【正文】 生物技術(shù)制藥概括和研究進(jìn)展216。 簡(jiǎn)述生物技術(shù)、生物藥物和生物技術(shù)藥物的概念生物技術(shù)：利用各種生命系統(tǒng)，如各種生物有機(jī)體（包括微生物和動(dòng)、植物）、其組成部分（包括器官、組織、細(xì)胞和細(xì)胞器）以及細(xì)胞內(nèi)含物（包括核酸、蛋白質(zhì)、多糖以及各種次生代謝物）來(lái)生產(chǎn)特定的生物產(chǎn)品。（The use of living systems, such as organisms, tissue cultures, live cells, or cell enzymes, to make a defined biological product）生物藥物：利用生物體內(nèi)的初級(jí)或次級(jí)代謝產(chǎn)物、生物組織或整個(gè)生物體生產(chǎn)的用于預(yù)防、診斷或治療疾病的醫(yī)用品（來(lái)源于細(xì)菌、酵母、昆蟲(chóng)、植物和哺乳動(dòng)物的活性物質(zhì)）生物技術(shù)藥物：利用DNA重組技術(shù)、單克隆抗體技術(shù)以及其他生物技術(shù)研制開(kāi)發(fā)的蛋白質(zhì)、抗體或核酸類(lèi)藥物216。 生物技術(shù)藥物的種類(lèi)及常見(jiàn)的生物技術(shù)藥物是什么?生物技術(shù)藥物可分為：重組蛋白藥物、治療性抗體、核酸藥物和其他生物技術(shù)藥物重組蛋白藥物－細(xì)胞因子類(lèi)：干擾素類(lèi)，白細(xì)胞介素類(lèi)，集落刺激因子類(lèi)，腫瘤壞死因子類(lèi)，紅細(xì)胞生成素，生長(zhǎng)因子類(lèi)－激素類(lèi)：胰島素，生長(zhǎng)激素，降鈣素，心鈉素和利鈉多肽家族－溶血栓類(lèi)：鏈激酶，尿激酶，葡激酶，組織型纖溶酶原激活劑－可溶性受體（指細(xì)胞膜受體胞外與配體結(jié)合的膜外區(qū)，由于多種原因自胞膜脫落但仍保留和配基結(jié)合能力的受體）：腫瘤壞死因子可溶性受體，白細(xì)胞介素－1可溶 性受體，白細(xì)胞介素－4可溶性受體－血液代用品：人血清白蛋白，血紅蛋白－導(dǎo)向毒素類(lèi)：細(xì)胞因子導(dǎo)向毒素，單克隆抗體導(dǎo)向毒素216。 生物技術(shù)藥物與傳統(tǒng)藥物相比有哪些重要特點(diǎn)?特點(diǎn)：分子量大，分子結(jié)構(gòu)復(fù)雜；存在種屬特異性；用量小，活性強(qiáng)，相對(duì)其他藥物副作用小、毒性低、安全性較高；不穩(wěn)定，易變性，易失活，也易被微生物污染和酶解破壞；生產(chǎn)過(guò)程中，基因、生產(chǎn)菌株或細(xì)胞系以及生產(chǎn)條件的穩(wěn)定性要求高，如發(fā)生變化將造成生物活性的變化；免疫原性：來(lái)源于動(dòng)物的藥物可在人中產(chǎn)生免疫和過(guò)敏反應(yīng)；在人體內(nèi)半衰期短，降解快，降解部位廣泛；生物技術(shù)藥物的批次間一致性和安全性的變化大于化學(xué)藥品生物技術(shù)制藥與傳統(tǒng)制藥相比的優(yōu)點(diǎn)：可使活性蛋白或多肽在各種生物反應(yīng)器中高效表達(dá)，可獲得天然來(lái)源難以得到的生理活性物質(zhì)，使之成為新藥，如人生長(zhǎng)激素，胰島素等；可獲得足夠數(shù)量的生物活性物質(zhì)以對(duì)其結(jié)構(gòu)、功能和性質(zhì)進(jìn)行深入研究，從而改造天然生理活性物質(zhì)，提高生理活性，開(kāi)發(fā)更多的新型生理活性物質(zhì)；如對(duì)白介素2和tPA的改造；通過(guò)對(duì)微生物的改造，可獲得新型化合物，擴(kuò)大藥物來(lái)源，如紅霉素衍生物的研究。