【正文】 操作性能 精密度 批內五次重復 CV2％ 靈敏度 500— 1000 個熒光素分子 參考值 (百分數(shù)（絕對值） ) CD3+ %(11411880) CD4+ %(4781072) CD8+ %(393742) NK % (175567) Th/Ts 臨床意義 、 B 淋巴細胞亞群是重要的免疫狀態(tài)檢測指標 ，在腫瘤、免疫缺陷、病毒感染，自身免疫性疾病、創(chuàng)傷、急性感染、多臟器功能衰竭、器官移植等具有臨床診斷、病情判斷、治療等價值。 Th／ Ts比值升高 ：表示免疫功能亢進：見于自身免疫性疾病，如 SLE、類風濕性關節(jié)炎、自身免疫性溶血性貧血、重癥肌無力以及 HBsAg+乙肝等。 2： NK 細胞主要破壞各種腫瘤細胞和感染某些病毒、細菌的細胞 ，所以在抗腫瘤和防御疾病中起主要作用。NK 細胞也參與第二型超敏反應和移植物抗宿反應，白介素 2 治療后；外周血 NK細胞增加。將 HLAB27FITC/B7PE 單克隆抗體加入到全血中，與白細胞膜上相應的抗體結合，經(jīng)過溶血、洗滌（和固定）等步驟后，在流式細胞儀上進行分析，測定 HLAB7 陰性而 HLAB27 陽性細胞的平均熒光強度和所占的百分比。 采集部位 靜脈采血 抗凝劑 EDTA 或肝素抗凝血 要求 1．樣本量至少 1ml。 3．樣本白細胞計數(shù)應在 109/L 之間。 4．溶血樣本不能用。 儀器 BeckmanCoulter EPICS XL/FC500/Altra 樣本制備 ： 1)按照要求，分別向已編好號的試管中加入 20 ul 單克隆抗體和同型對照(IgG2aFITC／ IgG1PE) 2)分別向試 管中加入混勻的 100u1 抗凝血。 （ *溶血前確認 A/B/C 管路充滿并能打出液體） 5)洗、離心、上機測樣（ 備注： 測 B27一定要至少洗一遍方可上機檢測 ） 報告結果 報告陰陽性 操作性能 精密度 批內五次重復 CV2％ 靈敏度 500— 1000 個熒光素分子 參考值 陽性 ： HLAB27 陽性而 HLAB7 陰性細胞的平均熒光強度在 以上。 方案（ Protocol） CD55/CD59 測定 (流式細胞儀 ) 醫(yī)院檢驗科 操作規(guī)程文件號： 200 年 月 日起實施 第 1 版 (共 3 頁 ) 本規(guī)程每 2 年復審一次 復審日期： 年 月 日 復審人： 規(guī)程編寫者： 審 批 者： 批準日期： 年 月 日 文件分發(fā)部門和／或個人 院 檔案室保管者： 檢驗科 主任： 檢驗科 實驗室： CD55/CD59測定 方法 流式細胞儀 (BeckmanCoulter， 貝克曼庫爾特 ) 原理 ： 雙色直接免疫熒光法。血細胞(紅細胞和白細胞 )通過膜上的抗原分子與熒光素標記的 CD55或 CD59的多克隆抗體結合。 標本采集與處理 受檢者的準備 檢查對象生活飲食處于日常狀態(tài)，空腹采血。 2．樣本應在采集后 6 小時內處理，冷凍的標本不能用。 試劑 品牌 劑型 規(guī)格 貯存 貝克曼庫爾特 成分 1：單克隆抗體 液體 1ML 2— 8℃ 2：全血溶血試劑 液體 A：甲酸 液體 70ML 室溫 B：碳酸鈉等 液體 32ML 室溫 C：多聚甲醛 液體 14ML 室溫 3：鞘液 液體 20L 室溫 4：清洗液 液體 5L 室溫 5：熒光微球 液體 10ML 28℃ 質控品 BEKAMANCOULTER 產品，未開瓶的試劑于 28℃保存，可在有效期內保持穩(wěn)定，稀釋的試劑于 28℃可穩(wěn)定 2 周；每天校準一次：遇特殊情況隨時進行校準。分別向二管中加入樣品 100ul。 （ *溶血前確認 A/B/C 管路充滿并能打出液體） 3．離心后分別加入 CD55/CD59 10ul 和相應的同型對照 10ul。 4．洗滌離心 5．上機測樣 (二 )紅細胞 CD55／ CD59 檢測 1．準備 2 支流式細胞儀專用管，分別標記 2． 分別加入 CD55／ CD59 10ul 和相應的同型對照 10ul。 4．洗滌離心。 報告結果 報告百分數(shù) 操作性能 精密度 批內五次重復 CV2％ 靈敏度 500— 1000 個熒光素分子 參考值 CD5597% CD5997% PNH 的臨界值： RBC CD5995% WBC CD5990% PNH 的診斷值： RBC CD5991% 大部分 80% 中性粒細胞 CD5984% 臨床意義 用于 AA 和 PNH 的診斷和分型診斷。 方案（ Protocol） 血小板膜表面抗體測定 (流式細胞儀 ) 醫(yī)院檢驗科 操作規(guī)程文件號： 200 年 月 日起實施 第 1 版 (共 2 頁 ) 本規(guī)程每 2 年復審一次 復審日期： 年 月 日 復審人： 規(guī)程編寫者： 審 批 者： 批準日期： 年 月 日 文件分發(fā)部門和／或個人 院檔案室保管者： 檢驗科 主任： 檢驗科 實驗室： 血小板膜表面抗體測定 方 法 流式細胞儀 (BeckmanCoulter， 貝克曼庫爾特 ) 原理 ： 直接免疫熒光法。 標本采集與處理 受檢者的準備 檢查對象生活飲食處于日常狀態(tài)，空腹采血。 2．樣本 應在采集后 6 小時內完成，冷凍的標本或已固定的標本不能用。若 450 109/L， 樣本需要稀釋，用 PBS 稀釋；若 150 109/L，應多采集進行富集達到流式檢測的細胞數(shù)。 試劑 品牌 劑型 規(guī)格 貯存 聯(lián)科 成分 1：單克隆抗體 液體 1ML 2— 8℃ 2：全血溶血試劑 液體 A：甲酸 液體 70ML 室溫