級(jí)碩士高級(jí)免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)概述-在線瀏覽
2024-09-26 01:59本頁(yè)面
【正文】 （簡(jiǎn)便） Safety（安全） Saving（節(jié)約） 二、特異性與敏感性的關(guān)系 特異性高、敏感性低 敏感性高、特異性低 免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)概述 ? 抗原抗體反應(yīng) ? 淋巴細(xì)胞的檢測(cè)技術(shù) ? 細(xì)胞因子的檢測(cè)技術(shù) ? 免疫學(xué)常用的分子生物學(xué)技術(shù) ? 多克隆抗體 ? 單克隆抗體 ? 基因工程抗體 前兩者常用于實(shí)驗(yàn)研究，而后者用于臨床治療研究。但由于多克隆抗體含有針對(duì)多個(gè)抗原表位的抗體成分，也可能包括抗原變性后暴露的新抗原表位，因此，多克隆抗體在檢測(cè)變性抗原 ——如采用 Western Blot檢測(cè)蛋白時(shí)，其效果比單克隆抗體更敏感。 多克隆抗體 ?單克隆抗體 (mAb)是通過(guò) B細(xì)胞雜交瘤獲得 ?與多克隆抗體相比，單克隆抗體主要具有以下三個(gè)顯著特點(diǎn)（優(yōu)點(diǎn)）： ? ① 高度均質(zhì)性 ? ② 高度特異性 ? ③ 來(lái)源穩(wěn)定 ?不足： 制備方法比較復(fù)雜，價(jià)格昂貴，制備所需時(shí)間較長(zhǎng)。 高度均質(zhì)性 ? mAb只專(zhuān)一的識(shí)別抗原分子上單個(gè)抗原位點(diǎn)，因此容易獲得特異性抗體，較少產(chǎn)生交叉反應(yīng)。 來(lái)源穩(wěn)定 ?根據(jù)實(shí)驗(yàn)的目的不同，其分離、純化的純度要求也不同。 純度要求 ?單克隆抗體在制備過(guò)程中經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的篩選，因此應(yīng)根據(jù)不同的應(yīng)用目的選擇不同單克隆抗體亞類(lèi)，如標(biāo)明供 ELISA檢測(cè)用的單克隆抗體，可能不適合Western Blot檢測(cè)。 適用范圍 一抗和二抗 ? 一級(jí)抗體：抗原特異性的抗體 ? 二級(jí)抗體：抗抗體（針對(duì)一抗的 Fc段，具有種屬特異性） Ag Ag ? 沉淀反應(yīng) ? 凝集反應(yīng) ? 免疫標(biāo)記技術(shù) 抗原抗體反應(yīng)的特點(diǎn) 特異性 的﹡ 交叉反應(yīng) 可逆 的引力：氫鍵、疏水鍵、靜電引力、范德華力斥力： 階段抗原抗體特異性結(jié)合階段可見(jiàn)反應(yīng)階段 分子比例 與抗原抗體結(jié)合是否呈現(xiàn)可見(jiàn)的反應(yīng)現(xiàn)象密切相關(guān) 抗體過(guò)剩區(qū) 抗原過(guò)剩區(qū)等價(jià)區(qū)抗原與抗體的結(jié)合是 特異性 的﹡ 交叉反應(yīng)抗原抗體結(jié)合是 可逆 的引力：氫鍵、疏水鍵、靜電引力、范德華力斥力：電子云產(chǎn)生的排斥力抗原抗體反應(yīng)可分為兩個(gè) 階段抗原抗體特異性結(jié)合階段可見(jiàn)反應(yīng)階段抗原抗體的 分子比例 與抗原抗體結(jié)合是否呈現(xiàn)可見(jiàn)的反應(yīng)現(xiàn)象密切相關(guān) 抗體過(guò)剩區(qū) 抗原過(guò)剩區(qū)等價(jià)區(qū)抗原與抗體的結(jié)合是 特異性 的﹡ 交叉反應(yīng)抗原抗體結(jié)合是 可逆 的引力：氫鍵、疏水鍵、靜電引力、范德華力斥力：電子云產(chǎn)生的排斥力抗原抗體反應(yīng)可分為兩個(gè) 階段抗原抗體特異性結(jié)合階段可見(jiàn)反應(yīng)階段抗原抗體的 分子比例 與抗原抗體結(jié)合是否呈現(xiàn)可見(jiàn)的反應(yīng)現(xiàn)象密切相關(guān) 抗體過(guò)剩區(qū) 抗原過(guò)剩區(qū)等價(jià)區(qū)沉 淀反 應(yīng)（ Precipitation)血清、蛋白質(zhì)、細(xì)胞裂解液或組織浸液等可溶 性抗原與相應(yīng)抗體在電解質(zhì)存在的條件下結(jié)合出現(xiàn)沉淀物，這一類(lèi)反應(yīng)稱(chēng)為沉淀反應(yīng)。凝集反應(yīng)(Agglutination)細(xì)菌、紅細(xì)胞等顆粒性抗原或吸附于顆粒上的可溶性抗原（或抗體）中加入相應(yīng)抗體（或抗原），在電解質(zhì)存在的條件下形成凝集物的現(xiàn)象，稱(chēng)為凝集反應(yīng) 。標(biāo)記物質(zhì)與抗體（或抗原）的化學(xué)連接未改變抗體（或抗原）的免疫學(xué)特性，同時(shí)標(biāo)記物的性質(zhì)依然存在，因而極大的提高了反應(yīng)的靈敏度，可以對(duì)微量物質(zhì)進(jìn)行定性、定量或定位檢測(cè)。M還可對(duì)同一細(xì)胞的多種參數(shù)（如DNA、R、蛋白質(zhì)和細(xì)胞體積等）進(jìn) 蛋白質(zhì)和細(xì)胞體積等）進(jìn) 行多信息分析，是當(dāng)代生命科學(xué)研究領(lǐng) 行多信息分析，是當(dāng)代生命科學(xué)研究領(lǐng) 域中廣泛使用的一項(xiàng)新技術(shù)。免疫熒光法（區(qū)分不同的淋巴
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