分子生物學(xué)考點答案-在線瀏覽
2024-08-07 13:23本頁面
【正文】 的一個關(guān)鍵酶, 它可催化胸苷磷酸化轉(zhuǎn)變成為dTMP, 繼續(xù)磷酸化生成dTTP, 參與DNA的生物合成。34基因突變：是基因組DNA分子在結(jié)構(gòu)上發(fā)生堿基對組成或排列順序的改變（通常它只涉及基因中部分序列的變化），并引起個體表型的改變, 而使生物體發(fā)生遺傳性變異。 36錯義突變：是指堿基序列的改變引起了產(chǎn)物氨基酸的序列改變。如果該基因是必需基因，則該突變?yōu)橹滤劳蛔?。如賴氨酸的密碼子AAG突變?yōu)榻K止密碼子TAG,使肽鏈合成過早終止, 因而蛋白質(zhì)產(chǎn)物一般沒有活性。 38限制性核酸內(nèi)切酶：是一類能夠識別雙鏈DNA分子中的某種特定核苷酸序列，并由此切割DNA雙鏈結(jié)構(gòu)的核酸內(nèi)切酶39基因拼接：將有共同限制性內(nèi)切酶切點的基因連接起來形成多種基因雜合體，這個過程稱為基因拼接。40基因缺失：將原基因中的非功能區(qū)域的編碼子人為地使之缺失的過程稱為基因缺失，所表達(dá)的產(chǎn)物相對分子質(zhì)量雖然小了，但有時可提高表達(dá)效率，有時還可降低一些毒性作用。主要由兩種類型：取代型的重組病毒載體和重組的病毒質(zhì)粒載體?！?3基因工程多肽疫苗：使微生物對人體具保護(hù)作用的抗原基因經(jīng)體外重組表達(dá)后所制備的生物活性多肽類疫苗稱基因工程多肽或亞單位疫苗。44基因置換(gene reptacement)：是指將致病基因整個地被有功能的正?；蛩脫Q，使致病基因永久地得到更正。45基因修正(gene correction)是指將致病基因的突變堿基序列得以糾正，而正常序列部分予以保留，使突變的致病基因恢復(fù)正常功能。 46基因修飾(gene augmentation)則是指將目的基因?qū)肴毕菁?xì)胞或其它細(xì)胞，目的基因的表達(dá)產(chǎn)物可修飾和改變?nèi)毕菁?xì)胞的功能或使原有的功能得到加強(qiáng)。SiRNA的基因干擾可造成靶基因（異?；颍┑氖Щ睿ɑ虺聊＿@樣，生育的動物為轉(zhuǎn)基因動物。49動物克?。簞游锟寺∈且环N通過核移植過程進(jìn)行無性繁殖的技術(shù)。這種胚胎被移植到生殖周期相近的母體之中，可以發(fā)育成為正常動物個體。這種不經(jīng)過有性生殖過程，而是通過核移植生產(chǎn)遺傳結(jié)構(gòu)與細(xì)胞核供體相同動物個體的技術(shù)，就叫做動物克隆。51 ES細(xì)胞：胚胎肝細(xì)胞，不僅具有全能分化能力，而且可以在體外培養(yǎng)建立細(xì)胞株52基因組：表示某物種單倍體的總DNA。53基因表達(dá)：是目的基因DNA在導(dǎo)入的細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)錄成mRNA, 再以mRNA指導(dǎo)翻譯成蛋白質(zhì)。這樣低濃度的mRNA被擴(kuò)增放大易于檢測。55載體可以插入核酸片段、能攜帶外源核酸進(jìn)入宿主細(xì)胞，并在其中進(jìn)行獨立和穩(wěn)定的自我復(fù)制的核酸分子56基因 基因就是指編碼有功能蛋白質(zhì)多肽鏈或RNA分子所必須的全部核酸序列。所謂基因的新概念是隨著近年分子生物實驗技術(shù)的發(fā)展從分子水平上研究基因的結(jié)構(gòu)和功能，提出的移動基因，斷裂基因，重疊基因，假基因等基因的新概念。2真核細(xì)胞基因組中的基因常有內(nèi)含子存在，能否在原核細(xì)胞中表達(dá)？能，為什么？不能，為什么？不能，因為原核細(xì)胞缺乏對真核基因中內(nèi)含子的剪接功能和轉(zhuǎn)錄后加工系統(tǒng)。 