微生物綜合實驗報告(已修改)
2025-02-20 07:23 本頁面
【正文】 實驗報告 黃河水利職業(yè)技術(shù)學院 微生物綜合 實驗 報告 姓名：楊延景 班級：食品 1101 學號： 2021040632 指導老師：郭永 實驗報告 黃河水利職業(yè)技術(shù)學院 2 目錄 項目一 食品中菌落總數(shù)的測定 （一） 前言 ………………………………………………………… 3 （二） 實驗目的 …………………………………………………… .3 （三） 實驗原理 ………………………………………………… . 3 （四） 實驗器材 ……………………………………………… …… 3 （五） 實驗步驟 …………………………………………………… 4 （六） 實驗結(jié)果以及分析 ……………………………………… 7 （七） 國標中微生物菌落總數(shù)標注 ......................7 項目二 大腸菌群的測定 （八） 實驗目的…………………………………………………… 9 （九） 實驗原理……………………………………………… 9 （十） 實驗器材…………………………………………………… 9 （十一） 實驗步驟…………………………………………………… 10 （十二） 實驗結(jié)果以及分析… ……………………………………… 15 項目三 革蘭氏染色 （一） 實驗器 材 …………………………………………………… 18 （二） 實驗步驟 …………………………………………………… 18 （三） 實驗結(jié)果 …………………………………………………… 18 四 實驗感想 實驗報告 黃河水利職業(yè)技術(shù)學院 3 項目一 食品中菌落總數(shù)的測定 前言 隨著生活人們生活水平的提高，和社會的發(fā)展與進步食品安全問題越來越受到人們的關注，然而食品方面的問題這幾年也越來越突出，食品安全問題屢見不鮮。由前幾年的“蘇丹紅 紅心鴨蛋”再到這幾年的“三聚氰胺奶粉事件”和“瘦肉精事件”還有“地溝油”等等一系列的事件都不得不讓人們對食品安全 問題高度關注。然而食品中微生物的菌落總數(shù)是用來判定食品被細菌污染的程度即清潔狀態(tài)及其安全質(zhì)量，它反映食品在生產(chǎn)過程中是否符合國家食品安全標準要求，以便對被檢樣品做出適當?shù)氖称钒踩u價。然而微生物的檢測主要依靠菌落總數(shù)(colony count)的測定，菌落總數(shù)的測定是指食品檢樣經(jīng)過處理，在一定的條件下 (樣品處理、培養(yǎng)基成分、培養(yǎng)溫度和時間、 pH、需氧條件 )培養(yǎng)后，所得到的每單位食品 (1g、 1mL 或 1cm2)中所含細菌菌落的總數(shù)。所以說通過這些實驗讓我們更好的掌握菌落總數(shù)的測定一方面要求和配置； .掌握我國食品 安全標準中微生物檢驗指標及意義； .掌握常見各類食品微生物檢驗采樣方法； .掌握食品微生物檢驗各項指標檢驗方法和技能；在我們以后的日常工作和學習中更好的為人們服務。 實訓一 食品中菌落總數(shù)的測定 一、實驗目的 食品中菌落總數(shù)的原理和基本方法，以判別食品的質(zhì)量； 。 二、 實驗說明 實驗報告 黃河水利職業(yè)技術(shù)學院 4 菌落總數(shù)是指食品檢樣經(jīng)過處理，在一定條件下培養(yǎng)后，所得 1g 或 1mL 檢樣中所含細菌菌落總數(shù)。菌落總數(shù)主要作為判別食品被污染程度的標志，也可以應用這一方 法觀察細菌在食品中繁殖的動態(tài)，以便對被檢樣品進行食品安全與質(zhì)量評價時提供依據(jù)。 三、實驗器材 1．培養(yǎng)基：平板計數(shù)瓊脂培養(yǎng)基，磷酸鹽緩沖液，無菌生理鹽水。 2．儀器用具：恒溫培養(yǎng)箱（ 36℃）、恒溫水浴鍋、酒精燈、試管架、無菌培養(yǎng)皿、無菌移液管（ 10mL 和 1mL）、無菌不銹鋼勺、酒精燈。 四、操作步驟 檢樣25g （ mL ）樣品 + 2 2 5 m L 稀釋液，均質(zhì)10 倍系列稀釋選擇 2 個～ 3 個適宜稀釋度的樣品勻液，各取 1 m L 分別加入無菌培養(yǎng)皿內(nèi)每皿中加入 1 5 m L ～ 2 0 m L平板計數(shù)瓊脂培養(yǎng)基，混勻培養(yǎng)計數(shù)各平板菌落數(shù)計數(shù)菌落總數(shù)報告 圖 91 食品中菌落總數(shù)的測定 1．取樣、稀釋 （ 1）以無菌操作，取檢樣 25g（或 25mL）剪碎放于含有 225mL 滅菌生理鹽實驗報告 黃河水利職業(yè)技術(shù)學院 5 水或磷酸鹽緩沖液的滅菌玻璃瓶內(nèi)（瓶內(nèi)預置適量的玻璃珠）或滅菌乳缽內(nèi)，經(jīng)充分振搖 或研磨制成 1:10 的均勻稀釋液。固體檢樣在加入稀釋液后，最好置滅菌均質(zhì)器中以 8000～ 10000r/min 的速度處理 1min，制成 1:10 的均勻稀釋液。 （ 2）用 1mL 滅菌吸管吸取 1:10 稀釋液 1mL，沿管壁徐徐注入含有 9mL 滅菌生理鹽水或磷酸鹽緩沖液的試管內(nèi)，振搖試管混合均勻，制成 1:100 的稀釋液。 （ 3）另取 1mL 滅菌吸管，按上項操作順序，制 10 倍遞增稀釋液，如此再遞增稀釋一次。 （ 4）根據(jù)對樣品污染情況的估計選擇 2～ 3 個適宜稀釋度，分別在制作 10倍遞增稀釋的同時，以吸取該稀釋度的吸管移取 1mL 稀釋液于滅菌平皿中，每個稀釋度做兩個平皿。同時，分別吸取 1mL 空白稀釋液加入兩個無菌平皿內(nèi)作空白對照。 （ 5）及時將 15～ 20mL冷卻至 46℃的平板計數(shù)瓊脂培養(yǎng)基（可放置于 46177。 1℃恒溫水浴箱中保溫）傾注平皿，并轉(zhuǎn)動平皿使其混合均勻。 2．培養(yǎng) （ 1）待瓊脂凝固后，翻轉(zhuǎn)平板，置 36177。 1℃溫箱內(nèi)培養(yǎng) 48177。 2h，水產(chǎn)品 30177。 1℃培養(yǎng) 72177。 3h。 （ 2）如果樣品中可能含有在瓊脂培養(yǎng)基表面彌漫生長的菌落時，可在凝固后的瓊脂表面覆蓋一薄層瓊脂培養(yǎng)基（約 4mL），凝固后翻轉(zhuǎn)平板，按上述條件進行培養(yǎng)。 可 用肉眼觀察，必要時用放大鏡或菌落計數(shù)器，記錄稀釋倍數(shù)和相應的菌落數(shù)量。菌落計數(shù)以菌落形成單位（ colonyforming units， cfu）表示。 3．菌落計數(shù) （ 1）選取菌落數(shù)在 30～
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