【正文】 廣泛的藥理活性 ?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究又表明，決明子 具有降血壓、降血脂，保肝及抑菌等活性，被 應(yīng)用于多種降脂減肥的成方制劑中。 實(shí)驗(yàn) 過(guò)程中 測(cè)定了決明子中黃酮類化合物的含量， 采用乙醇回流水浴提取黃酮， 對(duì)比研究 提取時(shí)間、乙醇濃度、浸出溫度和料液比等因素 對(duì)提取效果的影響 ,再進(jìn)行 正交實(shí)驗(yàn)優(yōu)化工藝條件。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明乙醇提取法 效果最佳。以蘆丁為標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，繪制的標(biāo)準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)曲線其回歸方程為 C=，相關(guān)系數(shù) R2=。 關(guān)鍵詞 ： 決 明子，黃酮類化合物，乙醇 ， 提取工藝 II Abstract Semen Cassiaen a traditional Chinese herbal medicine, which is a rich source o f flavones,polysaccharides and anthraquinone,having a widespread activity in biology. Modern pharmacology study also shows that, cassia seed also have fall blood pressure, fall hematic fat, protect liver and bacteriostasis activities, be applied to various cholesterollowering diet drugs in preparations. Meanwhile, cassia seed and eating Chinese traditional medicine, is the good health drink raw chemical separation factors were adopted to extract flavonoids. This experiment determined the content of flavonoids in cassia seed, and cassia seed the extraction technology of flavonoids were Condensing Reflux Extraction were applied to extract flavonoids． When extracting， Five extraction factors of flavonoids from Semen Cassiaen were investigated and pared, including extracting time ， ethanol concentration， extracting temperature and ratio of liquid to solid. Again the optimization of process conditions for orthogonal experiment. Quantification was performed by means of UV–Vis spectrophotometry with chromogenic system of NaNO2–Al (NO3)3–NaOH. Experiments show that that the ethanol extraction was better than the other． The found optimum extraction conditions were that the ethanol concentration was 75% (v/v), solid–liquid ratio was 1:30, extracting temperature was 80176?