【正文】 olume（進樣體積）Air Volume（空氣體積）0nLPre cln slv1（進樣前清洗溶劑1）2續(xù)表23直接進樣條件Pre cln slv2（進樣前清洗溶劑2）2Pre cln spl（進樣前清洗樣品）2Fill Volume（排氣體積）Fill Speed（針桿速度）5uL/sFill Stokes（拉桿次數(shù)）5Pullup Del（補償時間）300msInject to（進樣口）GCInj1（進樣口1）Inject Speed（進樣速度）50uL/sPre Inj Del（進樣前補償時間）500msPst Inj Del（進樣后補償時間）500msPst Cln Slv1（進樣后清洗溶劑1）3Pst Cln Slv2（進樣后清洗溶劑2）0靜態(tài)頂空（HS）條件Cycle（循環(huán)）HSInjSyringe（進樣針體積）Sample Volume（進樣體積）250uLIncubat Temp（振蕩箱溫度）140℃（液體）、150℃（干粉）Incubat time（振蕩時間）20min（液體）、10min（干粉）Agi Speed（振蕩速度）250rpmAgi on Time（振蕩開啟時間）5sAgi off Time（振蕩停止時間）2sSyringe Temp（進樣針溫度）℃Fill Speed（針桿速度）200ul/sPullup Del（補償時間）1sInject to（進樣口）GC Inj1（進樣口1）Inject Speed（進樣速度）500ul/sSyr Flushing（氣體吹針時間）120sGCRuntime（氣相運行時間） 實驗步驟 樣品的預處理將草果不同部位（殼、仁、果、莖、葉、芽）、不同產(chǎn)地（紅河、楚雄、麗江、大理、文山、玉溪）、不同炮制方法（凈制、炒制、鹽制、姜制、醋制）的草果于萬能中藥粉碎機中粉碎，過100目中藥篩，并儲存在密封袋中，貼上標簽。 樣品的制備，其中兩份分別置于50mL的具塞三角燒瓶中，超聲處理30min，超聲功率：200W，過濾，過濾，合并濾液，取適量體積的溶液分別加入直接進樣瓶和頂空進樣瓶；另一份草果干粉樣品直接加入頂空進樣瓶，待測。 數(shù)據(jù)處理采用中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統(tǒng)2004A版、Microsoft Office 201SPSS 。將待測樣品于GCMS進行檢測，分別改變GC條件的分流比、柱流量、色譜柱，討論分流比、柱流量、色譜柱對草果揮發(fā)性成分提取的影響，分流比分別設置為不分流、10:20:50：1，、色譜柱分別為Rtx5MS、HPFFAP、DB1701，不同分流比、柱流量、色譜柱的GCMS圖譜分別見圖3335，時間、信號三維圖譜分別見圖3336，圖31 不同分流比對草果超聲提取直接進樣揮發(fā)性成分影響的GCMS圖譜 注：從下往上分流比分別為不分流、10:20:50:1圖32 不同分流比對草果超聲提取直接進樣揮發(fā)性成分影響的時間、信號三維圖譜圖33 不同柱流量對草果超聲提取直接進樣揮發(fā)性成分影響的GCMS圖譜 注：、圖34 不同柱流量對草果超聲提取直接進樣揮發(fā)性成分影響的時間、信號三維圖譜圖35 不同色譜柱對草果超聲提取直接進樣揮發(fā)性成分影響的GCMS圖譜 注：從下往上色譜柱分別為Rtx5MS、DB170HPFFAP圖36 不同色譜柱對草果超聲提取直接進樣揮發(fā)性成分影響的時間、信號三維圖譜由圖332可以看出，當分流比為20:1時出峰較多、重疊峰少、雜峰少、峰形對稱、分離效果好。所以分流比為20:1時草果提取的揮發(fā)性成分多，而且準確。出峰很快，但是有重疊峰；，GC運行時間居中；，但是GC運行時間最長，在實驗過程中耗費時間。由圖336可以看出，在色譜柱Rtx5MS、DB170、HPFFAP中，色譜柱HPFFAP出峰最多，所以色譜柱為HPFFAP時草果提取的揮發(fā)性成分最多。，超聲處理30min，超聲功率：200W，過濾，過濾，合并濾液，取適量體積的溶液加入頂空進樣瓶。圖37 不同振蕩溫度對草果超聲提取頂空進樣揮發(fā)性成分影響的GCMS圖譜注：從下往上振蕩溫度分別為120℃、130℃、140℃、150℃圖38 不同振蕩溫度對草果超聲提取頂空進樣揮發(fā)性成分影響的時間、信號三維圖譜圖39 不同振蕩時間對草果超聲提取頂空進樣揮發(fā)性成分影響的GCMS圖譜 注：從下往上振蕩時間分別為10min、15min、20min、25min圖310 不同振蕩時間對草果超聲提取頂空進樣揮發(fā)性成分影響的時間、信號三維圖譜由圖339和3310可以看出，草果超聲提取頂空進樣揮發(fā)性成分的HS振蕩溫度為140℃，振蕩時間為20min時，GCMS圖譜出峰較多、重疊峰少、雜峰少、峰形對稱、分離效果好、節(jié)省時間，因此以下干粉頂空進樣實驗采用此HS條件為草果揮發(fā)性成分測定、GCMS指紋圖譜建立的最佳條件。