【正文】 官狀態(tài) 是選穴的重要依據(jù)，穴位的組合和刺激方法是決定療效的關(guān)鍵因素。 圍繞上述的關(guān)鍵科學(xué)問(wèn)題，選擇功能性腸病為切入點(diǎn)，以針灸傳統(tǒng)理論、針灸臨床實(shí)踐以及現(xiàn)代研究證據(jù)為指導(dǎo)，采用系統(tǒng)生物學(xué)、腦科學(xué)、基因敲除技術(shù)等多學(xué)科結(jié)合的方法手段，系統(tǒng)研究針灸雙向調(diào)節(jié)效應(yīng)的科學(xué)機(jī)制。 主要研究以下 3 方面的內(nèi)容。 ―五臟有疾也，應(yīng)出十二原 ‖。也說(shuō)明穴位的功能和機(jī)體的機(jī)能狀態(tài)密切相關(guān)。 因此， 本研究 擬采用臨床觀察和實(shí)驗(yàn)相結(jié)合研究腸道病變時(shí)體表反應(yīng)點(diǎn)及與常用治療腸道 疾 病穴位的關(guān)系： （ 1） 腸道疾病時(shí)體表牽涉痛 敏化 點(diǎn)分布與穴位的關(guān)系；研究?jī)?nèi)臟病 理情況下 ―穴位 ‖感覺(jué)敏感度的變化及相應(yīng)組織深部微理化環(huán)境的變化，特別是與感受器敏化相關(guān)的物質(zhì)如緩激肽、 P 物質(zhì)、 5HT、 K+濃度及相關(guān)生物活性物質(zhì)的變化，闡明這些微理化環(huán)境改變?cè)谘ㄎ粡纳頎顟B(tài)下的相對(duì)沉寂到病理情況下的喚醒（敏化）過(guò)程中的作用。在此基礎(chǔ)上，用蛇毒選擇性破壞坐骨神經(jīng)的 A類纖維，或用辣椒素選擇性破壞坐骨神經(jīng)的 C類纖維 （或用 新生大鼠辣椒素處理 ） ，觀察腿部Evans blue 滲出反應(yīng)的變化，并與健側(cè)作對(duì)照。 （ 3） 采用腸道局部損傷或傷害性刺激引起神經(jīng)源性炎性反應(yīng)后經(jīng)尾靜脈注射 Evans 蘭引起皮膚蘭點(diǎn)滲出反應(yīng)點(diǎn)的分布與相關(guān)穴位的關(guān)系； （ 4） 用微電極記錄延髓全身會(huì)聚神經(jīng)元的活動(dòng)，用 von Frey 毛檢測(cè)體表各部位刺激對(duì)神經(jīng)元反應(yīng)的敏感度，然后用上述方法造成內(nèi)臟局部傷害性刺激；在此基礎(chǔ)上觀察神經(jīng)元對(duì) 穴位的 敏化 變化 。 2． 針刺對(duì)功能性腸病雙向調(diào)節(jié)的療效與 效應(yīng)規(guī)律 研究 采用多中心隨機(jī)對(duì)照臨床研究方法，觀察不同穴位配伍方案針刺治療功能性腸病 （功能性便秘和功能性腹瀉） 的臨床療效。 依據(jù)針灸經(jīng)絡(luò)理論及臨床經(jīng)驗(yàn)， 按照針灸臨床選穴原則 ，設(shè)立 ： ① 俞募配穴（ 功能性 單元取穴）組：天樞、大腸俞（雙側(cè)）； ② 合治內(nèi)腑的 循經(jīng)遠(yuǎn)道配穴（ 功能性 集元取穴）組： 曲池 、上巨虛（雙側(cè)）； ③ 合募俞配穴（單元 +集元取穴）組：天樞、大腸俞、 曲池 、上巨虛（單側(cè)）； ④ 敏化 穴 治療組：選擇經(jīng)檢測(cè)具有 敏化現(xiàn)象 的 4 個(gè) 穴位進(jìn)行臨床觀察研究 ； ⑤ 標(biāo)準(zhǔn)藥物治療組。 （ 7） 探討 相同的針刺方法刺激不同的穴位是否對(duì)腹瀉和便秘兩種不同機(jī)能狀態(tài)均可產(chǎn)生調(diào)節(jié)效應(yīng)（雙向調(diào)節(jié)），以闡明穴位固有特性在決定和影響針刺雙向調(diào)節(jié)效應(yīng)中的作用及其規(guī)律；以闡明機(jī)體機(jī)能狀態(tài)不同、穴位不同在決定和影響針刺雙向調(diào)節(jié)效應(yīng)中的作用及其普適性規(guī)律。 （ 9） 分別在功能性腹瀉患者和便秘患者，觀察在針刺得氣與非得氣的情況下，應(yīng)用 MRI 觀察針刺得氣、治療效應(yīng)以及大腦皮層之間的內(nèi)在聯(lián)系。在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分別研究針刺功能性集元穴位（曲池、上巨虛）對(duì)腸道運(yùn)動(dòng)的促進(jìn)作用，與不同劑量的乙酰膽堿促進(jìn)腸道運(yùn)動(dòng)的效應(yīng)作比較，量化針刺強(qiáng)度等同于多大的藥物劑量。 3．針刺 雙向調(diào)節(jié)效應(yīng)的生物學(xué)基礎(chǔ)研究 以不同功能性腸道疾病動(dòng)物模型系統(tǒng)研究 針刺 不同穴位對(duì)腸道功能的雙向調(diào)節(jié)效應(yīng)，明確是否同一穴位對(duì)不同生理病理狀態(tài)下的腸 道 有雙向調(diào)節(jié)效應(yīng)，或者是不同穴位才能表現(xiàn)出雙向調(diào)節(jié)效應(yīng)。根據(jù)經(jīng)脈 臟腑相關(guān)聯(lián)系原則選穴，并以異經(jīng)穴位、同神經(jīng)節(jié)段穴位、異神經(jīng)節(jié)段穴位作比較。系統(tǒng)研究針刺不同穴位對(duì)腸道運(yùn)動(dòng)的影響。 （ 12） 系統(tǒng)研究 針刺 的雙向調(diào)節(jié)效應(yīng)，明確是否同一穴位對(duì)不同生理病理狀態(tài)下的內(nèi)臟器官有雙向調(diào)節(jié)效應(yīng)，或者是不同穴位才能表現(xiàn)出雙向調(diào)節(jié)效應(yīng)。 （ 13） 闡明哪類感受器和神經(jīng)纖維介導(dǎo)了針刺的雙向調(diào)節(jié)效應(yīng)，為臨床提供相應(yīng)的針刺參數(shù)。 （ 14）系統(tǒng)觀察針刺這些促進(jìn)和抑制降腸道運(yùn)動(dòng)穴位對(duì)孤束核 ―增強(qiáng) ‖和 ―抑制 ‖神經(jīng)元活動(dòng)的調(diào)節(jié)效應(yīng)，以闡明穴位雙向調(diào)節(jié)作用及調(diào)節(jié)機(jī)制。 （ 16）在單純腹瀉 和便秘 的動(dòng)物模型，采用胃黏膜應(yīng)變片電極記錄腸道活動(dòng)，分析與腸消化、運(yùn)動(dòng)相關(guān)的生物活性物質(zhì)（如胃動(dòng)素、胃泌素等）的變化， 觀察不同穴位刺激對(duì)腸道 消化、運(yùn)動(dòng) 的影響和 對(duì) 排便功能的作用。 （ 17）觀察不同穴位的組合（① 天樞、大腸俞； ②曲池 、上巨虛； ③ 天樞、大腸俞、 曲池 、上巨虛 ）對(duì)胃腸順應(yīng)性、感覺(jué)和胃腸運(yùn)動(dòng)的變化 影響，研究不同穴位組合刺激對(duì)胃腸感覺(jué)和運(yùn)動(dòng)調(diào)節(jié)的協(xié)同性和拮抗性。 （ 18） 觀察不同穴位刺激在調(diào)節(jié)腸道運(yùn)動(dòng)的同時(shí)對(duì)自主神經(jīng)系統(tǒng)的效應(yīng)。然后進(jìn)一步研究拮抗穴位所產(chǎn)生的效應(yīng)有何變化？是否具有局部的優(yōu)勢(shì)原則？并進(jìn)一步探討穴位的協(xié)同和拮抗作用的機(jī)制和生物學(xué)原理。 （ 20） 選用交感神經(jīng)腎上腺素能 β2 受體特異性基因敲除的動(dòng)物模型（交感神經(jīng)腎上腺素能 β2 受體主要分布于消化道平滑肌上），該模型由于去除了交感神經(jīng)系統(tǒng)對(duì)腸道運(yùn)動(dòng)施加的抑制作用，從而表現(xiàn)腸道運(yùn)動(dòng)的加強(qiáng)（可出現(xiàn)腹瀉癥狀）。由于功能性單元穴位對(duì)腸道運(yùn)動(dòng)起抑制作用是通過(guò)交感神經(jīng)系統(tǒng)發(fā) 揮其特異效應(yīng)的，在交感神經(jīng)腎上腺素能β2 受體特異性基因敲除的動(dòng)物模型這部分功能將不會(huì)出現(xiàn)或明顯減弱。 （ 21）選用副交感神經(jīng)毒蕈堿乙酰膽堿能 M2M3 受體特異性基因敲除的動(dòng)物模型（毒蕈堿乙酰膽堿能 M2M3 受體主要分布于消化道平滑肌上），該模型由于去除了副交感神經(jīng)對(duì)腸道運(yùn)動(dòng)施加的興奮作用，從而表現(xiàn)腸道運(yùn)動(dòng)的抑制（可出現(xiàn)便秘癥狀）。由于功能性集元穴位對(duì)腸道運(yùn)動(dòng)起促進(jìn)作用是通過(guò)副交感神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)揮其特異效應(yīng)的，在副交感神經(jīng)毒蕈堿乙酰膽堿能 M2M3 受體特異性基因敲除的動(dòng)物模型這部分功能將不會(huì)出現(xiàn)或明顯減弱。 （ 22） 選用正常大鼠，觀察針刺不同穴位對(duì)腸道運(yùn)動(dòng)的調(diào)節(jié)的基礎(chǔ)上，給予 β2 受體激動(dòng)劑和拮抗劑，研究該受體參與針刺雙向調(diào)節(jié)腸道運(yùn)動(dòng)的程度。 （ 23）敲除傷害感受器基因（ Trpv1）后，研究不同穴位對(duì)腸道運(yùn)動(dòng)的調(diào)節(jié)作用。選用正常大鼠，觀察針刺不同穴位對(duì)腸道運(yùn)動(dòng)的調(diào)節(jié)的基礎(chǔ)上，采用特異性辣椒素受體阻斷、激動(dòng)劑，觀察該感受器參與針刺雙向調(diào)節(jié)作用的程度。 本項(xiàng)目建立針刺雙向調(diào)節(jié)效應(yīng)數(shù)據(jù)采集與分析系統(tǒng) , 具備遠(yuǎn)程協(xié)同工作功能。將采取健康人體、病人以及動(dòng)物多層次、多穴位、多指標(biāo)、系統(tǒng)研究的方法，觀察針刺治療功能性腹瀉和功能性便秘的雙向調(diào)節(jié)的治療效應(yīng)，揭示這種效應(yīng)的生物學(xué)基礎(chǔ)，歸納提升針灸學(xué)現(xiàn)代理論。研究腸道疾病體表反應(yīng)點(diǎn)與常用治療腸道疾病穴位之間的關(guān)系。