【正文】 溶液 溶解５０克分析純碘化鉀于少量新煮沸放冷的蒸餾水中，再稀釋至１０００毫升，盛于棕色帶玻璃塞瓶中，最好冷藏。 ３、醋酸鹽緩沖液 ｐＨ＝４稱?。保矗犊藷o水醋酸鈉或２４３克三水醋酸鈉于蒸餾水中，加４８０克冰醋酸，用蒸餾水稀釋至１０００毫升。移入１０００毫升容量瓶中，加水至刻度，混勻，待標(biāo)定。加１Ｎ鹽酸或硫酸中和過量的氫氧化鈉，直至溶液接近中性為止（采用ｐＨ試紙）。 ６、０．１Ｎ碘溶液的標(biāo)定 準(zhǔn)確量取４０～５０毫升０．１０００Ｎ亞砷酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液于２５０毫升錐形瓶內(nèi)。如能在接近終點時向溶液中 通入二氧化碳使之飽和，可得到很準(zhǔn)確的滴定終點。準(zhǔn)確加入標(biāo)定后的０．１Ｎ碘標(biāo)準(zhǔn)溶液，用蒸餾水稀釋至刻度。 此溶液應(yīng)盛于棕色玻璃磨口瓶中，存放時避免陽光直射，不可接觸橡膠制品。冷卻后，加入０．１３克水楊酸作保存劑。 ２．將２００毫升污水樣加入５００毫升錐形瓶中。用０．０２８２Ｎ碘標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定，接近終點前，加入１毫升淀粉溶液，滴至剛顯淡藍(lán)色為終點（混勻后藍(lán)色不應(yīng)消失）。２００毫升污水樣消耗１毫升０．００５６４Ｎ硫代硫酸鈉溶液時，相當(dāng)于存在１毫克燉升余氯，故余氯在５毫克 /升時，需用５毫升試劑；余氯在１０毫克 /升時，應(yīng)加入１０毫升試劑。碘滴定法測得的余氯為總余氯，并按下式計算： 二污水總大腸菌群的檢驗方法 一、采樣方法 用采水器或其他滅菌容器采取污水樣１０００毫升，放入滅菌瓶內(nèi)，如果是經(jīng)加氯處理的污水，需加１．５％硫代硫酸鈉５毫升中和余氯?？偞竽c菌群數(shù)系指每升污水中，所含的總大腸菌群的數(shù)目。將此１５支管已接種的發(fā)酵管置于３７℃恒溫箱內(nèi)，培養(yǎng)２４小時。 １．伊紅美蘭培養(yǎng)基上的菌落色澤： （１）深紫黑色，具有金屬光澤的菌落； （２）紫黑色，不帶或略帶金屬光澤的菌落； （３）淡紫紅色、中心色較深的菌落。 （三）復(fù)發(fā)酵試驗：涂片、鏡檢的菌落，如為 革蘭氏陰性無芽孢桿菌，則挑取上述典型菌落１～３個接種于一支單料乳糖發(fā)酵管內(nèi)，然后置于３７℃恒溫箱內(nèi)，培養(yǎng)２４小時，產(chǎn)酸產(chǎn)氣者（包括小量產(chǎn)氣）即證實有大腸菌群存在。１）即是每升污水中的大腸菌群數(shù)。舉例：某一污水樣接種１０毫升的５支管中有５管為陽性；接種１毫升的５支管中有２管為陽性；接種１∶１０稀釋水樣１毫升（即原污水樣０． １毫升）的５支管皆為陰性，即結(jié)果為５、２、０，查附表１ 三沙門氏菌屬和志賀氏菌屬的檢驗方法 甲、污水 一、樣品處理 水樣５００毫升，加入滅菌的１０％無水碳酸鈉溶液２毫升，混合后，再加入滅菌的１０％硫酸鐵溶液１．７５毫升，混合均勻。進(jìn)行沙門氏菌屬和志賀氏菌屬培養(yǎng)。置于３７℃或４１℃恒溫箱；培養(yǎng)２４小時。 三、平板分離 １．沙門氏菌屬：取上述經(jīng)培養(yǎng)的沙門氏菌用增菌培養(yǎng)液，接種沙門氏菌屬 ——志賀氏菌屬（ＳＳ）平板或?？送幸颍ǎ龋澹耄簦铮澹詈喎QＨＥ）平板，置于３７℃恒溫箱培養(yǎng)２４小時。 ２．志賀氏菌屬：取上述經(jīng)培養(yǎng)的 志賀氏菌用增菌培養(yǎng)液，接種ＳＳ平板或ＨＥ平板，置于３７℃恒溫箱，培養(yǎng)２４小時。 ２．志賀氏菌屬：挑取在ＳＳ平板上，呈無色透明，直徑１～１．５毫米的菌落，挑取在ＨＥ平板上，呈綠色的菌落。 五、生化試驗及血清學(xué)檢驗 １．沙門氏菌屬：在三糖鐵培養(yǎng)基中，如不發(fā)酵乳糖，葡萄糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣或只產(chǎn)酸不產(chǎn)氣，一般產(chǎn)生硫化氫。雙相菌株應(yīng)證實兩相的Ｈ抗原，有Ｖｉ抗原的菌型（傷寒和丙型副傷寒沙門氏菌）應(yīng)用Ｖｉ因子血清檢查。沙門氏菌屬中除傷寒沙門氏菌和雞沙門氏菌不產(chǎn)氣外，通常發(fā)酵葡萄糖 、產(chǎn)氣、均發(fā)酵甘露醇和麥芽糖（但豬傷寒沙門氏菌、雛沙門氏菌不發(fā)酵麥芽糖），不分解乳糖、蔗糖，尿素酶和靛基質(zhì)為陰性，通常產(chǎn)生硫代氫。 