微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)報(bào)告-wenkub
2023-04-19 23:23:20 本頁(yè)面
【正文】 ，則再重新操作。油鏡是顯微鏡上最重要的部件之一，觀察時(shí)與玻片非常接近，稍不小心即可壓碎玻片，更嚴(yán)重的是損壞鏡頭，故必須極其仔細(xì)地學(xué)習(xí)油鏡的使用方法：為使低倍鏡取得最適之光源，可將低倍鏡頭調(diào)節(jié)到離載物臺(tái)約1cm的高度，將聚光器提高，光圈完全打開，然后調(diào)節(jié)電壓旋鈕至視野最合適。因此常以分辨距離來(lái)衡量顯微鏡的分辨力?？偟姆糯蟊稊?shù)是物鏡放大倍數(shù)與目鏡放大倍數(shù)的乘積。二、實(shí)驗(yàn)原理（一）光學(xué)顯微鏡的構(gòu)造微生物實(shí)驗(yàn)室中最常用的是普通光學(xué)顯微鏡，它的構(gòu)造可分為機(jī)械部分和光學(xué)部分。微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)報(bào)告實(shí)驗(yàn)一 普通光學(xué)顯微鏡的使用及細(xì)菌染色與形態(tài)觀察第一部分：顯微鏡的使用一、目的要求1．熟悉普通光學(xué)顯微鏡的構(gòu)造、油鏡的使用原理和顯微鏡的維護(hù)方法。機(jī)械部分普通復(fù)式光學(xué)顯微鏡的機(jī)械部分通常包括以下幾個(gè)部分：目鏡、鏡筒、基座回轉(zhuǎn)器、物鏡、載物臺(tái)、光圈、聚光器、光源、鏡臂、細(xì)調(diào)節(jié)器、粗調(diào)節(jié)器等。物鏡的放大倍數(shù)愈大，其工作距離（物鏡鏡頭到標(biāo)本片之間的距離）愈短，這時(shí)光圈就要打開得愈大。 R=式中：R分辨距離； λ作用光的波長(zhǎng)；。 滴一滴香柏油，固定于載物臺(tái)上，用推動(dòng)器調(diào)節(jié)到載物臺(tái)正中。 更換標(biāo)本時(shí)應(yīng)先提高油鏡頭，再更換玻片，切勿隨意移動(dòng)顯微鏡的位置。答：聚光器的位置之升降可影響視野的明亮度，上升則視野明亮，下降則光線減弱。使用不同放大倍數(shù)的物鏡時(shí)，工作距離與光圈的關(guān)系。為何要選用與玻璃折射率相似的香柏油作為油鏡的介質(zhì)？油鏡的原理是什么？答：香柏油只在使用油鏡頭時(shí)（100倍物鏡）使用，因?yàn)楫?dāng)鏡與裝片之間的介質(zhì)為空氣時(shí)，由于空氣（n= ）的折射率不同，光線會(huì)發(fā)生折射，不僅使進(jìn)入物鏡的光線減少，降低了視野的照明度，而且會(huì)減少鏡口角。暗視野顯微鏡：在普通光學(xué)顯微鏡載物臺(tái)下安裝一個(gè)暗視野聚光器即成暗視野顯微鏡。電子顯微鏡：電子顯微鏡的基本結(jié)構(gòu)和工作原理與普通光學(xué)顯微鏡非常相似，不同的是用電子流代替光線，用電磁圈代替透鏡聚焦。二、實(shí)驗(yàn)原理檢查細(xì)菌形態(tài)的主要工具是顯微鏡，可根據(jù)不同目的將細(xì)菌染色或不染色進(jìn)行鏡檢。復(fù)染色法又稱鑒別染色法，通常用二種或二種以上的染料著色，由于不同種類的細(xì)菌或同種細(xì)菌的不同組成結(jié)構(gòu)對(duì)染料有不同的反應(yīng)性而被染成不同的顏色，從而有鑒別細(xì)菌的作用。三、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容（一）染色標(biāo)本的制備及觀察復(fù)染色法（革蘭氏染色法）材料：葡萄球菌瓊脂培養(yǎng)物 1支大腸桿菌瓊脂培養(yǎng)物 1支革蘭氏染液一套：結(jié)晶紫、95%酒精、路哥氏碘液、稀釋復(fù)紅各1瓶。② 用無(wú)菌接種環(huán)取生理鹽水一滴，放在玻片中央（如被檢材料是液體，可不加生理鹽水）。⑥ 將接種環(huán)上的細(xì)菌加入玻片上之水滴內(nèi)，磨勻，涂成直徑為1cm大小的薄菌膜。目的是使細(xì)菌粘于玻片上，染色和水沖時(shí)不易脫落；且細(xì)菌為蛋白質(zhì)，被熱凝固可保持完整形態(tài)。④ 水洗。⑦ 加稀釋復(fù)紅染液，染約1分鐘。大腸桿菌為革蘭氏陰性菌，染色后呈紫紅色。答：?jiǎn)稳旧ǎ簝?yōu)點(diǎn)：僅用一種染料著色，所有的細(xì)菌均被染成一種顏色，簡(jiǎn)單方便，可用來(lái)觀察細(xì)菌的形態(tài)和排列方式。3．以革蘭氏染色法為例，說(shuō)明它至少要涉及幾種試劑？各起何作用？答：至少用到4種試劑。二、實(shí)驗(yàn)原理培養(yǎng)基是人工配制的供給細(xì)菌或其它微生物生長(zhǎng)繁殖的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)。②具有合適的酸堿度（pH值）。例如，細(xì)菌純培養(yǎng)物的分
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