常規(guī)培養(yǎng)基的制作(文件)
【正文】 于培養(yǎng)酵母菌和霉菌，為半合成培養(yǎng)基。 ? 注意：染料、指示劑、膽鹽等物質(zhì)何時加入？調(diào)整 pH后。 ? 問：如某種藥品用量太少如何稱量？ ? 答：可先配置成較濃溶液，然后按比例吸收一定體積溶液，加入到培養(yǎng)基中。邊加邊攪拌，并不時用 pH試紙測試，直至達(dá)到所需 pH為止。 ? 配制固體培養(yǎng)基時，應(yīng)將已配好的液體培養(yǎng)基加熱煮沸，再將稱好的瓊脂加入，并用玻棒不斷攪拌，以免糊底燒焦。 ? 取一個玻璃漏斗，裝在鐵架上，漏斗下連一根橡皮管，橡皮管下端再與玻璃管相接，橡皮管的中部加一彈簧夾。若所用試管大小為 15*150mm時，液體培養(yǎng)基可分裝至試管高度 1/4左右為宜； ? 如分裝固體或半固體培養(yǎng)基時，瓊脂完全融化后，應(yīng)趁熱分裝于試管中。通常方法是在試管及錐形瓶口加上棉花塞等。 ? 棉塞的 2/3在試管內(nèi)， 1/3在試管外。 ? 通常在棉塞外包上一層紗布，再塞在瓶口上。 ? ? 將已滅菌裝有瓊脂培養(yǎng)基的試管，趁熱傾斜固定，凝固后即成斜面。 ? 溫度過高時，皿蓋上冷凝水太多，溫度低于 50攝氏度，培養(yǎng)基易于凝固而無法制作平板。使培養(yǎng)基均勻分布于整個平皿中，冷凝后即成平板。 ? 移液管、試管、量筒、錐形瓶、培養(yǎng)皿、玻璃漏斗等。倒入上述燒杯中。 ? （ 4）加瓊脂 加入所需量的瓊脂，加熱融化，補(bǔ)充失水。 ? 配制培養(yǎng)基時各種成分應(yīng)準(zhǔn)確稱量。 培養(yǎng)基使用注意事項(xiàng) ? 培養(yǎng)基必須達(dá)到完全無菌的目的。平板及少量分裝的試管培養(yǎng)基均宜保存于 4℃ 冰箱內(nèi)。 ? 培養(yǎng)基分裝時不宜超過容器的 2/3，以免滅菌時溢出。或者不用紙包扎，直接放入特制的金屬（不銹鋼或鐵皮）筒內(nèi)，加蓋干熱滅菌。上端多余的紙條打一小結(jié)。試管可以多支扎成一捆滅菌。 ? 干熱滅菌時，吸管可不用報(bào)紙包扎，直接放入不銹鋼筒內(nèi)，只需尖端朝筒底。棉花松緊要合適，若過緊，吹吸液體太費(fèi)力；過松，吹氣時棉花則會下滑。 ? ？ ? pH？為什么在配制培養(yǎng)基時經(jīng)常需要調(diào)節(jié) pH？ 第三節(jié) 玻璃器皿的包扎 ? ? 培養(yǎng)皿常用牛皮紙或舊報(bào)紙包緊，一般以 58套培養(yǎng)皿包成 1包。 ? 配制培養(yǎng)基的容器，不宜用銅或鐵。如乳糖高壓滅菌磅數(shù)過高，可能分解為葡萄糖。 ? 制備的培養(yǎng)基必須保持澄清，以便細(xì)菌生長后，容易觀察。 ? （ 6）高壓蒸汽滅菌 20min。 ? （ 2）調(diào) Ph 待溶液冷卻至室溫時，用1mol/lNaOH溶液調(diào) pH至 。 四、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容 ? ? ? 牛肉膏 5g ? 蛋白胨 10g ? NaCl 5g ? 瓊脂 1520g ? 水 1000ml ? Ph ? （ 1）稱量及融化 ? 分別稱取蛋白胨和 NaCl的所需量，置于燒杯中，加入所需水量的 2/3左右的蒸餾水，用玻璃棒挑取牛肉膏置于另一燒杯中，進(jìn)行稱量。 ? 1mol/LNaOH、 1mol/LHCl。 ? 用左手大拇指將培養(yǎng)皿蓋打開一縫。如制作半固體或固體深層培養(yǎng)基時，滅菌后則應(yīng)垂直放置至冷凝。在裝好培養(yǎng)基并塞好棉塞或包上 8層紗布或蓋好培養(yǎng)容器封口膜的錐形瓶口上，再包上一層牛皮紙并用線捆好，滅菌待用。用鉛筆注明培養(yǎng)基名稱及配制日期。 ? 也可借用玻璃棒塞入，也可用折疊法制作棉塞。滅菌時瓶中瓊脂粉同時被融化。 ? 注：分裝在不同規(guī)格三角燒瓶、試管等容器中，分裝量不宜超過容器的 2/3，否則會溢出 。 ? 根據(jù)不同需要，可將已配好的培養(yǎng)基分裝入試管或錐形瓶內(nèi)，分裝時注意不要使培養(yǎng)基沾污管口或瓶口，造成污染。 ? 用濾紙或多層紗布過濾培養(yǎng)基。
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