解決穴位和所謂的非穴位的概念問(wèn)題，旨在闡述穴位的固定定位、旁開(kāi) “ 非穴位 ” 的對(duì)照點(diǎn)能否作為 ― 假針刺 組 選擇的重要問(wèn)題，是本項(xiàng)目研究工作的基礎(chǔ)性工作。根據(jù)針灸治療原則確定的穴位配伍方案研究不 同配穴方案 針刺 臨床療效的差異，對(duì)于明確腧穴在 針刺 雙向調(diào)節(jié)中的決定性作用具有重要意義，是本項(xiàng)研究的核心內(nèi)容。 課 題 4：針刺不同穴位對(duì)功能性腸病的雙向調(diào)節(jié)作用及機(jī)制 ? 與其他課題的關(guān)系及與總體目標(biāo)的關(guān)系。 課題 5：穴位 配伍對(duì)功能性腸病調(diào)節(jié)的協(xié)同與拮抗作用規(guī)律及機(jī)制 ， 與其他課題的關(guān)系及與總體目標(biāo)的關(guān)系 : 在已經(jīng)獲得不同穴位對(duì)腸道運(yùn)動(dòng)有不同的促進(jìn)或抑制功能的基礎(chǔ)上，探討不同穴位所存在的協(xié)同作用或拮抗作用；從而得出在研究基礎(chǔ)上的 針刺 協(xié)同作用穴位組方，避免拮抗作用的穴位組合。 課題 6：針刺對(duì)功能性腸病雙向調(diào)節(jié)與自主神經(jīng)功能的關(guān)系 ? 與其他課題的關(guān)系及與總體目標(biāo)的關(guān)系 : 在系統(tǒng)生物學(xué)理念指導(dǎo)下，采 用基因敲除動(dòng)物，敲除不同自主神經(jīng)系統(tǒng)受體，深入研究 針刺 不同穴位對(duì)腸道功能性紊亂變化的雙向調(diào)節(jié)機(jī)制與自主神經(jīng)功能的關(guān)系，是課題 5 的機(jī)制研究的進(jìn)一步深入。 最終目標(biāo)是通過(guò)中藥 ―十八反 ‖配伍關(guān)系及其科學(xué)實(shí)質(zhì)的系統(tǒng)研究，形成一個(gè)有結(jié)論性的、能夠指導(dǎo)臨床實(shí)踐的、具有理論性的研究成果。 （二）五年預(yù)期目標(biāo) 完成中藥 ―十八反 ‖烏頭組、甘草組、藜蘆組的系統(tǒng)毒性評(píng)價(jià)研究，明確回答各反藥組合反與不反的問(wèn)題； 完成烏頭組、甘草組、藜蘆組的各反藥配伍組合致毒 /增毒物質(zhì)基礎(chǔ)及機(jī)理研究，明確其配伍致毒 /增毒的化學(xué)實(shí)質(zhì)及生物學(xué)基礎(chǔ)； 完成烏頭組、甘草組、藜蘆組的各反藥配伍致毒 /增毒的多組分毒代動(dòng)力學(xué)及其體內(nèi)過(guò)程研究，闡明反藥配伍的相互作用規(guī)律； 確定中藥 ―十八反 ‖烏頭組、甘草組、藜蘆組各反藥配 伍組合的人體等效性毒效劑量范圍； 創(chuàng)建基于藥物相互作用的客觀表征中藥配伍禁忌量 毒 時(shí) 效關(guān)系的研究模式、方法和技術(shù)體系； 闡明中醫(yī)臨床常用代表性反藥組合及其同方配伍妨害治療的效應(yīng)機(jī)制與理論基礎(chǔ)； 揭示含反藥配伍組合及代表性方劑的宜忌條件和配伍關(guān)系； 完善中藥配伍禁忌理論，豐富和發(fā)展中藥配伍理論體系； 培養(yǎng)中藥配伍禁忌與藥物相互作用研究的學(xué)術(shù)創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)；培養(yǎng) 博士后 79名， 博士研究生 2028 名 ， 碩士研究生 5060 名，； 國(guó)內(nèi)外學(xué)術(shù)核心期刊發(fā)表論文 110130 篇，其中 SCI 收錄 2030 篇；申請(qǐng)國(guó)家發(fā)明專利 35 項(xiàng)；出版相關(guān)專著 12 部。 ―十八反 ‖是有條件的、動(dòng)態(tài)的配伍禁忌，這是有別于西藥禁忌的一個(gè)重要特點(diǎn)，即在特定的病理?xiàng)l件、特定的配伍關(guān)系和特定的給藥方式下， ―十八反 ‖中藥能有限利用。 項(xiàng)目總體研究思路的特色在于：以海量古今信息數(shù)據(jù)挖掘?yàn)橹?，集成藥物安全性評(píng)價(jià)、毒理毒代、毒效物質(zhì)、藥物相互作用等現(xiàn)代研究方法， 創(chuàng)建客觀表征中藥配伍禁忌量 毒 時(shí) 效關(guān)系的研究模式。從而對(duì)科學(xué)假說(shuō)進(jìn)行驗(yàn)證，揭示其科學(xué)內(nèi)涵，提煉形成創(chuàng)新知識(shí)和豐富發(fā)展中藥配伍禁忌理論。 圍繞項(xiàng)目總體目標(biāo)，緊扣擬解決的關(guān)鍵科學(xué)問(wèn)題， 設(shè)立了環(huán)環(huán)相扣的 6 個(gè)研究課題，集成各課題組在中藥配伍禁忌領(lǐng)域的特色優(yōu)勢(shì)開(kāi)展相關(guān)研究。 技術(shù)方法可行 本項(xiàng)目集成藥物安全性評(píng)價(jià)、毒理毒代、毒效物質(zhì)、藥物相互作用等現(xiàn)代研究方法，創(chuàng)建客觀表征中藥配伍禁忌量 毒 時(shí) 效關(guān)系的研究模式，以揭示 ―十八反 ‖配伍毒效表征及其機(jī)理，闡明其科學(xué)內(nèi)涵。 團(tuán)隊(duì)合理的知識(shí)結(jié)構(gòu)和相關(guān)積累是實(shí)現(xiàn)項(xiàng)目預(yù)期目標(biāo)的根本保證 項(xiàng)目組整合了我國(guó)在中藥 ―十八反 ‖相關(guān)領(lǐng)域具有深厚積累的學(xué)術(shù)團(tuán)隊(duì)，在相關(guān)研究積累中形成了集傳統(tǒng)中醫(yī)與臨床中藥，化學(xué)研究與毒效評(píng)價(jià)、信息科學(xué)與生物技術(shù)相結(jié)合、知識(shí)結(jié)構(gòu)合理是項(xiàng)目高質(zhì)量完成的根本保證。 創(chuàng)新點(diǎn) 在中醫(yī)藥理 論指導(dǎo)下，基于前期研究工作積累，采用多學(xué)科交叉技術(shù)和手段，開(kāi)展 ―十八反 ‖的系統(tǒng)研究，揭示其科學(xué)實(shí)質(zhì)，促進(jìn)中藥配伍理論的豐富與發(fā)展。 （ 2）通過(guò)對(duì) ―十八反 ‖三組反藥組合配伍關(guān)系的系統(tǒng)研究，客觀界定各反藥組合反與不反，明確配伍致毒 /增毒的化學(xué)實(shí)質(zhì)及生物學(xué)基礎(chǔ)，闡明反藥配伍的相互作用規(guī)律，揭示基于 ―十八反 ‖的中藥配伍禁忌科學(xué)內(nèi)涵，提煉形成 創(chuàng)新知識(shí)和豐富發(fā)展中藥配伍禁忌理論。 技術(shù)路線 互為補(bǔ)充 相互驗(yàn)證 基于“ 十八反 ”的 中藥配伍禁忌 理論基礎(chǔ)研究 安全 性評(píng)價(jià) 1. 