微生物綜合實(shí)驗(yàn)報(bào)告(已修改)
2025-02-20 07:23 本頁(yè)面
【正文】 實(shí)驗(yàn)報(bào)告 黃河水利職業(yè)技術(shù)學(xué)院 微生物綜合 實(shí)驗(yàn) 報(bào)告 姓名：楊延景 班級(jí)：食品 1101 學(xué)號(hào)： 2021040632 指導(dǎo)老師：郭永 實(shí)驗(yàn)報(bào)告 黃河水利職業(yè)技術(shù)學(xué)院 2 目錄 項(xiàng)目一 食品中菌落總數(shù)的測(cè)定 （一） 前言 ………………………………………………………… 3 （二） 實(shí)驗(yàn)?zāi)康?…………………………………………………… .3 （三） 實(shí)驗(yàn)原理 ………………………………………………… . 3 （四） 實(shí)驗(yàn)器材 ……………………………………………… …… 3 （五） 實(shí)驗(yàn)步驟 …………………………………………………… 4 （六） 實(shí)驗(yàn)結(jié)果以及分析 ……………………………………… 7 （七） 國(guó)標(biāo)中微生物菌落總數(shù)標(biāo)注 ......................7 項(xiàng)目二 大腸菌群的測(cè)定 （八） 實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹?9 （九） 實(shí)驗(yàn)原理……………………………………………… 9 （十） 實(shí)驗(yàn)器材…………………………………………………… 9 （十一） 實(shí)驗(yàn)步驟…………………………………………………… 10 （十二） 實(shí)驗(yàn)結(jié)果以及分析… ……………………………………… 15 項(xiàng)目三 革蘭氏染色 （一） 實(shí)驗(yàn)器 材 …………………………………………………… 18 （二） 實(shí)驗(yàn)步驟 …………………………………………………… 18 （三） 實(shí)驗(yàn)結(jié)果 …………………………………………………… 18 四 實(shí)驗(yàn)感想 實(shí)驗(yàn)報(bào)告 黃河水利職業(yè)技術(shù)學(xué)院 3 項(xiàng)目一 食品中菌落總數(shù)的測(cè)定 前言 隨著生活人們生活水平的提高，和社會(huì)的發(fā)展與進(jìn)步食品安全問(wèn)題越來(lái)越受到人們的關(guān)注，然而食品方面的問(wèn)題這幾年也越來(lái)越突出，食品安全問(wèn)題屢見(jiàn)不鮮。由前幾年的“蘇丹紅 紅心鴨蛋”再到這幾年的“三聚氰胺奶粉事件”和“瘦肉精事件”還有“地溝油”等等一系列的事件都不得不讓人們對(duì)食品安全 問(wèn)題高度關(guān)注。然而食品中微生物的菌落總數(shù)是用來(lái)判定食品被細(xì)菌污染的程度即清潔狀態(tài)及其安全質(zhì)量，它反映食品在生產(chǎn)過(guò)程中是否符合國(guó)家食品安全標(biāo)準(zhǔn)要求，以便對(duì)被檢樣品做出適當(dāng)?shù)氖称钒踩u(píng)價(jià)。然而微生物的檢測(cè)主要依靠菌落總數(shù)(colony count)的測(cè)定，菌落總數(shù)的測(cè)定是指食品檢樣經(jīng)過(guò)處理，在一定的條件下 (樣品處理、培養(yǎng)基成分、培養(yǎng)溫度和時(shí)間、 pH、需氧條件 )培養(yǎng)后，所得到的每單位食品 (1g、 1mL 或 1cm2)中所含細(xì)菌菌落的總數(shù)。所以說(shuō)通過(guò)這些實(shí)驗(yàn)讓我們更好的掌握菌落總數(shù)的測(cè)定一方面要求和配置； .掌握我國(guó)食品 安全標(biāo)準(zhǔn)中微生物檢驗(yàn)指標(biāo)及意義； .掌握常見(jiàn)各類食品微生物檢驗(yàn)采樣方法； .掌握食品微生物檢驗(yàn)各項(xiàng)指標(biāo)檢驗(yàn)方法和技能；在我們以后的日常工作和學(xué)習(xí)中更好的為人們服務(wù)。 