基因表達(dá)是以操縱子為單位，操縱子由數(shù)個相關(guān)的結(jié)構(gòu)基因和調(diào)控功能的部位組成的。3試述DNA分子的結(jié)構(gòu)及其意義。DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定橫向靠兩條鏈間互補堿基的氫鍵維系，縱向則靠堿基平面的疏水性堆積力維持。4 構(gòu)建cDNA文庫的意義？常用載體及構(gòu)建過程如何？答：意義：通過構(gòu)建cDNA文庫能直接分離到生命活動過程中的一些調(diào)控基因及了解這些基因所編碼的蛋白質(zhì)的相互作用關(guān)系．因此cDNA文庫的構(gòu)建是基因克隆的重要方法之一，從cDNA文庫中可以篩選到所需的目的基因，并直接用于該目的基因的表達(dá)。常用載體是質(zhì)粒（λ噬菌體）。①機(jī)械斷裂法:用超聲波或高速攪拌DNA溶液斷裂片段兩端沒有與克隆載體匹配的粘末端，因此插入載體之前還需要進(jìn)行修飾加工，少用②限制性內(nèi)切酶降解（鳥槍法）過去用EcoRⅠ,現(xiàn)在用Sau3A斷裂片段兩端有與克隆載體匹配的粘末端，可以直接與處理過的載體連接。6什么是限制性核酸內(nèi)切酶？限制性核酸內(nèi)切酶是可以識別DNA的特異序列，并在識別位點或其周圍切割雙鏈DNA的一類內(nèi)切酶，簡稱限制酶。Ⅰ型限制性內(nèi)切酶既能催化宿主DNA的甲基化，又催化非甲基化的DNA的水解；而Ⅱ型限制性內(nèi)切酶只催化非甲基化的DNA的水解。 又稱Sanger（桑格）雙脫氧鏈終止法。測序過程需要先做一個PCR反應(yīng)。由于雙脫氧核糖核酸多脫了一個氧原子，一旦它被加入到DNA鏈上，這個DNA鏈就不能繼續(xù)增加長度。目前最普遍最先進(jìn)的方法，是將雙脫氧核糖核酸進(jìn)行不同熒光標(biāo)記。由于ddATP, ddGTP, ddCTP, ddTTP（4種雙脫氧核糖核酸）熒光標(biāo)記不同，計算機(jī)可以自動根據(jù)顏色判斷該位置上堿基究竟是A，T，G，C中的哪一個。答：圖在P183頁 預(yù)先設(shè)計一個含有突變序列的引物2，第一輪以引物2和引物3擴(kuò)增出短片段DNA 。？答：四大里程碑：1944年Oswald報道肺炎球菌轉(zhuǎn)化實驗，明確遺傳物質(zhì)是DNA；1953年James waston和Francis Crick闡明了DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)(半保留復(fù)制及其中心法則)；遺傳密碼子的破譯；基因轉(zhuǎn)移載體的發(fā)現(xiàn)。：10 基因重組是常用哪幾種載體？其共同特點如何？ 答：常用載體的種類：質(zhì)粒、噬菌體衍生物（COS、M13）、動物病毒；共同特征：①自主復(fù)制②易于擴(kuò)增分離純化③有非必需區(qū)④有單一酶切位點（多克隆位點）單一酶切位點：一種酶在一個載體上只有一個酶切位點；多克隆位點：一個載體上的某一個區(qū)域含有多個單一酶切位點⑤有選擇標(biāo)記基因⑥表達(dá)載體還應(yīng)有表達(dá)調(diào)控元件（啟動子、增強(qiáng)子、終止子,SD序列）11作為理想的質(zhì)粒載體有哪些基本條件？答：作為理想的質(zhì)粒載體，應(yīng)具備以下幾個條件（1）能自主復(fù)制，即本身是復(fù)制子（2）具有一種或多種限制酶的單一切割位點，并在此位點中插入外源基因片段，不影響本身的復(fù)制功能；（3）在基因組中有12個篩選標(biāo)記，為寄主細(xì)胞提供易于檢測的表型特征，（4）分子量要小，多
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