圖311 不同振蕩溫度對草果干粉頂空進樣揮發(fā)性成分影響的GCMS圖譜 注：從下往上振蕩溫度分別為80℃、100℃、120℃、150℃圖312 不同振蕩溫度對草果干粉頂空進樣揮發(fā)性成分影響的時間、信號三維圖譜圖313 不同振蕩時間對草果干粉頂空進樣揮發(fā)性成分影響的GCMS圖譜注：從下往上振蕩時間分別為10min、15min、20min圖314 不同振蕩時間對草果干粉頂空進樣揮發(fā)性成分影響的時間、信號三維圖譜由圖31313和31314可以看出，草果干粉頂空進樣揮發(fā)性成分的HS振蕩溫度為150℃，振蕩時間為10min時，GCMS圖譜出峰較多、重疊峰少、雜峰少、峰形對稱、分離效果好、節(jié)省時間，因此以下干粉頂空進樣實驗采用此HS條件為草果揮發(fā)性成分測定、GCMS指紋圖譜建立的最佳條件。 圖315 不同提取進樣方式對草果揮發(fā)性成分影響的GCMS圖譜注：從下往上提取進樣方式分別為超聲提取直接進樣、超聲提取頂空進樣、干粉頂空進樣圖316不同提取進樣方式對草果揮發(fā)性成分影響的時間、信號三維圖譜由圖315可以看出，在同樣的實驗、儀器條件下，草果干粉頂空進樣提取的揮發(fā)性成分最多，說明對于揮發(fā)性成分提取而言，頂空提取比超聲提取消耗少，提取效率高。（2）草果樣品靜態(tài)頂空（HS）優(yōu)化條件：草果超聲提取頂空進樣振蕩溫度為140℃，振蕩時間為20min；草果干粉頂空進樣振蕩溫度為150℃，振蕩時間為10min。 以下實驗采取此優(yōu)化條件進行。在GCMS色譜工作站上打開數(shù)據(jù)文件，選擇積分方式：峰面積，方法：標準，%的色譜峰，分別對草果不同部位的揮發(fā)性GCMS離子色譜圖進行積分，注冊到質(zhì)譜進行檢索，輸出檢索結(jié)果，、保留相似度大于90%以上的化合物，與積分后的定性峰表進行對照，并結(jié)合相關文獻對檢索結(jié)果進行分析，確定草果揮發(fā)性成分的化學名稱、分子式，通過化合物的CAS號鑒定其結(jié)構(gòu)，用峰面積歸一法測定草果不同部位的揮發(fā)性成分的相對百分含量。表31草果不同部位揮發(fā)性成分的測定結(jié)果序號保留時間（min）化合物名稱分子式結(jié)構(gòu)式相對百分含量（%）果殼仁莖葉芽12正丁基呋喃2butylfuranC8H12O————24甲基1戊醇4methyl1pentanolC6H14O—————31戊烯3醇1penten3olC5H10O—————4α水芹烯αphellandreneC10H165松油烯terpileneC10H16—62庚酮2heptanoneC7H14O—————7庚醛heptanalC7H14O—8檸檬烯limoneneC10H16——91,8桉葉素1,8cineoleC10H18O10青葉醛leaf aldehydeC6H10O————112正戊基呋喃2pentyl furanC9H14O——12萜品烯terpineneC10H16續(xù)表31序號保留時間（min）化合物名稱分子式結(jié)構(gòu)式相對百分含量（%）果殼仁莖葉芽13（E)β羅勒烯(E)βocimeneC10H16—————14對傘花烴pcymeneC10H14—15萜品油烯terpinoleneC10H16—————162辛酮2octanoneC8H16O————17辛醛octanalC8H16O18乙偶姻acetoinC4H8O2———19丙酮醇acetolC3H6O220甲基庚烯酮methylheptenoneC8H14O21正己醇hexyl alcoholC6H14O—222壬酮2nonanoneC9H18O————23壬醛nonanalC9H18O24反2辛烯醛(E)2octenalC8H14O續(xù)表31序號保留時間（min）化合物名稱分子式結(jié)構(gòu)式相對百分含量（%）果殼仁莖葉芽252,4二甲基苯乙烯2,4dimethyl styreneC10H12—————26蘑菇醇mushroom alcoholC8H16O———27α蓽澄茄油烯αcubebeneC15H24—28醋酸glacial acetic acidC2H4O2—29水合檜烯sabinene hydrateC10H18O———30乙酸辛酯octyl acetateC10H20O2—————31糠醛furfuralC5H4O2——32香茅醛citronellalC10H18O————33可巴烯copaeneC15H24O——34癸醛decanalC10H20O352壬醇2nonanolC9H20O—————36蟻酸formic acidCH2O2————— 續(xù)表31序號保留時間（min）化合物名稱分子式結(jié)構(gòu)式相對百分含量（%）果殼仁莖葉芽37反式2壬烯醛(2E)nonenalC9H16O———38芳樟醇linaloolC10H18O—————391辛醇1octanolC8H18O———40乙酸冰片酯bornyl acetateC12H20O2—————412,3丁二醇2,3butanediolC4H10O2—————421石竹烯lcaryophylleneC15H24—————432十一酮2undecanoneC11H22O—————444萜烯醇4carvomenthenolC10H18O—45香樹烯cyclopropa[e]azuleneC15H24——46反式2癸烯醛trans2decenalC10