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常規(guī)培養(yǎng)基的制作(已修改)

2025-08-17 05:53 本頁面
 

【正文】 常規(guī)培養(yǎng)基制作 疾控中心 歲 源 Email: Tel: 18952936958 13656101610 : 37316315 第一節(jié) 基本理論 ? 培養(yǎng)基的定義: ? 培養(yǎng)基是按照微生物生長繁殖或積累代謝產(chǎn)物所需要的各種營養(yǎng)物質(zhì),由人工配制而成的營養(yǎng)基質(zhì),它專供微生物培養(yǎng)、分離、鑒別、研究和保存用。 ? 培養(yǎng)基的用途: ? 主要用于繁殖及分離純化細(xì)菌、傳代和保存菌種、鑒別細(xì)菌種屬、研究細(xì)菌生理及生化特性、制造菌苗、疫苗和其他微生物制劑等。 一、培養(yǎng)基的分類 ? : ? 基礎(chǔ)培養(yǎng)基、營養(yǎng)培養(yǎng)基、增菌培養(yǎng)基 、選擇性培養(yǎng)基 、鑒別培養(yǎng)基 、顯色培養(yǎng)基 ? 基礎(chǔ)培養(yǎng)基 含細(xì)菌所需最基本營養(yǎng)成分,可供大多數(shù)細(xì)菌生長。常用的如含適量蛋白胨、氯化鈉、磷酸鹽、 養(yǎng)瓊脂。 ? 營養(yǎng)培養(yǎng)基 基礎(chǔ)培養(yǎng)基再加入一些其他營養(yǎng)成分,如葡萄糖、 血液 、血清、酵母浸膏、生長因子等,以滿足營養(yǎng)要求較高的細(xì)菌生長繁殖所需要的營養(yǎng)。 ? 增菌培養(yǎng)基 多為 液體 培養(yǎng)基,主要目的是增加標(biāo)本中目的菌數(shù)量,以提高目的菌檢出率。 ? 選擇性培養(yǎng)基 在培養(yǎng)基中加入 抑制 物質(zhì),使之具有選擇性,有利于目的菌檢出和識別,而抑制其他非目的菌生長或者使其生長不佳。 加入青霉素等 抗生素 的培養(yǎng)基:分離酵母菌、霉菌等真菌 加入 高濃度 食鹽的培養(yǎng)基:分離金黃色葡萄球菌 不加氮源的無氮培養(yǎng)基:分離固氮菌 不加含碳有機(jī)物的無碳培養(yǎng)基:分離自養(yǎng)型微生物 加入氨基嘌呤、次黃嘌呤和胸腺嘧啶核苷的培養(yǎng)基:分離雜交瘤細(xì)胞 ? 鑒別培養(yǎng)基 利用各種細(xì)菌分解糖類和蛋白質(zhì)的能力及其代謝產(chǎn)物的不同,即生化反應(yīng)能力不同,在培養(yǎng)基中加入特定的作用底物和指示劑,以此來區(qū)別各種細(xì)菌。主要用于檢查各種細(xì)菌的生化反應(yīng)。 ? 如伊紅 — 美藍(lán)培養(yǎng)基可鑒別大腸桿菌,其代謝產(chǎn)物有機(jī)酸與伊紅 — 美藍(lán)結(jié)合,使菌落呈現(xiàn)綠色金屬 大腸桿菌 EMB平板 沙門氏菌 BS瓊脂 沙門氏菌 XLD(木糖賴氨酸去氧膽酸鹽)瓊脂 ? 顯色培養(yǎng)基 細(xì)菌在生長繁殖過程中可合成和釋放某些特異性酶,按酶的特性,選用相應(yīng)底物和指示劑,將其配制在相關(guān)培養(yǎng)基中。根據(jù)細(xì)菌反應(yīng)后出現(xiàn)的菌落顏色變化,確定待分離可疑菌株,有助于細(xì)菌快速診斷。 副溶血性弧菌 副溶 API 20E 液體培養(yǎng)基 流體培養(yǎng)基 半固體培養(yǎng)基 固體培養(yǎng)基 液體培養(yǎng)基:不含凝固劑,利于菌體的 快速繁殖 、代謝和積累產(chǎn)物 流體培養(yǎng)基:含 %瓊脂粉,可降低空氣中氧進(jìn)入培養(yǎng)基的速度,利于一般厭氧菌的生長繁殖 半固體培養(yǎng)基:含 %瓊脂粉,多用于細(xì)菌的 動力 觀察、菌種 傳代保存 及 貯運(yùn) 細(xì)菌標(biāo)本材料; 固體培養(yǎng)基:含 %瓊脂,用于細(xì)菌的分離、鑒定、菌種保存及細(xì)菌疫苗制備等多方面 液體培養(yǎng)基 固體培養(yǎng)基 半固體培養(yǎng)基 液體培養(yǎng)基: 主要用于工業(yè)生產(chǎn); 固體培養(yǎng)基: 主要用于分離、鑒定等; 半固體培養(yǎng)基: 主要用于觀察、保藏菌種。 ? 合成培養(yǎng)基 由化學(xué)物質(zhì)和成分已知的各種物質(zhì)所組成,可以是無機(jī)鹽和有機(jī)物質(zhì)等。 ? 天然培養(yǎng)基 由化學(xué)物質(zhì)不完全清楚或各批物質(zhì)很難一致的天然物質(zhì)所組成,如蛋白胨、牛肉膏、血液、馬鈴薯等。 ? 半合成培養(yǎng)基 由不明化學(xué)成分的天然物質(zhì)和 已知化學(xué)成分的物質(zhì)組成 天然培養(yǎng)基 化學(xué)成分不明確,主要用于工業(yè)生產(chǎn); 合成培養(yǎng)基 化學(xué)成分明確,主要用于分類、鑒定。 ? 天然培養(yǎng)基: 優(yōu)點(diǎn):取材便利、營養(yǎng)豐富、配制簡便; 缺點(diǎn):營養(yǎng)成分難以控制、實(shí)驗(yàn)結(jié)果的重復(fù)性較 差。 ? 天然培養(yǎng)基如培養(yǎng)細(xì)
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