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正文內(nèi)容

常規(guī)培養(yǎng)基的制作(留存版)

2024-09-13 05:53上一頁面

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【正文】 主要用于工業(yè)生產(chǎn); 固體培養(yǎng)基: 主要用于分離、鑒定等; 半固體培養(yǎng)基: 主要用于觀察、保藏菌種。其缺點是含某些氨基酸較少。 ? 此外雞蛋和血清還具有凝固劑作用,便于觀察細菌菌落形態(tài)和生長情況。 ? 抑制劑和指示劑是由于選擇、鑒定和判斷結(jié)果的需要而加入到培養(yǎng)基中的物質(zhì),并不為細菌生長繁殖所需。其主要成分是牛肉膏、蛋白胨和 NaCl。 ? 注意:調(diào)節(jié) pH時,應逐漸加入 NaOH或 HCl溶液,防止局部過酸或過堿,破壞培養(yǎng)基中成分。 、錐形瓶的包扎 ? 為了培養(yǎng)好氧性微生物,需提供優(yōu)良通氣條件,同時為防止雜菌污染,則必須對通入試管或錐形瓶內(nèi)空氣先進行過濾,除菌。 1. 葡萄糖:乳糖= 1: 9 2. 下黃上不黃 為分解葡萄糖 , 不分解乳糖 3. 上下均黃 為分解葡萄糖 、 乳糖 4. 上下均不黃 為非發(fā)酵菌 5. 中間變?yōu)楹谏珵楫a(chǎn)H2S ? 將裝在錐形瓶或試管中已滅菌的瓊脂培養(yǎng)基融化后,冷卻至 50攝氏度左右傾入無菌培養(yǎng)皿中。 ? ( 3)定容 將溶液倒入量筒中,補充水量至所需體積。 含銅大于,細菌不易生長;含鐵大于 細菌產(chǎn)生毒素。 ? ? 試管塞上棉花塞,三角瓶塞上棉花塞或“通氣式”紗布塞(用 8層紗布代替棉花制成的塞子),目的是提供通氣條件和防止雜菌污染,外用牛皮紙或 2層舊報紙與細線扎好。 ? 制備的培養(yǎng)基不宜保存過久,以少量勤做為宜。然后加入少量蒸餾水于小燒杯中,加熱融化。 ? 下一章節(jié)詳述。 ? 裝入試管培養(yǎng)基的量,視試管大小及需要而定。 ? 待全部藥品溶解后,倒入一量筒中,加水至所需體積。 第二節(jié) 實驗內(nèi)容 一、實驗目的 ? 掌握在真菌、細菌、放線菌分離培養(yǎng)工作中常用的合成和半合成培養(yǎng)基配制的一般原理、方法、程序、環(huán)節(jié)及要求和注意事項。 ? 配制固體培養(yǎng)基的凝固物質(zhì)有瓊脂、明膠和蛋白、血清等,最常用瓊脂,特殊目的也可用明膠等。 ? 培養(yǎng)基中加入血液,可增加蛋白質(zhì)、多種氨基酸、糖類、無機鹽等營養(yǎng)成分,同時還能提供輔酶、血紅素等特殊生長因子,供某些對營養(yǎng)要求高的細菌生長繁殖之用。 ? 蛋白胨是動物或植物蛋白質(zhì)經(jīng)酶或酸堿分解而產(chǎn)生的中間產(chǎn)物。 加入青霉素等 抗生素 的培養(yǎng)基:分離酵母菌、霉菌等真菌 加入 高濃度 食鹽的培養(yǎng)基:分離金黃色葡萄球菌 不加氮源的無氮培養(yǎng)基:分離固氮菌 不加含碳有機物的無碳培養(yǎng)基:分離自養(yǎng)型微生物 加入氨基嘌呤、次黃嘌呤和胸腺嘧啶核苷的培養(yǎng)基:分離雜交瘤細胞 ? 鑒別培養(yǎng)基 利用各種細菌分解糖類和蛋白質(zhì)的能力及其代謝產(chǎn)物的不同,即生化反應能力不同,在培養(yǎng)基中加入特定的作用底物和指示劑,以此來區(qū)別各種細菌。主要用于檢查各種細菌的生化反應。 ? 蛋白質(zhì)消化越徹底,含氨基酸越多,越有利于細菌生長繁殖。 ? 此外,含血液的培養(yǎng)基還可以用于觀察細菌溶血反應,作為細菌鑒定的一項指標。 ? 瓊脂是從石花菜等海藻中提取出來的一種膠狀物質(zhì),屬多糖類,一般不被細菌分解利用,無營養(yǎng)價值。 二、實驗原理 ? 培養(yǎng)基的配制是進行微生物學實驗工作的重要基礎(chǔ)。 ? 問:如某種藥品用量太少如何稱量? ? 答:可先配置成較濃溶液,然后按比例吸收一定體積溶液,加入到培養(yǎng)基中。若所用試管大小為 15*150mm時,液體培養(yǎng)基可分裝至試管高度 1/4左右為宜; ? 如分裝固體或半固體培養(yǎng)基時,瓊脂完全融化后,應趁熱分裝于試管中。 ? ? 將已滅菌裝有瓊脂培養(yǎng)基的試管,趁熱傾斜固定,凝固后即成斜面。倒入上述燒杯中。平板及少量分裝的試管培養(yǎng)基均宜保存于 4℃ 冰箱內(nèi)。試管可以多支扎成一捆滅菌。 ? 配制培養(yǎng)基的容器,不宜用銅或鐵。 ? ( 2)調(diào) Ph 待溶液冷卻至室溫時,用1mol/lNaOH溶液調(diào) pH至 。如制
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