Cl3CCOOH、 苦味酸 、 單寧酸 、 重金屬鹽 Cr3+、 Hg2+、As3+等 ） 作用時(shí) ， 蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu) 、 性質(zhì)發(fā)生變化 ， 失去生理活性 。 如煮雞蛋 、 生皮鞣制等 。 蛋白質(zhì)的變性一般為不可逆的。 (戊 ) 顯色反應(yīng) A. 水合茚三酮反應(yīng) 蛋白質(zhì)溶液OOOHOH+ 藍(lán)紫色 aAA與 相似（ ）干擾： NH4+ 、稀NH3B. 縮二脲反應(yīng) NH 2 CNHCNH 2O O+ NaOH + Cu SO 4 紫色縮二脲含有多個(gè) C O N H + NaOH + Cu SO 4蛋白質(zhì)溶液 紫色含有多個(gè) C O N H C. 黃色反應(yīng) 蛋白質(zhì)溶液 + 濃HNO 3 黃色產(chǎn)物 橙色NH 3原因：NO 2含苯環(huán)的蛋白質(zhì) 黃色+ 濃HNO 3 可利用顏色反應(yīng)來鑒別蛋白質(zhì)。如臨床分析中尿蛋白的檢驗(yàn)。 (3) 蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu) 蛋白質(zhì)是最復(fù)雜的天然高分子，其結(jié)構(gòu)可用四級(jí)結(jié)構(gòu)來描述。 一級(jí)結(jié)構(gòu) —— 指 α－ AA的排列順序。 NHCHRC NHCHRC NHCHRCO O O肽平面p p 共軛(動(dòng)畫，肽平面 ) 二級(jí)結(jié)構(gòu) —— 指蛋白質(zhì)的空間構(gòu)象。 由于氫鍵的作用使肽鏈（蛋白質(zhì)）呈 α螺旋或 β折疊片結(jié)構(gòu)。 α－螺旋： 肽鏈呈右手螺旋狀 。 (動(dòng)畫 動(dòng)畫 2) 每圈 AA單位，螺距 。 β－折疊片： 肽鏈伸展在褶紙形的平面上 ，相鄰的肽鏈又通過氫鍵締合。 (動(dòng)畫 ) 很多蛋白質(zhì)常常是在分子鏈中既有 α螺旋，又有 β折疊，并且多次重復(fù)這兩種空間結(jié)構(gòu)： γ－螺旋： 肽鏈呈左手螺旋狀 。 每圈 3個(gè) AA單位，螺距 。 γ－螺旋存在于膠朊纖維中。由于脯氨酸和羥脯氨酸的環(huán)狀結(jié)構(gòu)，與其他氨基酸縮合成肽鏈后，不再存在 N－ H，不利于形成 α螺旋。 三級(jí)結(jié)構(gòu) —— 在二級(jí)結(jié)構(gòu)的基礎(chǔ)上再進(jìn)一步卷曲、褶疊、盤繞。 （多條肽鏈扭成“麻花”。） 蛋白質(zhì)的三級(jí)結(jié)構(gòu)是其他次級(jí)鍵，如－ S－ S－（二硫鍵）、離子鍵、氫鍵、疏水鍵、支鏈等，共同作用的結(jié)果。 四級(jí)結(jié)構(gòu) —— 在三級(jí)結(jié)構(gòu)的基礎(chǔ)上，各亞基再進(jìn)一步形成特定的空間結(jié)構(gòu)。 四級(jí)結(jié)構(gòu)與蛋白質(zhì)的生理活性有關(guān)。 例如，馬血紅蛋白由四個(gè)獨(dú)立的亞基組成。兩個(gè)各含 141個(gè)氨基酸殘基的 a蛋白和兩個(gè)各含146個(gè) 氨基酸 殘基的 b蛋白。 使蛋白質(zhì)亞基聚集的主要因素是疏水基團(tuán)之間的作用力。當(dāng)把各個(gè)亞基分開時(shí)，其三維形狀使極性側(cè)鏈露在外圍適應(yīng)水溶液環(huán)境，而把非極性側(cè)鏈保護(hù)在內(nèi)部避免接觸水，但是在分子表面仍有一小片疏水區(qū)與水接觸。當(dāng)兩個(gè)或更多個(gè)亞基聚集在一起時(shí)，這些疏水區(qū)互相接觸而避免與水接觸，從而維持各亞基之間的聚合。 肽平面 α 螺旋 1 α 螺旋 2 β 折疊 (四 ) 紫外光譜 (Ultra Voilet Spectroscopy) (1) 紫外光譜圖 (2) 基本原理 (3) UV圖譜的解析 (
醫(yī)療健康相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號(hào)-1