《培養(yǎng)基及制備》ppt課件(文件)
【正文】 表 葡萄糖聚合度 與碘液呈色 最高吸收波長（ nm) 7~8 無色 16 淡紅色 480 21 紅色 510 28 紅紫色 540 34 紫色 560 41 蘭紫色 580 61 蘭色 600 120 蘭色 620 330 蘭色 630 糖化的過程檢測 ? 檢驗液化：是否有淀粉，用碘液，是否呈蘭色； ? 檢驗糖化：是否水解完全 ? 測定還原糖； ? 用無水酒精。） ? 分解反應 （葡萄糖分解為羥甲基糠醛，有機酸和有色物質(zhì)等非糖產(chǎn)物） 淀粉的水解反應過程 ? 淀粉分子內(nèi) α1， 4和 α1， 6葡萄糖苷鍵的斷裂，相對分子質(zhì)量逐漸變小，依次變?yōu)楹?，低聚糖，麥芽糖和葡萄糖。包括無機酸和酶。 ? 溶解或液化 ： 淀粉糊化后，如果提高溫度至 130℃ ，由于支鏈淀粉的全部（幾乎）溶解，網(wǎng)狀結構徹底破壞，淀粉溶液的粘度迅速下降，變?yōu)榱鲃有暂^好的醪液，這種現(xiàn)象稱為 淀粉的 溶解或液化 。 ㈡ 、培養(yǎng)基設計的步驟 ① 根據(jù)前人的經(jīng)驗和培養(yǎng)基成分確定時一些必須考慮 的問題，初步確定可能的培養(yǎng)基成分； ② 通過單因子實驗最終確定出最為適宜的培養(yǎng)基成分； ㈢ 、實驗設計 ? 培養(yǎng)基成分的含量最終都是通過實驗獲得的 ? 合理的實驗方法 均勻設計、正交實驗設計、響應面分析 ?多因子實驗 原培養(yǎng)基 : ? 初步確定可能的培養(yǎng)基成分 (以碳源為例 ) 碳源 Y11 碳源 Y11 葡萄糖 ++ 檸檬酸鈉 +++ 果糖 + 蘋果酸鈉 ++ 蔗糖 +++ 酒石酸 ++ 木糖 ++ 丁二酸鈉 +++ 乙醇 ++ 淀粉 +++ 丙三醇 ++ 琥珀酸鈉 ++ 乙酸鈉 +++ Y11菌株對碳源的利用能力 ? 通過單因子實驗確定適宜的培養(yǎng)基成分 (以碳源為例 ) 考慮到成本：乙酸鈉是較為合適的碳源 進一步：通過單因素試驗確定乙酸鈉的濃度 %比較好 結果： 碳源：乙酸鈉 0. 2% 氮源：氯化銨 % 酵母膏 % 無機鹽 : 復合無機鹽 % ? 正交設計確定優(yōu)化的配方 水平 因 素 A（乙酸鈉） /% B（ NH4Cl） /% C（酵母膏） /% D（無機鹽） /% 1 2 3 正交分析表 改進后培養(yǎng)基 原培養(yǎng)基 改進后培養(yǎng)基的發(fā)酵結果 表 31 Plackett–Burman設計篩選影響 Y21生長的關鍵培養(yǎng)基組分 表 32 Plackett–Burman設計 12次試驗確定 9種變量的影響 用 SAS軟件分析試驗結果 用 SAS軟件分析試驗結果 ? 當 P值小于 ，為影響顯著因素，通過表可以看出 X1蔗糖， X2蛋白胨， X3酵母膏， X8磷酸二氫鉀， X9硫酸鎂 的值均小于 ，其數(shù)據(jù)的 R2檢驗為 %，表明可信度為 %。 ? 特點 ? C、 N源不宜多，否則只長菌絲，少長或不長孢子； ? 無機鹽濃度要適當控制，否則會影響孢子的顏色和孢子量。 抑制劑 （ inhibitor） ： 在發(fā)酵過程中能產(chǎn)生抑制作用的物質(zhì) 在發(fā)酵過程中加入某些抑制劑會抑制某些代謝途徑的進行，同時會使另一個代謝途徑活躍，從而獲得人們所需的某種產(chǎn)物或使正常代謝的某一中間物積累起來。 巴比妥鹽 能使利福霉素單位增加，并能使鏈霉素生產(chǎn)菌自溶推遲，延長產(chǎn)物的分泌期。有些菌體還有將前體氧化分解的能力。 有機氮源是這些生長因子的重要來源，多數(shù)有機氮源含有較多的 B族維生素和微量元素及一些微生物生長不可缺少的生長因子 作用 ： 提供微生物重要化學物質(zhì)、輔助因子（輔酶和輔基）的組分和參與代謝 前體 指某些化合物加入到發(fā)酵培養(yǎng)基中 ， 能直接被微生物在生物合成過程中合成
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