如遇多價Ｏ血清不凝集而一般生化反應(yīng)符合上述情況時，可加做側(cè)金盞花醇、水楊素和氰化鉀試驗，沙門氏菌均為陰性。 生化試驗：應(yīng)進(jìn)行葡萄糖、甘露醇、麥芽糖、乳糖，蔗糖、靛基質(zhì)、硫化氫、動力、尿素試驗。志賀氏菌屬均不產(chǎn)生硫化氫，不分解尿素，無動力。 如遇多價血清玻璃片凝集試驗為陰性，而生化反應(yīng)符合上述情況時，可加做肌醇、水楊素、Ｖ — Ｐ、枸櫞酸鹽、氰化鉀等試驗。 血清學(xué)檢查：志賀氏菌屬分為４個群，先與多價血清作玻璃片凝集試驗，如為陽性，再分別與Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ群血清凝集，并進(jìn)一步與分型血清做玻璃片凝集，最后確定其血清型。 二、增菌培養(yǎng) １．沙門氏菌屬：吸取上述１∶１０混懸液１００毫升，加于１００毫升雙料亞硒酸鹽（ＳＦ）增菌液內(nèi)，也可加于亞硒酸鹽甘露醇（ＳＦＭ）或氯化鎂孔雀綠（ＭＭ）增菌液內(nèi)。 ２．志賀氏菌屬：吸取上述１∶１０混懸液１００毫升，加于雙料革蘭氏陰性（ＧＮ）１００毫升增菌液內(nèi)。 三、平板分離、挑選菌落、生化試驗及血清學(xué)檢查均與污水樣品檢 驗方法相同。再將已接種的四支試管置于４４℃恒溫箱，培養(yǎng)２４小時。置于３７℃恒溫箱培養(yǎng)１８～２４小時。進(jìn)行涂片，革蘭氏染色，鏡檢。 三、復(fù)發(fā)酵試驗：上述涂片鏡檢的菌落如為革蘭氏陰性無芽孢桿菌，則挑取該菌落的另一部分再接種于內(nèi)有倒管的乳糖發(fā)酵管中每管可接種分離自同一初發(fā)酵管的最典型的菌落１～３個。有產(chǎn)酸產(chǎn)氣者即證實有糞大腸菌群存在。例如接 種污泥量１克發(fā)酵管陽性（＋），０．１毫升發(fā)酵管陰性（－），０．０１毫升為陽性（＋），０．００１毫升為陰性（－）查附表１．２，當(dāng)陽性，陰性管數(shù)為＋－＋－時，糞大腸菌值為０．１。同時，在堆泥的中間也采５００克，一并放在塑料桶或搪瓷桶中。 二、污泥樣品的處理： 將現(xiàn)場帶回的樣品，倒于燒杯中，如遇樣品稍干且有結(jié)塊時 ，可將其倒于搪瓷盤中，再行攪拌，同時用大鑷子，一面攪拌，一面將硬塊夾碎，去掉肉眼能看出的夾雜物，如腐爛的布條、草梗、小石塊等。 三、污泥樣品的檢驗 上述樣品處理后，應(yīng)立即進(jìn)行檢驗，不能立即進(jìn)行檢驗時，可適當(dāng)加入約５ — １０毫升３～５％福爾馬林溶液或３％鹽酸溶液，瓶口上放置一個適宜大小的表面皿。 １．水洗 從已經(jīng)處理過的５００克污泥樣品中，稱?。保埃翱酥糜冢担埃昂辽F 形量杯中，加水約５００毫升。讓其自然沉淀，經(jīng)１～２小時后，倒去污泥上面的水，另換清水?dāng)嚢韬螅僮屍渥匀怀恋?，?jīng)半小時后，再倒去上面的水，另加清水，如此反復(fù)進(jìn)行３～４次，直到污泥上面的水接近無色為止。沉淀２０～３０分鐘后，倒去沉淀上面的液體、另加清水，如此反復(fù)水洗２～３次，最后倒去上清液，將沉淀物倒入１０毫升離心管中。 ３．離心飄浮 管內(nèi)注 入飽和食鹽水，經(jīng)用玻璃棒攪勻后，離心３分鐘，由于蛔蟲卵比飽和鹽水 中國最龐大的下資料庫 (整理 . 版權(quán)歸原作者所有 ) 第 14 頁 共 26 頁 的比重小，所以管中絕大多數(shù)的蛔蟲卵均浮聚在液面。 ４．離心沉淀 用毛細(xì)吸管反復(fù)吸取管中斜面上的浮膜于另一離心管中。然后小心倒去上清液。在培養(yǎng)過程中，清水不得少于０．５～１．０毫升。用毛細(xì)吸管 吸去上面的清水，余下含蟲卵的沉淀物。用毛細(xì)吸管吸一小滴沉淀物于水中。記錄５００個以上死、活蟲卵數(shù)。涂片不宜太厚。一般涂片厚度能以透過涂片尚能辯認(rèn)報紙上的字跡為宜。經(jīng)過１５～２０天的培育。而死卵則在同一條件下仍然保持單細(xì)胞期或停留于某一發(fā)育階段。 鏡檢時為達(dá)到較為快 速而明顯地辨認(rèn)幼蟲起見，可在載玻片上的滴一滴預(yù)先配好避光保存的３０％次氯酸鈉溶液〔商品名為安替福明（ａｎｔｉｆｏｒｍｉｎ〕以代替清水作成涂片，置于顯微鏡下觀察，可以看見被包在卵的最外層的蛋白質(zhì)