單次給藥毒性評(píng)價(jià) 2. 多 次給藥毒性評(píng)價(jià) 3. 安全藥理評(píng)價(jià) 快速篩查毒性 評(píng)價(jià) 1. 高內(nèi)涵評(píng)價(jià) 2. 高通量篩選 3. 模式生物評(píng)價(jià) 客觀界定 中藥“十八反” 反藥配伍組合 “ 反 ” 與 “ 不反 ” 客觀評(píng)價(jià) 反藥 配伍組合 致毒 /增毒 特點(diǎn) 及其毒性程度 揭示 中藥“十八反” 配伍 致毒 /增毒 的作用 機(jī)理 闡明中藥“十八反”妨害治療 的效應(yīng)機(jī)制 與理論基礎(chǔ) 闡釋含有“十八反”的代表性方劑 宜忌條件與配伍關(guān)系 物質(zhì)基礎(chǔ) 研究 1. 毒效物質(zhì)基礎(chǔ)研究 2. 化學(xué)物質(zhì)庫(kù)的建立 妨害治療基礎(chǔ) 研究 1. 妨害作用的藥效學(xué)評(píng)價(jià) 2. 妨害作用的化學(xué)實(shí)質(zhì)研究 3. 妨害作用的生物學(xué)基礎(chǔ)研 究 “ 十八反 ” 反 藥配伍前后毒效評(píng)價(jià) 回答 ☆ “十八反 ”藥對(duì)反與不反？ ☆ 配伍致毒 /增毒 /減效程度與特點(diǎn)？ 量 毒 效關(guān)系 研究 1. 量 毒 關(guān)系 研究 2. 量 效關(guān)系 研究 毒效機(jī)制 研究 1. 體內(nèi)過(guò)程 研究 2. 藥物相互作用研究 反藥配伍的宜忌條件 研究 1. 臨床文獻(xiàn)回顧性調(diào)查 2. 適宜病證效應(yīng)評(píng)價(jià) 3. 宜忌條件與配伍關(guān)系揭示 課題一 基于 “十八反 ”的中藥配伍禁忌數(shù)據(jù)挖掘與知識(shí)發(fā)現(xiàn)研究 主要研究?jī)?nèi)容 圍繞 ―十八反 ‖中藥配伍禁忌理論基礎(chǔ)研究的總體目標(biāo)，立足于中醫(yī)藥配伍理論和豐富的歷史經(jīng)驗(yàn)，開(kāi)展基于 ―十八反 ‖的中藥配伍禁忌數(shù)據(jù)挖掘與知識(shí)發(fā)現(xiàn)研究，通過(guò) ―十八反 ‖中藥文獻(xiàn)數(shù)據(jù)的收集考證，規(guī)范文獻(xiàn)信息，建立基于 ―十八反 ‖配伍禁忌相關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)；整合多種數(shù)據(jù)挖掘技術(shù)，建立適宜有效的數(shù)據(jù)挖掘平臺(tái)，進(jìn)行 ―十八反 ‖中 藥配伍關(guān)系的數(shù)據(jù)挖掘研究，尋求其潛在規(guī)律；通過(guò) ―十八反 ‖同方配伍的方劑分析，探討配伍禁忌的轉(zhuǎn)化條件和應(yīng)用特點(diǎn)；建立研究數(shù)據(jù)匯交管理平臺(tái)，使各課題之間形成有機(jī)整體，并為整合文獻(xiàn)和實(shí)驗(yàn)信息、形成知識(shí)發(fā)現(xiàn)體系、豐富中藥配伍禁忌理論提供支撐?；仡櫸迨陙?lái)的相關(guān)研究成果和研究經(jīng)驗(yàn)，為項(xiàng)目研究參考。 （ 2）通過(guò)規(guī)范文獻(xiàn)信息，建立基于 ―十八反 ‖的中藥配伍禁忌數(shù)據(jù)庫(kù)，主要包含 ―十八反 ‖中藥