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究又表明，決明子還具有降血壓、降血脂，保肝及抑菌等活性，被應(yīng)用于多種降脂減肥的成方制劑中。決明種子膠是又良好的懸浮劑和乳化劑，既可作甘汞、重質(zhì)陶土的懸浮劑，亦可作橄欖油、液體石蠟和松節(jié)油的乳化劑．決明半乳甘露聚糖可作食品，藥品和化妝品的增調(diào)劑及印染色素的載 體，以上這些都使得決明予具有極其廣泛的開(kāi)發(fā)利用前途。 所以，本文選取決明子，對(duì)其有效成分黃酮類化合物進(jìn)行提取研究。 研究 進(jìn) 展 決明子中黃酮成分在國(guó)內(nèi)的研究起步相對(duì)較晚，其中的一些功能效用也只是在相應(yīng)的文獻(xiàn)中提及過(guò)，并未涉足深入的研究。 這當(dāng) 中，具有潛在價(jià)值的 決明子 中黃酮成分在醫(yī)藥、化妝品、食品保健中應(yīng)用引起了人們的興趣。其性味甘、苦、咸、微寒，具有清肝明目，潤(rùn)腸通便之功效，是國(guó)家衛(wèi)生部公布的 69種藥食同源的物質(zhì)之一 1。 (1) 降 血 脂 、 降 血 壓作用 決明子水、醇提取物對(duì)試驗(yàn)動(dòng)物均有一定的降壓作用 [2]。其脂溶部分在 1mg／ kg對(duì)呈明顯降壓作用（ P)，醇溶和水溶部分在 6 15 mg／ kg出觀明顯降壓作 (P)。能明顯增加血清 HDLC含量及提高 HDLCTCM比值。蒽醌糖苷是決明子降血脂的主 要成分之一，其能減少腸道對(duì)膽固醇的吸收。 (2) 抑菌 、免疫作用 決明子水浸液、醇提液對(duì)大多數(shù)皮膚真菌和菌有不同程度的抑制作用。決明子蒽醌類對(duì)大腸桿菌金黃色葡萄球菌和青霉有較強(qiáng)的抑制作用 [4]。另外，決明子乙醇、氯 仿提取物對(duì)彎孢菌、金黃色葡萄球菌、鐮刀菌、油菜菌核病菌、棉花炭疽病菌 5種植物病原菌有一定抑制作用。 (3) 減肥作用 6％濃度的決明子水煎劑能明顯抑制營(yíng)養(yǎng)性肥胖大鼠體重增加，升高機(jī)體總抗氧化能力水平，且不影響食欲．無(wú)致腹瀉作用。 (4) 瀉下和潤(rùn)腸通便 目前普遍認(rèn)為蒽醌類是決明子起瀉下作用的主要成分。決明子生品石油醚、正丁醇提取物和炒決明子正丁醇提取物，能明顯縮短燥結(jié)便秘模型小鼠的首便時(shí)間，增加排便粒數(shù)及糞便重量，表明決明子瀉下作用的有效成分主要集中于石油醚及正丁醇提取物中．可能是油脂類及苷類成分。 (5) 保肝作用 口服 670mg／ kg決明子水提取物對(duì) CCT、中毒 小鼠肝臟有解毒保肝作用。 7 化學(xué)成分 研究 決明子為豆科植物決明 (Cassia obtusifolia L． )和小決明 (Cassia tora L． )的干燥成熟種子，主要含蒽醌類、萘駢一吡咯酮類、脂肪酸類、氨基酸和無(wú)機(jī)元素等成分。種子含大黃酚、大黃素甲醚 (physcion)、美決 明子素 (obtusifolin)、黃決明素 (chryso—obtusin)、決明素 (oblusin)、橙黃決明素 (aruantio obtusin)、大黃索 (emodin)、蘆薈大黃素 (aloe—emodin)、 1去甲基橙黃決明 (1desnxethvkllrysoobtusin)、黃決明索 2OD葡萄糖苷。因此，決明子蒽醌苷可能是通過(guò)減少外源性脂質(zhì)的吸收及增加排泄而降低血脂的。 蒽醌另一重要功效是免疫功能的調(diào)節(jié)作用。