216。 簡(jiǎn)述生物技術(shù)藥物研發(fā)的熱點(diǎn)?熱點(diǎn)：216。 應(yīng)用基因工程抗體抑制腫瘤，216。 應(yīng)用導(dǎo)向IL2受體的融合毒素治療腫瘤，216。 應(yīng)用基因治療法治療腫瘤，如應(yīng)用γ干擾素基因治療骨髓瘤。216。 自身免疫性疾病216。 冠心病抗體工程制藥u 簡(jiǎn)述抗體藥物的概念和特點(diǎn)。概念：通過(guò)細(xì)胞工程和（或）基因工程方法制備的用于治療的單克隆抗體、抗體片段、基因工程改造的抗體以及抗體免疫偶聯(lián)物或抗體融合蛋白稱(chēng)為抗體工程藥物，又稱(chēng)抗體藥物（抗體的概念：由抗原誘導(dǎo)的淋巴細(xì)胞合成和分泌的具有特殊氨基酸序列和結(jié)構(gòu)的免疫球蛋白分子）特點(diǎn)：特異性216。 與相關(guān)抗原的特異性結(jié)合216。 對(duì)腫瘤等靶細(xì)胞的選擇性殺傷作用 多樣性216。 抗原的多樣性216。 抗體結(jié)構(gòu)的多樣性216。 抗體活性的多樣性216。 免疫偶聯(lián)物的多樣性制備時(shí)的定向性216。 針對(duì)特定的靶分子定向制備抗體藥物216。 根據(jù)需要選擇抗體藥物的“效應(yīng)分子”u 什么是單克隆抗體？簡(jiǎn)述制備針對(duì)特異性抗原的單克隆抗體的基本過(guò)程。單克隆抗體：具有分泌抗體能力的B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合形成的雜交瘤細(xì)胞經(jīng)無(wú)性繁殖形成的細(xì)胞系分泌產(chǎn)生的活性、親和力均相同的抗體（特點(diǎn)：抗體分子在Aa序列和空間構(gòu)型上均相同，單抗具有高度的特異性，產(chǎn)生單抗的細(xì)胞系可長(zhǎng)期傳代并保存，可持續(xù)生產(chǎn)同一性質(zhì)的抗體）制備針對(duì)特異抗原的單克隆抗體：一般選4050%的PEG 進(jìn)行誘導(dǎo)（細(xì)胞融合后培養(yǎng)液中有脾脾、脾瘤、瘤瘤、脾、瘤等細(xì)胞）；常用的選擇性培養(yǎng)基為HAT培養(yǎng)基（瘤細(xì)胞是次黃嘌呤鳥(niǎo)嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶缺乏株）將經(jīng)融合的混合細(xì)胞用HAT培養(yǎng)液懸浮稀釋?zhuān)灰话阍诤酗曫B(yǎng)細(xì)胞的96孔板中進(jìn)行；在融合后7d用HAT選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)，714d用HT培養(yǎng)基培養(yǎng)，14d后用完全培養(yǎng)基培養(yǎng)；選擇培養(yǎng)后，只有雜交瘤細(xì)胞才能生存（但不是所有的雜交瘤細(xì)胞均能產(chǎn)生所需的抗體）；產(chǎn)生特定抗原的抗體的B細(xì)胞只占所有脾細(xì)胞的5％左右；用抗原對(duì)所有小孔的培養(yǎng)上清進(jìn)