電泳技術(shù)方王楷ppt課件-wenkub
2023-05-16 18:13:56 本頁面
【正文】 徑， η為介質(zhì)粘滯系數(shù)， ν為質(zhì)點(diǎn)移動速度） ? 當(dāng)質(zhì)點(diǎn)在電場中作穩(wěn)定運(yùn)動時： F＝ f 即： QX＝ 6π rην 遷移率 u：單位電場強(qiáng)度下的電泳速度， 粒子的遷移率在一定條件下決定于粒子本身的性質(zhì)即其所帶電荷及大小和形狀。 生物分子都帶電荷 ， 其電荷的多少取決于分子性質(zhì)及其所在介質(zhì)的 pH及其組成 。 由于混合物中各組分所帶電荷性質(zhì) 、 電荷數(shù)量以及分子量的不同 ， 在同一電場的作用下 ， 各組分泳動的方向和速度也各異 。 u＝ v/E=q/6πrη v=QX /6πrη 在具體實(shí)驗(yàn)中 ， 移動速度 V為單位時間 t（ 單位為 s） 內(nèi)移動的距離 d（ 單位為 cm） ， 即 V＝ d/t。一般所用離子強(qiáng)度為 。 5. 支持介質(zhì)的篩孔 ： 篩孔越小，則顆粒在移動的過程中所受到的阻力也就越大 分 類 按 支持介質(zhì) 的不同可分為： ⑴ 紙電泳（ Paper electrophorisis） ⑵ 醋酸纖維薄膜電泳（ Cellulose Acetate electrophoresis） ⑶ 瓊脂凝膠電泳（ Agar Gel electrophoresis） ⑷ 聚丙烯酰胺凝膠電泳（ Polyacrylamide Gel electrophoresis）（ PAGE） ⑸ SDS－聚丙烯酰胺凝膠電泳（ SDS－ PAGE）。 影響因素： 1 、聚丙烯酰胺凝膠孔徑的大小 2 、緩沖系統(tǒng) 3 、離子強(qiáng)度 血 清 蛋 白 醋 酸 纖 維 薄 膜 電 泳 目的： 原 理： 血清蛋白在 ，分子大小、形狀各有差異。使蛋白固定并染色，再脫色（洗去多余染料）。 2 ） 用點(diǎn)樣器蘸血清少許（ 不能看見有液滴形成 ），按在 點(diǎn)樣處（點(diǎn)樣要與膜邊緣垂直，且大小均勻）。用濾紙吸干薄膜。 5 、 計算 總 吸 光 度 光 密度 總和 T ＝ A ＋ α 1 ＋ α 2 ＋ β ＋ γ 各 部分 蛋白 質(zhì) 的 百分?jǐn)?shù) ： 蛋白質(zhì) ％ ＝ A / T 100 ％
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