結(jié)果 SCAG體外給藥可明顯促進(jìn)小鼠 T及 B淋巴細(xì)胞的增殖，增強(qiáng)巨噬細(xì)胞吞噬中性紅的能力，提高 NK細(xì)胞活性及分泌 TNF活性，并可促進(jìn) MLR，拮抗絲裂霉素 c對(duì)淋巴細(xì)胞增殖的抑制作用。 多糖是由多個(gè)相同或不相同的單糖基以糖苷鍵相連而形成的高聚物，在自然界分布極廣。 決明子多糖效用抗氧化能力 [10]，體現(xiàn)在對(duì) H2O2誘導(dǎo)引起的紅細(xì)胞溶血有較明顯的抑制作用，且在一定的濃度范圍內(nèi)隨多糖濃度的增加，對(duì)紅細(xì)胞溶血的抑制作用也增加，當(dāng)多糖濃度達(dá) ％ (即加入糖體積小于 )時(shí)，抑制率達(dá) ％。 (3) 黃 酮類 決明中 含有紅鐮玫素 (rubrofu—sarunn)、決明子苷 (casslaside)、決明內(nèi)酯 (toralactone)、決明 f苷 (eassiaslde)B及 C、紅鐮攻素 6O龍膽二糖苷 (rubro—fusarin 6O gentlebioside)。 黃酮類物質(zhì)是本次研究的主要對(duì)象，其結(jié)構(gòu)、性質(zhì)、功效以及提取方法將在下節(jié)重點(diǎn)介紹。每克干品中含有含鉀 、鈣 ，鎂 、磷 、鈉 ，鐵 154微克、錳 35微克、銅 10微克。另外，大決明種子還含有十六烷～三十一烷，膽甾醇、豆甾酵、爭(zhēng)谷簪醇、 1,3二羥基． 3甲基蔥醌。不同種類的決明予還含有 Fe， Zn， Mn， Cu等多種無(wú)機(jī)元素，以及胱氨酸， T一羥基精氨酸，組氨酸，葡萄糖，半乳糖，木糖，棉子糖和天門冬氨酸等多種糖類及氨基酸。一般黃酮、黃酮醇及其甙類多顯灰黃～黃色，查耳酮為黃一橙色，而雙氫黃酮、雙氫黃酮醇、異黃酮類不顯色或微顯黃色。由于分子中多有酚羥基，故黃酮類化合物一般顯酸性。 黃酮類化合物的結(jié)構(gòu) 常見(jiàn)的黃酮類物質(zhì)有槲皮素、蘆丁、兒茶素、毛地黃黃酮、白藜蘆醇及其衍生物等 ,圖11所示為具有代表性的一中黃酮結(jié)構(gòu)。其基本結(jié)構(gòu)如圖 l2。 表 11黃酮類化合物的主要結(jié)構(gòu) 名稱 三碳鏈部分結(jié)構(gòu) 名稱 三碳鏈部分結(jié)構(gòu) 黃酮類 花色素類 （續(xù)表） 名稱 三碳鏈部分結(jié)構(gòu) 名稱 三碳鏈部分結(jié)構(gòu) 酮蠢 異黃酮類 二氫黃酮類 查耳酮類 10 二氫黃酮醇 橙酮類 黃 2烷 3醇類 黃烷一 3,4二醇類 決明子中黃酮類功效 近幾十年來(lái)隨著生物學(xué)、生物化學(xué)、生理學(xué)的日 新月異的發(fā)展，黃酮類化合物的生物活性的研究引起了國(guó)內(nèi)外的重視。到 2021年底，已鑒定的生物類黃酮有6400種。能夠降低冠心病發(fā)病率和死亡率，日本、美 國(guó)等國(guó)家的調(diào)查得出類似的結(jié)論。隨年齡增長(zhǎng)，體內(nèi)自由基增多。 (2) 抗癌抗腫瘤作用 許多黃酮類化合物具有抗腫瘤抗癌功能。 (3) 心血管功能 黃酮類化合物是臨床治療心血管的疾病的良藥，有強(qiáng)心、擴(kuò)張冠狀血管、增加冠脈血流量、抗心率失常、降壓、降低血膽固醇并使其與磷脂比例趨于正常、降低毛細(xì)血管滲透性等作用。 (4) 抗心腦血管疾病 黃酮類化臺(tái)物具有擴(kuò)張血管的作用，可以改善心肌平滑肌的收縮舒張功能，其作用機(jī) 11 制與黃酮類化合物調(diào)節(jié)平滑肌細(xì)胞 膜外 Ca2+內(nèi)流和細(xì)胞內(nèi) Ca2+釋放有關(guān) [14]。此外淫羊藿昔也具有擴(kuò)張血管的作用。 (6) 抑菌抗病毒 黃酮類化合物抗菌抗病毒作用已經(jīng)得到醫(yī)藥界的肯定。黃芩素 (BAI)是黃芩中抗菌的有效成分。 黃芩也具有抗真菌活性，對(duì)多種致病性真菌，如白色念珠菌，許蘭毛癬菌等有一定抑制作用。 (7) 降血糖血脂作用 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證明葛根黃酮、飛薊素等具有有降血脂和降低膽固醇的作用。麥胚黃酮卷柏黃酮可降低糖尿病大鼠血清過(guò)氧化脂含量，增強(qiáng)谷光甘肽過(guò)氧化酶的活力。此外枸杞黃酮等也有降血脂的作用。近年來(lái)上市的保健產(chǎn)品中，大部分功效成分都屬于黃酮類化合物。 決明子中黃酮類化合物提取方法 黃酮提取的方法很多，主要是根據(jù)黃酮化合物的結(jié)構(gòu)與來(lái)源的不同，溶解性差異較大，因此，應(yīng)根據(jù)其極性和水溶性的大小選擇合適的溶劑進(jìn)行提取。 12 決明子中黃酮類化合物為極性較大的甘元，所以主要用有機(jī)溶劑提取法 、微波提取法等方法。 (1) 水提法 水提法僅限于黃酮苷類物質(zhì)，在提取的過(guò)程中要考慮加水量、浸泡時(shí)問(wèn)、攪拌速度、煎煮時(shí)間及煎煮次數(shù)等因素?，F(xiàn)在，很少單一使用本方法。主要用堿性溶液是吸氫氧化鈉和石灰水 (氫氧化鈣水溶液 )。石灰水可以使～些鞣質(zhì)和水溶性雜質(zhì)沉淀生成鈣鹽沉淀，但浸出效果不如氫氧化鈉水溶液效果好，同時(shí)有些黃類化合物能與鈣結(jié)合成不溶性物質(zhì)，不被溶出。 (3) 有機(jī)溶劑提取法 這是國(guó)內(nèi)外使用最廣泛的方法。此方法主要用于提取脂溶性基團(tuán)占優(yōu)勢(shì)的黃酮類物質(zhì)，對(duì)設(shè)備要求簡(jiǎn)單，產(chǎn)品得率高，但成本較高，雜質(zhì)含量也較高。有機(jī)溶劑提取中最常使用的溶劑是乙醇，乙醇的濃度對(duì)總黃酮的 提取有較大的影響。本方法經(jīng)常與液—— 液萃取法、吸附洗脫法相結(jié)合，能得到更高純度的精制物。此法對(duì)黃酮類物質(zhì)的提取也取得了不錯(cuò)的效果，具有反應(yīng)高效性和強(qiáng)選擇性等特點(diǎn)，操作簡(jiǎn)單、副產(chǎn)物少，產(chǎn)率高及產(chǎn)物易 提純等優(yōu)點(diǎn)。 (5) 酶解法 對(duì)于一些黃酮類物質(zhì)被細(xì)胞壁包圍不易提取的原料使用酶解的法比較實(shí)用。 (6) 超臨界萃取法 13 超臨界 C02萃取技術(shù)是以液態(tài) C02為溶劑進(jìn)行提取的，是一種不同于傳統(tǒng)黃酮類物質(zhì)提取的新工藝，它的提取率與提取溫度、提取壓力、 C02消耗量等因素有關(guān)。同時(shí)，還可以通過(guò)控制臨界溫度和壓力達(dá)到選擇性提取和分離純化的目的。目前還難以進(jìn)行規(guī)?；a(chǎn)，但本法在生產(chǎn)銀杏黃酮的技術(shù)上取得了重大突破 . 黃酮類化合物的常用分析側(cè)定方法 (1) 比色法 這是分析提取物總黃酮含量最普遍的方法。 AlCl3顯色法 以蘆丁為標(biāo)樣，在測(cè)定液中加入 AlCl3搖勻，室溫放置 10min，按分光光度法，在 200500nm范圍內(nèi)迸行掃描，尋找二者重疊最吸收波長(zhǎng)，測(cè)定。 AlCl3顯色法原理是 Al3+與 3或5fE基與 4羥基，或者 B環(huán)的 3’,4二鄰二酚羥基絡(luò)合顯色。 研究的目的與內(nèi)容 本文的研究目的是應(yīng)用有機(jī)溶劑萃取 方法，提取決明子中黃酮類化合物。 本論文的 研究包括以下內(nèi)容： (1) 蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制。 (3) 不同提取劑對(duì)決明子中黃酮浸提效果的影響。 (5) 提取 溫度對(duì)決明子 中 黃酮浸提效果的影響 。 (7) 料液比對(duì)決明子 中 黃酮浸提效果的影響 。 15 第 2章 實(shí)驗(yàn)