實(shí)訓(xùn)一 食品中菌落總數(shù)的測(cè)定 一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康? 食品中菌落總數(shù)的原理和基本方法，以判別食品的質(zhì)量； 。 二、 實(shí)驗(yàn)說(shuō)明 實(shí)驗(yàn)報(bào)告 黃河水利職業(yè)技術(shù)學(xué)院 4 菌落總數(shù)是指食品檢樣經(jīng)過(guò)處理，在一定條件下培養(yǎng)后，所得 1g 或 1mL 檢樣中所含細(xì)菌菌落總數(shù)。菌落總數(shù)主要作為判別食品被污染程度的標(biāo)志，也可以應(yīng)用這一方 法觀察細(xì)菌在食品中繁殖的動(dòng)態(tài)，以便對(duì)被檢樣品進(jìn)行食品安全與質(zhì)量評(píng)價(jià)時(shí)提供依據(jù)。 三、實(shí)驗(yàn)器材 1．培養(yǎng)基：平板計(jì)數(shù)瓊脂培養(yǎng)基，磷酸鹽緩沖液，無(wú)菌生理鹽水。 2．儀器用具：恒溫培養(yǎng)箱（ 36℃）、恒溫水浴鍋、酒精燈、試管架、無(wú)菌培養(yǎng)皿、無(wú)菌移液管（ 10mL 和 1mL）、無(wú)菌不銹鋼勺、酒精燈。 四、操作步驟 檢樣25g （ mL ）樣品 + 2 2 5 m L 稀釋液，均質(zhì)10 倍系列稀釋選擇 2 個(gè)～ 3 個(gè)適宜稀釋度的樣品勻液，各取 1 m L 分別加入無(wú)菌培養(yǎng)皿內(nèi)每皿中加入 1 5 m L ～ 2 0 m L平板計(jì)數(shù)瓊脂培養(yǎng)基，混勻培養(yǎng)計(jì)數(shù)各平板菌落數(shù)計(jì)數(shù)菌落總數(shù)報(bào)告 圖 91 食品中菌落總數(shù)的測(cè)定 1．取樣、稀釋 （ 1）以無(wú)菌操作，取檢樣 25g（或 25mL）剪碎放于含有 225mL 滅菌生理鹽實(shí)驗(yàn)報(bào)告 黃河水利職業(yè)技術(shù)學(xué)院 5 水或磷酸鹽緩沖液的滅菌玻璃瓶?jī)?nèi)（瓶?jī)?nèi)預(yù)置適量的玻璃珠）或滅菌乳缽內(nèi)，經(jīng)充分振搖 或研磨制成 1:10 的均勻稀釋液。固體檢樣在加入稀釋液后，最好置滅菌均質(zhì)器中以 8000～ 10000r/min 的速度處理 1min，制成 1:10 的均勻稀釋液。 （ 2）用 1mL 滅菌吸管吸取 1:10 稀釋液 1mL，沿管壁徐徐注入含有 9mL 滅菌生理鹽水或磷酸鹽緩沖液的試管內(nèi)，振搖試管混合均勻，制成 1:100 的稀釋液。 （ 3）另取 1mL 滅菌吸管，按上項(xiàng)操作順序，制 10 倍遞增稀釋液，如此再遞增稀釋一次。 （ 4）根據(jù)對(duì)樣品污染情況的估計(jì)選擇 2～ 3 個(gè)適宜稀釋度，分別在制作 10倍遞增稀釋的同時(shí)，以吸取該稀釋度的吸管移取 1mL 稀釋液于滅菌平皿中，每個(gè)稀釋度做兩個(gè)平皿。同時(shí)，分別吸取 1mL 空白稀釋液加入兩個(gè)無(wú)菌平皿內(nèi)作空白對(duì)照。 （ 5）及時(shí)將 15～ 20mL冷卻至 46℃的平板計(jì)數(shù)瓊脂培養(yǎng)基（可放置于 46177。 1℃恒溫水浴箱中保溫）傾注平皿，并轉(zhuǎn)動(dòng)平皿使其混合均勻。 2．培養(yǎng) （ 1）待瓊脂凝固后，翻轉(zhuǎn)平板，置 36177。 1℃溫箱內(nèi)培養(yǎng) 48177。 2h，水產(chǎn)品 30177。 1℃培養(yǎng) 72177。 3h。 （ 2）如果樣品中可能含有在瓊脂培養(yǎng)基表面彌漫生長(zhǎng)的菌落時(shí)，可在凝固后的瓊脂表面覆蓋一薄層瓊脂培養(yǎng)基（約 4mL），凝固后翻轉(zhuǎn)平板，按上述條件進(jìn)行培養(yǎng)。 可 用肉眼觀察，必要時(shí)用放大鏡或菌落計(jì)數(shù)器，記錄稀釋倍數(shù)和相應(yīng)的菌落數(shù)量。菌落計(jì)數(shù)以菌落形成單位（ colonyforming units， cfu）表示。 3．菌落計(jì)數(shù) （ 1）選取菌落數(shù)在 30～
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