常規(guī)培養(yǎng)基的制作-預(yù)覽頁
【正文】 含量明確、實(shí)驗(yàn)的可重復(fù)性好； ? 缺點(diǎn)：配制繁瑣、成本較高。 ? 其特點(diǎn)是易溶于水，吸水性強(qiáng)，故須干燥密封保存。由于蛋白質(zhì)來源不同，消化程度不同，制成的胨質(zhì)量相差很大。 ? 牛肉浸液是將新鮮不含脂肪、肌膜、肌腱等精牛肉浸泡煮沸制成的肉汁。 ? 為牛肉浸液經(jīng)長時(shí)間加熱，蒸發(fā)掉水分后濃縮而成的膏狀制品。其他的糖類和醇類主要用于發(fā)酵反應(yīng)以及鑒定細(xì)菌。 血平板溶血現(xiàn)象 ? 雞蛋和動物血清對一部分細(xì)菌來說是必須營養(yǎng)成分，可作為養(yǎng)料直接被細(xì)菌利用。 ? 生長因子根據(jù)化學(xué)結(jié)構(gòu)及代謝功能不同分為三大類：維生素、氨基酸和嘌呤與嘧啶。 ? 其中，有的需要量極微，如 Mn、 Cu等。 ? 蒸餾水和離子交換水不含雜質(zhì)，在制備培養(yǎng)基時(shí)，一般需使用蒸餾水和離子交換水。 ? 瓊脂在 98攝氏度以上融化，在低于 45攝氏度時(shí)則凝固成膠凍狀態(tài)。根據(jù)所要抑制選擇不同抑制劑。 ? 常用指示劑多為酸堿指示劑，如酚紅、溴甲酚紫、溴麝香草酚藍(lán)、中性紅、甲基紅、堿性復(fù)紅等，還有氧化還原指示劑，如亞甲藍(lán)。 ? （ 3） pH要適宜：各種微生物適宜生長的 pH范圍不同。由于微生物種類及代謝類型的多樣性，因而用于培養(yǎng)微生物培養(yǎng)基的種類也很多，它們的配方組成及配制方法雖各有差異 ,但一般培養(yǎng)基配制的常規(guī)程序卻大致相同，例如器皿的準(zhǔn)備，培養(yǎng)基的配制與分裝，棉塞的制作，培養(yǎng)基的滅菌，斜面與平板的制作以及培養(yǎng)基的無菌檢查等基本環(huán)節(jié)。 ? 培養(yǎng)基都是水溶液，這是因?yàn)橐磺猩锛?xì)胞都必須要有水的參與。食品檢測國標(biāo)使用虎紅培養(yǎng)基。 ? 將稱好的藥品置于一燒杯中，先加入少量水，然后加熱溶解，并不斷用玻璃棒攪動。 PH ? 一般用 pH試紙測定培養(yǎng)基 pH。 ? 注：一般將培養(yǎng)基 pH調(diào)整高出所需值的 pH單位，經(jīng)高壓滅菌后，其 pH要降低。繼續(xù)加熱至瓊脂全部融化，最后補(bǔ)足因蒸發(fā)而失去的水分。分裝時(shí)，用左手拿住空試管中部，并將漏斗下的玻璃管嘴插入試管內(nèi)，以右手拇指及食指開放彈簧夾，中指及無名指夾住玻璃嘴，使培養(yǎng)基直接流入試管內(nèi)。 ? 用于振蕩培養(yǎng)微生物時(shí)，可在 250ml錐形瓶中加入 50ml的液體培養(yǎng)基； ? 若用于制作平板培養(yǎng)基時(shí)，可在 250ml錐形瓶中加入 150ml培養(yǎng)基，然后再加入 3g瓊脂粉（按 2%計(jì)算）。 ? 制棉塞時(shí)，應(yīng)選取用大小，厚薄適中的普通棉花一塊，鋪展于左手拇指和食指扣成的圓孔中，用右手食指將棉花從中央壓入圓孔中制成棉塞，然后直接壓入試管或錐形瓶口。 ? 將裝好培養(yǎng)基并塞好棉塞或蓋好管帽的試管捆成一捆，外面包上一層牛皮紙。有時(shí)為了進(jìn)行液體振蕩培養(yǎng)加大通氣量，則可用 8層紗布代替棉塞包在瓶口上。 斜面長度不超過試管長度 1/2為宜 。 ? 平板的制作應(yīng)在酒精燈旁進(jìn)行，左手拿培養(yǎng)皿，右手拿錐形瓶的底部或試管，左手同時(shí)用小指和手掌將棉塞打開，灼瓶口。 三、實(shí)驗(yàn)材料 ? ? 牛肉膏、蛋白胨、 NaCl、酵母膏、可溶性淀粉、 KNO K2HPO MgSO4?7H2O和FeSO4?7H2O、馬鈴薯、葡萄糖、瓊脂等。 ? 藥匙、 pH試紙、稱量紙、記號筆、棉花、紗布、線繩、塑料試管蓋、牛皮紙、報(bào)紙等。將燒杯置于石棉網(wǎng)上加熱，用玻璃棒攪拌，使藥品全部融化。 ? （ 5）分裝、加塞、包扎。 ? 培養(yǎng)基的酸堿度，必須準(zhǔn)確測定，特別對含有指示劑的培養(yǎng)基；測定酸堿度須于冷卻后測定為準(zhǔn)。要注意有些培養(yǎng)基高壓滅菌的磅數(shù)不可過高，時(shí)間不可過長，否則能使培養(yǎng)基變質(zhì)。 培養(yǎng)基使用注意事項(xiàng) ? 培養(yǎng)基所用的一切玻璃器皿，必須是中性硬料，否則能影響培養(yǎng)基酸堿度。 五、思考題 ? ？培養(yǎng)放線菌常用什么培養(yǎng)基？培養(yǎng)酵母和霉菌常用什么培養(yǎng)基？現(xiàn)行國家標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)基。 ? ? 在干燥吸管的上端約 ，塞入一小段 1，目的是避免將外界或嘴中雜菌吹入罐內(nèi)，或不慎將菌液吸出館外。包好的多支吸管可再用一張大報(bào)紙包成一捆滅菌。 謝謝！
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