行抗體檢測(cè)，篩出能產(chǎn)生目的抗體的雜交瘤細(xì)胞；將能產(chǎn)生目的抗體的培養(yǎng)小孔中的雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行稀釋?zhuān)豢捎糜邢尴♂尫ê蛙洯傊ǎㄓ行♂寱r(shí)，將細(xì)胞稀釋液分加到96孔板中，使每個(gè)小孔在理論上只有一個(gè)細(xì)胞；軟瓊脂法）；培養(yǎng)后，取上清進(jìn)行抗體檢測(cè)，獲得能產(chǎn)生目的抗體的雜交瘤細(xì)胞系；大量生產(chǎn)目的單克隆抗體216。 體外培養(yǎng)法，10 μg/ml216。 動(dòng)物體內(nèi)誘生法， 520 mg/ml小結(jié)：1. 用特定的抗原免疫動(dòng)物；2. 從脾中取出B淋巴細(xì)胞，2. 骨髓瘤細(xì)胞；3. 獲得雜交瘤細(xì)胞；4. 培養(yǎng)并篩選能產(chǎn)生抗體的單個(gè)雜交瘤細(xì)胞；5. 優(yōu)化培養(yǎng)目的雜交瘤細(xì)胞；6. 純化單克隆抗體u 什么是基因工程抗體？有哪幾種基因工程抗體？各種基因工程抗體的含義是什么？人－鼠嵌合抗體：在基因水平上將鼠源性單克隆抗體的可變區(qū)和人源性抗體恒定區(qū)連接起來(lái)并在適當(dāng)?shù)乃拗骷?xì)胞中表達(dá)形成的抗體改形抗體：改形抗體又叫CDR移植抗體（CDR grafting antibody），將鼠單抗的CDR移植到人Ig分子的骨架區(qū)中換下其CDR序列而形成的抗體（具有鼠源性單克隆抗體的抗原結(jié)合特異性；抗體分子中鼠源部分只占很小的比例，可基本消除免疫原性）鑲面抗體：在人－鼠嵌合抗體的基礎(chǔ)上將來(lái)自鼠單抗可變區(qū)中決定免疫原性的暴露于抗體表面的Aa用相應(yīng)位置的人Ig的Aa代替而形成的抗體（理論基礎(chǔ)：抗體表面所暴露的Aa位置和數(shù)量都很保守，不因種屬和型別而改變；抗體表明暴露的Aa是鼠源可變區(qū)免疫源性的主要來(lái)源）小分子抗體：（優(yōu)點(diǎn)：分子質(zhì)量小，免疫原性低；易于進(jìn)入實(shí)體瘤周?chē)奈⒀h(huán)甚至進(jìn)入實(shí)體瘤的內(nèi)部；無(wú)Fc片段，不易與具有Fc受體的非靶細(xì)胞結(jié)合，用于免疫診斷時(shí)成像清晰，本底低；構(gòu)建較簡(jiǎn)單，易于操作和改造；可在細(xì)菌中表達(dá)，易于大量生產(chǎn)；可與多種效應(yīng)分子如毒素、前體藥物轉(zhuǎn)化酶等構(gòu)建多種雙功能抗體分子 缺點(diǎn)：多為單價(jià)抗體，與抗原結(jié)合活性相對(duì)較弱；半衰期短，能很快從血液中清除，從而可能影響治療底有效濃度）u 簡(jiǎn)述抗體在制藥中的重要用途和發(fā)展趨勢(shì)抗體的主要用途：216。 器官移植排斥反應(yīng)的逆轉(zhuǎn)(Orthoclone)216。 腫瘤免疫診斷，腫瘤免疫顯像，腫瘤導(dǎo)向治療216。 哮喘、牛皮癬、類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、紅斑狼瘡、急性心梗、膿毒癥、多發(fā)性硬化癥及其他自身免疫性疾病216。 分子瘤苗治療腫瘤216。 多功能抗體（雙特異抗體、三特異抗體、抗體細(xì)胞因子融合蛋白、抗體酶等）的特殊用途發(fā)展趨勢(shì)：216。 尋找新的分子靶標(biāo)