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常規(guī)培養(yǎng)基的制作(更新版)

  

【正文】 細(xì)菌 pH為: ; ? 放線菌 pH為: ; ? 真菌 pH為: 。 ? 常用抑制劑有膽鹽、煌綠、玫瑰紅酸、亞硫酸鈉、四硫磺酸鹽、疊氮鈉及一些染料和某些抗生素等。 ? 無(wú)蒸餾水可以用自來(lái)水代替,因其中含有某些微量元素,有利于細(xì)菌生長(zhǎng),但應(yīng)先煮沸使部分鹽類沉淀,過(guò)濾澄清后再使用。 ? 細(xì)菌對(duì)這些物質(zhì)需要量不大,但如缺少,某些細(xì)菌就不能生長(zhǎng)。 ? 糖不耐熱,過(guò)久的高熱會(huì)被破壞,在堿性及與氮源一起高溫情況下,破壞更快,制備這類培養(yǎng)基時(shí),通常不用高溫,并與培養(yǎng)基中其他成分分別滅菌。 ? 包括兩類浸出物。 ? 此外,蛋白胨受高熱不凝固,遇酸不沉淀,在培養(yǎng)基中具緩沖作用,并含有各種游離氨基酸,易被細(xì)菌所利用。 ? 半合成培養(yǎng)基 由不明化學(xué)成分的天然物質(zhì)和 已知化學(xué)成分的物質(zhì)組成 天然培養(yǎng)基 化學(xué)成分不明確,主要用于工業(yè)生產(chǎn); 合成培養(yǎng)基 化學(xué)成分明確,主要用于分類、鑒定。 ? 選擇性培養(yǎng)基 在培養(yǎng)基中加入 抑制 物質(zhì),使之具有選擇性,有利于目的菌檢出和識(shí)別,而抑制其他非目的菌生長(zhǎng)或者使其生長(zhǎng)不佳。 ? 培養(yǎng)基的用途: ? 主要用于繁殖及分離純化細(xì)菌、傳代和保存菌種、鑒別細(xì)菌種屬、研究細(xì)菌生理及生化特性、制造菌苗、疫苗和其他微生物制劑等。 ? 如伊紅 — 美藍(lán)培養(yǎng)基可鑒別大腸桿菌,其代謝產(chǎn)物有機(jī)酸與伊紅 — 美藍(lán)結(jié)合,使菌落呈現(xiàn)綠色金屬 大腸桿菌 EMB平板 沙門氏菌 BS瓊脂 沙門氏菌 XLD(木糖賴氨酸去氧膽酸鹽)瓊脂 ? 顯色培養(yǎng)基 細(xì)菌在生長(zhǎng)繁殖過(guò)程中可合成和釋放某些特異性酶,按酶的特性,選用相應(yīng)底物和指示劑,將其配制在相關(guān)培養(yǎng)基中。 ? 合成培養(yǎng)基 : ? 優(yōu)點(diǎn):化學(xué)成分及其含量明確、實(shí)驗(yàn)的可重復(fù)性好; ? 缺點(diǎn):配制繁瑣、成本較高。由于蛋白質(zhì)來(lái)源不同,消化程度不同,制成的胨質(zhì)量相差很大。 ? 為牛肉浸液經(jīng)長(zhǎng)時(shí)間加熱,蒸發(fā)掉水分后濃縮而成的膏狀制品。 血平板溶血現(xiàn)象 ? 雞蛋和動(dòng)物血清對(duì)一部分細(xì)菌來(lái)說(shuō)是必須營(yíng)養(yǎng)成分,可作為養(yǎng)料直接被細(xì)菌利用。 ? 其中,有的需要量極微,如 Mn、 Cu等。 ? 瓊脂在 98攝氏度以上融化,在低于 45攝氏度時(shí)則凝固成膠凍狀態(tài)。 ? 常用指示劑多為酸堿指示劑,如酚紅、溴甲酚紫、溴麝香草酚藍(lán)、中性紅、甲基紅、堿性復(fù)紅等,還有氧化還原指示劑,如亞甲藍(lán)。由于微生物種類及代謝類型的多樣性,因而用于培養(yǎng)微生物培養(yǎng)基的種類也很多,它們的配方組成及配制方法雖各有差異 ,但一般培養(yǎng)基配制的常規(guī)程序卻大致相同,例如器皿的準(zhǔn)備,培養(yǎng)基的配制與分裝,棉塞的制作,培養(yǎng)基的滅菌,斜面與平板的制作以及培養(yǎng)基的無(wú)菌檢查等基本環(huán)節(jié)。食品檢測(cè)國(guó)標(biāo)使用虎紅培養(yǎng)基。 PH ? 一般用 pH試紙測(cè)定培養(yǎng)基 pH。繼續(xù)加熱至瓊脂全部融化,最后補(bǔ)足因蒸發(fā)而失去的水分。 ? 用于振蕩培養(yǎng)微生物時(shí),可在 250ml錐形瓶中加入 50ml的液體培養(yǎng)基; ? 若用于制作平板培養(yǎng)基時(shí),可在 250ml錐形瓶中加入 150ml培養(yǎng)基,然后再加入 3g瓊脂粉(按 2%計(jì)算)。 ? 將裝好培養(yǎng)基并塞好棉塞或蓋好管帽的試管捆成一捆,外面包上一層牛皮紙。 斜面長(zhǎng)度不超過(guò)試管長(zhǎng)度 1/2為宜 。 三、實(shí)驗(yàn)材料 ? ? 牛肉膏、蛋白胨、 NaCl、酵母膏、可溶性淀粉、 KNO K2HPO MgSO4?7H2O和FeSO4?7H2O、馬鈴薯、葡萄糖、瓊脂等。將燒杯置于石棉網(wǎng)上加熱,用玻璃棒攪拌,使藥品全部融化。 ? 培養(yǎng)基的酸堿度,必須準(zhǔn)確測(cè)定,特別對(duì)含有指示劑的培養(yǎng)基;測(cè)定酸堿度須于冷卻后測(cè)定為準(zhǔn)。 培養(yǎng)基使用注意事項(xiàng) ? 培養(yǎng)基所用的一切玻璃器皿,必須是中性硬料,否則能影響培養(yǎng)基酸堿度。 ? ? 在干燥吸管的上端約 ,塞入一小段 1,目的是避免將外界或嘴中雜菌吹入罐內(nèi),或不慎將菌液吸出館外。 謝謝!
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